阳离子化地黄多糖:一种新型非病毒基因传递载体

通过氧化、席夫碱反应及与氮丙啶的接枝反应,对地黄多糖(RGP)进行阳离子化改性,得到新型载体阳离子化地黄多糖(C-RGP)。利用红外光谱、核磁共振氢谱、热重分析对C-RGP进行结构表征。粒径、电位分析以及琼脂糖凝胶电泳结果显示,C-RGP可以通过静电作用负载质粒脱氧核糖核酸(DNA)。噻唑蓝实验表明该载体没有细胞毒性。当构建载体与绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP)质量比为18/1时,转染效率高达(90±0.25)%。载体负载核糖核酸(RNA)干扰(RNAi)表达载体pshEGFR转染肝癌细胞SMMC-7721,靶基因hEGFR mRNA表达下调(67±1.61)%。

中药白芨提取物作为基因载体的制备与表征

目的分离纯化并制备阳离子型白芨多糖,研究其表征,探讨其作为基因载体的可能性。方法经热水抽提,乙醇沉淀,Sevag法脱蛋白,阴离子交换纤维素柱(DE-52)和凝胶柱(Sephadex G-100)色谱,分离纯化得白芨多糖,通过高碘酸钾氧化得到含醛基的还原性多糖,该还原性多糖与精胺在碱性条件下形成希夫碱式共轭物,经硼氢化钠还原得含伯胺基的阳离子型多糖,分别通过盐酸羟胺法和三硝基苯磺酸法测醛基与伯胺基的产量,并考察了氧化反应时间对反应产物的影响。进一步通过琼脂糖凝胶电泳检测该阳离子型多糖对基因的结合与保护作用。结果所提纯的白芨多糖为一种不含阳离子基团的非还原性多糖,通过胺化还原反应的方法可成功制备出含伯胺基的阳离子型多糖,红外光谱证实了多糖上伯胺基的存在,进一步的研究表明,该阳离子型多糖可以结合并保护质粒DNA。结论通过胺化还原反应方法制备的阳离子型白芨多糖,有望作为一种多糖基的多聚阳离子型基因载体在真核细胞基因转染中发挥作用。

介入途径下中药白芨提取物作为基因递送载体的可行性

目的:探讨经介入途径中药白芨提取物作为基因递送载体的可行性.方法:从中药白芨中提取其有效成分-白芨多糖,采用胺化还原法制备阳离子型白芨多糖,体外实验检测该阳离子型多糖对质粒DNA的结合与保护作用,以及阳离子白芨多糖载基因复合物对肝癌细胞系HepG2的转染,进一步通过介入途径经肝动脉给予该复合物,以GFP作为报告基因检测复合物在体内对活体兔肝细胞的转染.结果:所制备的阳离子型白芨多糖载基因复合物可以结合并保护质粒DNA免受DNA酶的降解;体外实验证实该复合物可以转染入体外培养肝癌细胞,以阳离子白芨多糖作为转染载体时转染效率要低于脂质体组,差异具有统计学意义(28.87%±3.27% vs 36.64%±6.87%,P<0.05).采用介入方法经肝动脉给药时复合物能靶向转染入活体兔肝细胞内并实现表达.结论:采用介入途径经肝动脉给药时阳离子白芨多糖载基因复合物可以实现活体肝细胞靶向转染,有望作为一种新型的多聚阳离子型的基因载体在基因治疗中发挥作用.

白芨多糖在药剂领域的应用

寻找理想的新型药物递送载体材料一直是药学领域的研究热点。白芨多糖是一种新型的天然高分子材料,作为制剂材料在药剂领域有着广泛的应用前景。本文对近十余年来国内外以白芨多糖及白芨多糖衍生物为制剂材料、药物载体,尤其是作为血管栓塞材料、基因载体和聚合物胶束材料在抗肿瘤药物递送领域的文章进行综述,以期为白芨多糖相关领域的科研工作者提供参考。

靶向性载体/基因复合物促进内皮细胞增殖

由于人工血管的表面缺乏活性内皮层,特别是小口径人工血管经常面临着长期通畅率低和再狭窄等难题,从而限制了其在临床上的应用。研究表明,通过基因复合物对内皮细胞转染可以在支架表面快速获得新生内皮层。近年来,基于靶向多肽修饰的基因载体为提高转染效率和降低载体毒性提供了有效的途径。本文详细介绍了目前用于基因转染的各种目的基因和基因载体,并以聚阳离子基因载体为基础,重点阐述了促进内皮细胞增殖的靶向性基因载体的研究进展,结合当前小口径人工血管研究进展,对采用基因转染方式实现其快速内皮化进行了分析和展望。