不同剂量阳离子化牛血清白蛋白对膜性肾病大鼠造模的影响

背景:应用阳离子化牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)复制实验膜性肾病动物模型的实验中,造模的合适剂量以及不同剂量C-BSA造模后成模比较的系统报道不多。目的:观察不同剂量C-BSA对膜性肾病成模的影响,探讨合适的C-BSA造模剂量。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-02/2008-01在泸州医学院附属医院病理学实验室及传染免疫学实验室完成。材料:健康雄性SD大鼠40只,由泸州医学院动物中心提供。Mr66000的天然牛血清白蛋白,由国药集团化学试剂成都有限公司提供。干预:将40只大鼠随机分为正常对照组、C-BSA3,10,16mg/kg组,每组10只。C-BSA3,10,16mg/kg组大鼠预免疫1周后,隔日尾静脉分别注射C-BSA3,10,16mg/kg正式免疫,正常对照组给予等体积生理盐水,均连续4周。主要观察指标:正式免疫第4周末处死大鼠,观察:①各组大鼠光镜、电镜、免疫荧光下的肾脏组织学改变情况。②各组大鼠处死前24h尿蛋白定量及尿蛋白浓度,血肌酐、尿素氮、白蛋白、胆固醇、三酰甘油及内生肌酐清除率。结果:实验过程中C-BSA10,16mg/kg组死亡3只,随机补充。①肾脏组织学改变:光镜下造模各组大鼠肾小球毛细血管壁均匀增厚,C-BSA16mg/kg组肾小球毛细血管基底膜增厚较其他组明显;电镜下C-BSA16mg/kg组基底膜上皮下有大量电子致密物沉积,"钉突"形成较其他组明显;免疫荧光C-BSA10,16mg/kg组可见IgG、C3沿肾小球毛细血管壁呈耀眼的弥漫性细颗粒状沉积,较C-BSA3mg/kg组更为明显。②临床指标变化:C-BSA10,16mg/kg组胆固醇、尿蛋白浓度明显高于其他2组(P<0.05),C-BSA16mg/kg组血浆尿素氮水平显著高于其他各组(P<0.05)。结论:不同剂量的c-BSA造模所致肾小球毛细血管基底膜增厚程度不一,C-BSA16mg/kg成模效果最佳,且模型稳定,临床表现典型,可重复性高。

阳离子化牛血清白蛋白膜性肾病大鼠模型的建立与鉴定

目的建立阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)膜性肾病(MN)大鼠模型。方法选取雄性SD大鼠33只,分为对照组5只,尾静脉低、中、高剂量组各7只,腹腔组7只。尾静脉低、中、高剂量组及腹腔组均皮下注射0.5 mg CBSA和等体积不完全弗氏佐剂(ICFA)预先免疫1周,对照组皮下注射等体积生理盐水和ICFA;1周后正式免疫:尾静脉低、中、高剂量组分别隔日尾静脉注射20、40、60 mg/kg C-BSA,腹腔组隔日腹腔注射60 mg/kg C-BSA,对照组尾静脉注射等体积生理盐水。正式免疫4周,采用生化指标(TC、TG、血清白蛋白)、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、PASM染色、Masson染色、免疫荧光及电镜观察鉴定模型。结果与对照组比较,尾静脉低、中、高剂量组TC、TG及24 h UTP均升高,血清白蛋白均降低,腹腔组24 h UTP升高(P均<0.05)。尾静脉低、中、高剂量组PASM染色示肾小球基底膜(GBM)弥漫性增厚、钉突改变;Masson染色示肾小球上皮下嗜复红复合物沉积;免疫荧光显示IgG沿GBM呈细小颗粒状沉积;电镜下见GBM弥漫性增厚;病理改变呈剂量依赖性加重。腹腔组光镜及电镜未见明显病理变化。结论成功采用尾静脉注射C-BSA建立大鼠MN模型,临床及病理鉴定符合MN的特征。

阳离子化牛血清白蛋白诱导膜性肾病模型大鼠足细胞相关蛋白的表达

背景:膜性肾病动物模型可模拟人类膜性肾病的发病机制,对疾病的研究具有重要意义。目的:观察膜性肾病模型大鼠足细胞相关蛋白nephrin、podocin的表达,以探讨其与膜性肾病发病的关系。方法:将40只SD大鼠随机分为模型组和对照组,每组20只。模型组取阳离子化牛血清白蛋白1 mg溶解于0.5 mL生理盐水中与等量不完全弗氏佐剂充分乳化后在颈背部皮下多点注射预免疫1周后正式免疫,尾静脉给予阳离子化牛血清白蛋白16 mg/kg,隔日1次,持续4周。对照组尾静脉注射等体积生理盐水。造模后第2,4周进行生化指标检测和病理学检查,RT-PCR法检测肾组织中nephrin和podocin mR NA的表达。结果与结论:(1)模型组24 h尿液总量明显减少,且出现了明显的蛋白尿,血清肌酐、尿素氮、胆固醇、三酰甘油水平显著升高,血清白蛋白水平显著降低,与对照组比较差异有非常显著性意义(P<0.01),且随着病变继续发展,病情加重;(2)病理检测发现模型组有不同程度肾小管扩张,肾小球基底膜增厚,系膜细胞及基质增生,呈典型的膜性肾炎改变;(3)模型组大鼠肾组织nephrin和podocin m RNA表达量低于对照组;(4)结果表明,nephrin、podocin表达减少可能使足细胞裂孔膜结构的完整性受损,肾小球滤过屏障破坏,导致蛋白尿。

昆仙胶囊对阳离子化牛血清白蛋白所致大鼠肾病模型的保护作用

目的:观察昆仙胶囊对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导的大鼠原位免疫复合物型肾炎模型的肾脏保护作用。方法:Wistar大鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组和昆仙胶囊大、中、小剂量组,每组12只。以C-BSA建立大鼠原位免疫复合物型肾炎模型。于预免疫同时给药,连续给药56d,给药期间动态观察各组大鼠体重、24h尿蛋白定量的变化,于正式免疫第5周结束时处死大鼠,腹主动脉取血,分离血清测定白蛋白、总蛋白、胆固醇、三酰甘油、尿素氮、肌酐的水平,留取肾脏,进行光镜和电镜病理形态学观察。结果:泼尼松组从第3周起,体重显著小于其余各组(P<0.05)。模型组24h尿蛋白定量于第4周(正式免疫后2周)升高,与正常组相比(P<0.01)。泼尼松组和昆仙胶囊大剂量组的尿蛋白水平降低,与模型组相比(P<0.05)。昆仙胶囊大、中、小剂量组均可改善肾小球病理损伤,而对肾小管间质病理损伤无明显改善作用。电镜观察显示昆仙胶囊可以减轻足细胞损伤程度,减轻基底膜厚度,改善电子致密物沉积情况。结论:昆仙胶囊大剂量可以降低C-BSA大鼠模型的24h尿蛋白定量,改善肾小球病理损伤,其机制可能与昆仙胶囊降低免疫复合物在基底膜沉积有关。

茶多酚对家兔阳离子化牛血清白蛋白肾炎模型的治疗作用(英文)

的 :探讨茶多酚对家兔阳离子化牛血清白蛋白模型 (C BSA)肾炎的治疗作用。方法 :按文献方法复制家兔C BSA肾小球肾炎模型 ,并用 3种不同剂量的茶多酚 (3 0 ,1 0 0和 3 0 0mg·kg-1)给C BSA肾小球肾炎模型兔灌胃 ,每日 1次 ,连续 1 4d。结果 :茶多酚不仅可以显著减少模型兔 2 4h尿蛋白分泌 ,降低血清肌酐和尿素氮水平 ,而且可以减轻肾小球病理损害 ,并且存在明显的量效关系。结论 :茶多酚对家兔C

温肾降浊散对大鼠阳离子化牛血清白蛋白肾小球肾炎模型的影响

目的:观察温肾降浊散对大鼠阳离子化牛血清白蛋白(Cationic bovine serum albumin,C-BSA)肾小球肾炎模型的影响。方法:随机选取10只为正常对照组,其余大鼠制备C-BSA肾小球肾炎模型,造模成功的大鼠随机分为模型对照组9只、雷公藤多苷治疗组8只、温肾降浊散高剂量组7只和温肾降浊散低剂量组9只。温肾降浊散高剂量组给予3.3 g·(kg·d)-1混悬液灌胃,低剂量组给予0.33 g·(kg·d)-1混悬液灌胃,每日1次。雷公藤多苷治疗组给予10 g·(kg·d)-1混悬液灌胃,每日1次。正常对照组和模型对照组灌胃给予等量蒸馏水,至实验第63天。取大鼠全血和尿液标本,分别做24 h尿蛋白定量、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serum creatinine,Scr)、三酰甘油(three acyl glycerin,TG)、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)及低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein,LDL-C)的测定。结果:与正常对照组比较,模型对照组24 h尿蛋白、Scr、TC、TG、BUN和LDL均升高,其中24 h尿蛋白、Scr、TC和TG具有显著性差异(P<0.05),BUN、LDL无显著性差异(P>0.05)。与模型对照组比较,雷公藤多苷治疗组、温肾降浊散高剂量组及低剂量组24 h尿蛋白、Scr、TC、TG、BUN、LDL均降低,其中24 h尿蛋白、Scr、TC、TG具有显著性差异(P<0.05),BUN、LDL无显著性差异(P>0.05)。与雷公藤多苷治疗组比较,温肾降浊散高剂量组及低剂量组各指标均无显著性差异(P>0.05),作用与雷公藤多苷相当。结论:温肾降浊散对大鼠C-BSA肾小球肾炎模型有较好的治疗作用。

肾复康片对阳离子化牛血清白蛋白诱发大鼠膜性肾小球肾炎的作用研究

研究肾复康片对大鼠膜性肾小球肾炎的治疗作用。Wistar大鼠73只,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药组、肾复康片高剂量组、中剂量组及低剂量组。除正常对照组外,其他各组大鼠尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白,诱发膜性肾小球肾炎。实验结束时测定大鼠24 h尿蛋白量、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)含量,采用苏木素-伊红染色观察肾脏组织病理状态。结果,与模型对照组相比,肾复康片高剂量组、中剂量组能明显降低24 h尿蛋白量、血中Scr含量(P <0.01)、BUN含量(P <0.05),增加TP含量(P <0.05)、Alb含量(P <0.01);病理结果显示,肾复康片能明显改善大鼠肾脏的组织学变化。肾复康片对大鼠膜性肾小球肾炎具有良好的治疗作用。

新型糖基阳离子表面活性剂与牛血清白蛋白的相互作用研究

采用荧光光谱法和三维荧光光谱法研究了糖基阳离子表面活性剂N,N-二甲基-N[3-(糖酰胺基)]丙基-N-十四烷基溴化铵(C_(14)DGPB)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。考察了各因素对C_(14)DGPB与BSA相互作用的影响。结果表明,当作用时间为30 min,NaCl的浓度为0.03 mol/L,pH=6.6时,为C_(14)DGPB与BSA相互作用的较佳条件;通过计算可以得到不同温度下C_(14)DGPB对BSA的动态猝灭常数、结合参数和热力学参数;由热力学参数确定它们之间的作用力主要是疏水作用力,对酪氨酸和色氨酸的疏水微环境影响较大。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物对牛血清蛋白微囊化和微球表征

目的:利用不同配比聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA),采用双乳化法,将异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白(BSA-FITC)包封制成微球;考察PLGA共聚物比例和相对分子质量对微球平均粒径、包封效率和释放方式的影响。方法:将异硫氰酸荧光素标记的牛血清蛋白溶解在乙酸乙酯中,超声波频率28 kHz,功率40 W,超声波作用时间5 min,以形成水/油乳液;将初级乳液快速转移到含聚乙烯醇的水性介质,通过两次乳化处理后,得到微球;计算产品收率、封装效率、微球粒度分布和释放量。结果:异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白包埋在聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球中,当共聚物聚乳酸与羟基乙酸质量比为75∶25(MW 40~75 kDa)时,具有最高的产品收率和封装效率,分别为51.04%和100%;通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白释放结果,释放量低于25%。结论:PLGA可作为生物药品的包封材料。

牛血清白蛋白致免疫性肝纤维化动物模型的研究

用牛血清白蛋白(BSA)复制免疫损伤性肝纤维化模型,经肝组织光镜和电镜病理学观察和肝胶元蛋白含量测定,肝纤维化发生率为92.3％(12/13)。用血清学红细胞膜表面受体和酶免疫组化等免疫学检测,体内有BSA抗体形成,循环免疫复合物异常增高,肝组织内有BSA或BSA-抗BSA复合物沉积。证明为免疫复合物介导的Ⅲ型变态反应所致的肝损害。

虫草多糖抗牛血清白蛋白免疫损伤性肝纤维化作用的研究

研究证明,虫草菌丝有一定抗肝纤维化作用,虫草多糖为虫草菌丝的有效成份之一,对慢性肝炎有一定疗效,但其抗肝纤维化的作用尚未见系统研究。为此,本文通过虫草多糖对牛血清白蛋白免疫损伤性肝纤维化模型中肝羟脯氨酸与Ⅲ型胶原的影响,观察了其抗肝纤维化的作用,现报告如下。1 材料1.1 动物 Wistar雌性大鼠25只,体重100～130g;本校实验动物中心提供。

荧光光谱法研究氢化可的松与牛血清白蛋白的结合作用

模拟人体pH值,在不同温度下采用荧光光谱和同步荧光光谱研究了氢化可的松与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用及对其同步荧光的影响。结果表明,在pH值7.37的Tris-HCl缓冲溶液中,氢化可的松和BSA彼此扩散和碰撞达到动态平衡导致BSA荧光猝灭,属于动态猝灭机制。计算得到BSA与氢化可的松在25℃和37℃下动态猝灭的猝灭常数分别为1.98105×107 L.mol-1.s-1和2.05933×107 L.mol-1.s-1。根据热力学方程得出氢化可的松与BSA相互作用的参数,ΔH<0、ΔS>0,说明氢化可的松与BSA相互作用以静电引力为主。氢化可的松加入后,BSA同步荧光光谱(Δλ=60nm)的最大发射波长发生红移,表明色氨酸残基所处环境的极性增加。

羧甲基化壳聚糖季铵盐与牛血清白蛋白的相互作用研究

应用荧光光谱研究了羧甲基化壳聚糖季铵盐（CMCQA）与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。研究表明：CMCQA对BSA内源性荧光猝灭机制属于CMCQA和BSA形成复合物所引起的静态猝灭。在室温下，二者的结合常数为2．45×10^4L／mol，结合位点数为1．04。二者主要靠静电引力相互作用。

膨化珍珠岩对牛血清白蛋白的吸附研究

采用膨化珍珠岩为吸附剂,对牛血清白蛋白的吸附特性进行了研究。在25℃下,当缓冲溶液PH值为5时,吸附能力最强;对吸附等温线进行测定研究,发现其吸附行为基本符合Langmuir模型。研究表明,膨化珍珠岩有可能成为一种理想的固定化酶载体材料。

牛血清白蛋白修饰的有机-硅胶杂化整体柱的制备及电色谱研究

以四甲氧基硅烷(Tetramethoxysilane,TMOS)和γ-缩水甘油醚氧基丙基三甲氧基硅烷(γ-Glycidyloxypropyltrimethoxysilane,GPTMS)为反应单体,采用"一步法"制备了有机-硅胶杂化整体柱,通过优化TMOS/GPTMS的含量制备了渗透性和机械强度良好的杂化整体柱,扫描电镜结果显示,毛细管柱内形成了连续的整体结构。采用席夫式碱法将牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)共价键合于柱内,并对制备条件进行了优化,确定8 g/L BSA为最佳反应条件。在毛细管电色谱分离模式下,考察了缓冲液pH值、运行电压、柱温和进样条件对分离的影响,最终选择25 mmol/L Tris缓冲液(pH 7.4)、运行电压10 kV、柱温15℃和进样条件2 kV×3 s为最佳分离条件。此手性柱对色氨酸对映体实现了基线分离,日内、日间及柱间精密度良好。与BSA修饰的硅胶整体柱相比,本研究制备的固载BSA的杂化整体柱具有更优的手性识别能力,并且简化了制备流程,缩短了制备周期。

Au@4-硝基苯硫酚@Ag@牛血清白蛋白内标化表面增强拉曼散射探针的制备及其在细胞拉曼成像中的应用

制备了Au@4-硝基苯硫酚@Ag内标化表面增强拉曼散射(SERS)探针,进一步以牛血清白蛋白(BSA)置换探针表面的稳定剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),发展了Au@NT@Ag@BSA内标化SERS探针。Au@NT@Ag@BSA探针保留了原探针的单分散性和高灵敏度,同时显著提高了信号稳定性和生物相容性。进一步将Au@NT@Ag@BSA探针和SMMC7721肺癌细胞共孵育,实现了细胞的探针标记和拉曼光谱成像。Au@NT@Ag@BSA内标化SERS探针在活体生物成像等方面展示了良好的应用潜力。

盐酸小檗碱对牛血清白蛋白淀粉样纤维化聚集的影响作用及机制研究

以牛血清白蛋白为模型,探究了盐酸小檗碱(BH)对牛血清白蛋白(BSA)淀粉样纤维化的影响及作用机制.研究结果表明:盐酸小檗碱通过与BSA内部氨基酸残基发生非共价结合,稳定蛋白质的α-螺旋结构,从而抑制蛋白质的错误折叠,降低其纤维化聚集的程度,作用效果与药物浓度呈现正相关.

全甲基及其多胺修饰环糊精与牛血清白蛋白的相互作用

制备了两个多胺修饰全甲基化环糊精,即单-[6-(乙二胺)-6-脱氧]-七-(2,3,6-三甲氧基)-β-环糊精(4)和单-[6-(二乙烯三胺)-6-脱氧]-七-(2,3,6-三甲氧基)-β-环糊精(5),并采用荧光和紫外-可见光谱方法测定了全甲基化环糊精及其多胺修饰衍生物在磷酸缓冲溶液中(25℃,pH=7.2)与牛血清白蛋白形成化学计量比为8∶1的超分子配合物的稳定常数.结果表明,全甲基化环糊精对牛血清白蛋白具有强于天然环糊精和部分甲基化环糊精的分子键合能力,而经过多胺修饰的全甲基化环糊精衍生物则显示了更强的键合能力,这些强的键合能力源于疏水作用、静电作用和氢键作用的协同效应.

生理盐水中牛血清白蛋白与碳酸钙的相互作用研究

In this paper, Fourier transform infrared spectroscopy and inductively coupled plasma atomic emission spectrometry were used to study the filtrates produced by reactions of different initial mole ratios of bovine serum albumin (BSA) and calcium carbonate (CaCO3) in saline solution. The results demonstrated that there were strong interactions between BSA and calcium carbonate by hydrogen bonds or coordination or electrostatic attraction, which made the solubility of calcium carbonate in aqueous solution increased and the microstructure of BSA and CaCO3 changed. The interaction helped to form biomineral containing protein and CaCO3 in organism.