携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡的制备

目的制备携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡并测定其与hVEGF165表达载体的结合率。方法制备携hVEGF165表达载体阳离子脂质微泡,测定其粒径大小、浓度、Zeta电位;测定与hVEGF165表达载体的结合率。结果阳离子脂质微泡90%粒径范围:1μm-3μm,平均粒径:(1.31±0.23)μm,平均浓度:(3.17±0.16)×108/mL,Zeta电位:(28.00±1.84)mV,与hVEGF165表达载体的最大结合率:(35.34±0.71)%。结论采用机械振荡法制备的阳离子脂质微泡,粒径分布良好,浓度、Zeta电位稳定,与hVEGF165表达载体结合率较高,是携带基因表达的良好载体系统。

体外实验观察微泡-阳离子纳米脂质体复合物促进HGF基因转染

目的通过生物素-亲和素的特异结合,制备一种高效载肝细胞生长因子(HGF)基因的脂质微泡(LMB)-阳离子纳米脂质体复合物(LMB-CNLP),观察转染情况,探讨其对对数生长期的肝星状细胞株HSC-T6活性的影响。方法将HSC-T6细胞分为载HGF基因的LMB组、LMB-CNLP组和对照组(单纯质粒),超声辐照各组进行HGF转染。以荧光显微镜及流式细胞仪观测转染情况,ELISA试剂盒检测HGF蛋白表达情况,流式细胞仪检测HSC-T6细胞凋亡。结果 LMB-CNLP组HGF基因的转染率为41.29%,明显高于其他2组。转染后的细胞能持续表达HGF,且随着HGF蛋白增多,HSC-T6细胞凋亡率增高。结论超声辐照LMB-CNLP复合物能提高HGF基因在体外培养的HSC-T6细胞中的转染情况,促进HSC-T6凋亡,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。