临床多重耐药革兰阴性细菌耐药现状及碳青霉烯类耐药菌株快速检测方法

目的分析临床多重耐药革兰阴性细菌的耐药现状,探究胶体金免疫层析法对碳青霉烯类耐药细菌快速检测和分型的临床应用价值。方法收集临床分离的100株多重耐药革兰阴性细菌,采用药敏纸片扩散法检测8种临床抗菌药物(多黏菌素B、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、美罗培南、头孢噻肟/他唑巴坦、替加环素、磷霉素)对多重耐药革兰阴性细菌的抗菌效果;采用荧光定量PCR和胶体金免疫层析法分别检测待测菌株5种主要碳青霉烯酶型(KPC、OXA-48、VIM、IMP和NDM)。结果药敏试验结果显示试验菌株对常用抗生素的耐药率从高到低依次为左氧氟沙星(70%)、头孢噻肟/他唑巴坦(65%)、头孢哌酮/舒巴坦(43%)、美罗培南(42%)、阿米卡星(36%)、磷霉素(11%)、多黏菌素B(7%)、替加环素(0%)。药敏试验结果中碳青霉烯类耐药细菌42株,荧光定量PCR鉴定出33株,其中KPC型19株、IMP型10株、NDM型4株;胶体金免疫层析法检测出33株不同酶型,其中KPC型19株、IMP型10株、NDM型4株,与荧光定量PCR结果一致,其敏感性和特异性均为100.0%。结论减少多重耐药细菌对耐药率较高抗菌药物的使用,合理选用敏感性高的抗菌药物,可以延缓多重耐药细菌的产生,为临床治疗和控制院内感染提供新思路。胶体金免疫层析法操作简单,能够快速进行KPC、OXA-48、VIM、IMP和NDM 5种主要碳青霉烯类耐药革兰阴性细菌的定性检测,可以帮助临床早期优化抗菌药物治疗。

Photofrin联合碘化钾抗革兰阴性细菌光动力效果的研究

目的:探索碘化钾(KI)对Photofrin(PF)介导的抗菌光动力疗法(aPDT)抗革兰阴性细菌效果的影响。方法:以铜绿假单胞菌(P.a)、肺炎克雷伯菌(K.p)、奇异变形杆菌(P.m)和鲍曼不动杆菌(A.b)为实验对象,用不同浓度PF及KI进行光动力处理,观察并计算CFU及各组细菌存活率。用Amplex Red检测H2O2以探索KI提高PF介导的aPDT效果的机制。结果:当光能量密度为10 J/cm^(2)时,不同浓度的PF对这4种革兰阴性细菌均无杀伤效果。当光能量密度为10 J/cm^(2)时,50 mmol/L KI联合10μmol/L PF可对A.b实现高效杀菌(P<0.001);100 mmol/L KI联合10μmol/L PF可对P.a、K.p和P.m实现高效杀菌(P<0.001)。当光能量密度相同时,10μmol/L PF联合100 mmol/L KI组的荧光量明显高于对照组(P<0.05)。结论:PF联合KI对革兰阴性细菌的抗菌作用显著增强,其增强作用可能是由于^(1)O_(2)与KI反应生成H_(2)O_(2)。

草莓微生物污染分析及革兰氏阴性细菌和霉菌鉴定

为评估草莓的微生物污染情况,在2016年3—4月份对浙江地区基地温棚和市售草莓进行随机抽样,分析草莓中菌落总数、大肠菌群、霉菌,并运用全自动微生物分析系统(VITEK)和分子生物学技术,分别对分离的革兰氏阴性细菌和霉菌进行了鉴定。结果表明:温棚草莓菌落总数为120~48 600 cfu·g^(-1),大肠菌群为3~1 100 MPN·g^(-1),霉菌为0~2 900 cfu·g^(-1);市场草莓菌落总数为1 900~36 900 cfu·g^(-1),大肠菌群为15~1 100 MPN·g^(-1),霉菌为200~6 100 cfu·g^(-1);同时鉴定出大肠埃希菌(Escherichia coli)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、河生肠杆菌(Enterobacter.amnigenus)、植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)等19株革兰氏阴性细菌和毛霉属(Mucor)、镰刀菌属(Fusarium)等5株霉菌,所检出的革兰氏阴性细菌和霉菌多数具有较强的致病性。研究结果为草莓微生物数量的控制和开发杀菌抑菌技术提供了参考。

临床常见革兰阴性细菌的分布及耐药性分析

目的了解院内革兰阴性细菌的分布及耐药性特点。方法收集本院2004年7月～2006年7月各类临床标本分离出的革兰阴性细菌，采用K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验，分析其临床分布及耐药性。结果共分离出1271株革兰阴性细菌，以大肠埃希菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌为主要病原菌，标本主要分布于痰、咽拭子和尿液中，病区主要集中于ICU室、神经外科和肺科。超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌、克雷伯菌属和变形杆菌属的检出率分别为38．4％、31．7％和25．5％。亚胺培南和美罗培南对肠杆菌科细菌、产ESBLs菌株和不动杆菌属的抗菌活性最强，耐药率为0-5．6％，铜绿假单胞菌对两药的耐药率为29．8％和27．2％；嗜麦芽窄食单胞菌对两药物高度耐受，耐药率均为95．7％，但对环丙沙星、头孢哌酮／舒巴坦和替卡西林／克拉维酸较敏感。结论大肠埃希菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌为本院最常见革兰阴性细菌，亚胺培南和美罗培南对除嗜麦芽窄食单胞菌外的其他革兰阴性细菌具有较好的抗菌活性，其他抗菌药物的抗菌活性相对较低。

重症监护病房中产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性细菌致院内感染的临床调查

目的 分析重症监护病房 (ICU)中产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)细菌所致院内感染的临床特点及细菌耐药的情况。方法 收集 2 0 0 2年 5月～ 2 0 0 3年 2月ICU临床分离的革兰阴性杆菌共计 3 80株 ,用酶抑制剂增强纸片扩散试验确证产ESBLs细菌 ,琼脂扩散法测定其对 14种抗菌药物的敏感性。结果 在 3 80株革兰阴性杆菌中分离出产ESBLs革兰阴性杆菌 69株 (18 2 % ) ,依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌和阴沟肠杆菌。感染部位主要分布于下呼吸道和外科手术部位。药敏结果显示上述产ESBLs革兰阴性杆菌均对亚胺培南高度敏感。结论 产ESBLs革兰阴性杆菌已成为ICU中院内感染的主要致病菌之一 ,亚胺培南对其仍具有显著的抗菌活性 。

Toll样受体4介导的革兰阴性细菌免疫应答研究进展

Toll样受体4(TLR4)是机体重要的天然免疫受体分子之一。革兰阴性细菌内毒素通过激活TLR4,启动信号传导,介导天然免疫和炎性反应。TLR4表达缺陷或反应低下可导致机体对革兰阴性细菌易感,过度的炎性反应则可引起全身炎性反应综合征甚至内毒素性休克的发生,通过对TLR4的深入研究,可为临床感染性疾病的治疗提供新的思路。

我院2002年～2005年抗菌药物的使用与革兰阴性细菌耐药性分析

目的探讨我院抗菌药物使用量与耐药性之间的关系。方法统计2002年～2005年抗菌药物的用药频度,并对用药频度和革兰阴性细菌耐药性进行分析。结果4年来5类常用抗菌药物的总DDDs增长了13.6%,其中头孢菌素类与氟喹诺酮类分别处于前两位。4年间分离的主要致病菌以革兰阴性菌为主。哌拉西林/三唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢呋辛、头孢吡肟用药频度分别增长22%、18%、197%、283%,病原菌对其耐药率也明显增高。其余抗菌药物的限定日剂量(defined daily dose,DDD)值变化不一,但耐药性普遍升高。结论2002年～2005年本院分离的常见革兰阴性菌对各种常用药物的耐药性逐年增加,常用抗菌药物的耐药率的增长与其年用量增加呈相关性。

青霉素结合蛋白与革兰阴性细菌耐药性的研究进展

青霉素结合蛋白(PBPs)的改变与β-内酰胺类抗生素的亲和力降低是革兰阳性球菌获得抗生素耐药性的重要机制之一,而在革兰阴性细菌中因PBPs的改变导致耐药的出现却十分少见,这一观点忽视了革兰阴性细菌中PBPs在β-内酰胺类抗生素耐药机制中的作用。文章对PBPs的结构、功能、检测方法及与革兰阴性细菌耐药性的关系等方面的研究进展作一综述。

重庆地区儿童2000年至2004年首位革兰阴性细菌和阳性细菌的耐药性监测

目的了解重庆地区儿童感染的分离至临床标本的首位革兰阴性细菌和阳性细菌对常用抗生素的耐药趋势,指导临床合理使用抗生素。方法常规方法分离、培养细菌,应用美国德灵公司W alkAway-40细菌鉴定仪对2000年至2004年我院细菌室分离至临床标本的首位革兰阴性细菌和阳性细菌共2854株进行细菌鉴定及药敏试验。结果2000年至2004年检出的首位革兰阴性细菌和阳性细菌分别为大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌。2000年至2004年前5位革兰阴性菌5777株,革兰阳性菌1565株,其中大肠埃希菌2090株,金黄色葡萄球菌764株,分别占36.2%和48.8%;5年间大肠埃希菌对氨苄西林、头孢吡肟、头孢西丁、庆大霉素、亚胺培南、环丙沙星、头孢噻肟、头孢他啶的总耐药率分别为80.9%、37.5%、15.4%、54.0%、0.8%、34.0%、46.6%、46.2%;金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、复方新诺明、万古霉素、阿莫西林/克拉维酸的总耐药率分别为95.6%、63.4%、5.8%、0%、11.0%。结论通过细菌耐药监测发现:大肠埃希菌对常用抗生素的总耐药率变化不大,金黄色葡萄球菌对常用抗生素的总耐药率有下降趋势,应引起临床医生重视。

β-内酸胺抗生素对革兰阴性细菌β-内酸胺酶的诱导及意义

β-内酰胺抗生素对革兰阴性菌的杀菌作用,必须是它能通过外膜,进入周质,抵抗住周质中的β-内酰胺酶的水解或生物失活,使有足够量的游离药物作用于细胞内膜上的靶位PBPs,从而干扰细菌胞壁合成,影响细菌繁殖。其中周质中的β-内酰胺酶是使β-内酰胺抗生素灭活,细菌产生耐药的重要原因。为此国际上许多学者对β-内酰胺酶与β-内酰胺抗生素相互作用进行了深入广泛的研究,并研制出一批对β-内酰胺酶稳定的新一代β-内酰胺抗生素。但是随着新抗生素的大量应用,由β-内酰胺酶介导的耐药菌株仍不断出现,而且当某些药物联用于某些菌株时,由于β-内酰胺酶诱导产生,不仅未出现协同或相加,反而出现相互拮抗。因此,为了防止这种由β-内酰胺酶介导的耐药和药物相互作用,有必要对β-内酰胺酶的产生过程及其影响因素进行探讨,这对临床合理用药和新药的开发具有重要意义。

革兰阴性细菌编码系统(GN-27)对肠杆菌科细菌的鉴定评价

目的:用常规细菌鉴定方法和API20系统两种方法对我们自行设计的革兰阴性细菌鉴定编码系统(GN-27)进行评价。方法:用3种方法对16株质控菌株(14株全国质控菌株,2株省质控菌株),42株临床菌株进行重新鉴定,分析鉴定结果。结果:GN-27细菌鉴定板与常规鉴定方法符合率为100%,API20E系统与常规鉴定方法、GN-27系统完全符合者55株,符合率为94.83%,3种方法在统计学上无显著性差异(P>0.05)。结论:GN-27系统在肠杆菌科细菌鉴定方面使用较为满意,可作为一种适用于各级医院临床常规细菌鉴定的较为可靠的方法。

抗革兰氏阴性细菌感染药物的研究现状与进展

近年来抗革兰氏阴性细菌的新药研究受到十分关注,一批具有良好抗革兰氏阴性菌作用的广谱抗菌药临床应用;还有若干颇具开发前景的化合物正在研究中。本文简要综述了(1)β-内酰胺类抗生素;(2)其他类抗生素;(3)喹诺酮类抗菌药;(4)具有新结构类型与新作用机制(或新作用靶位)的新抗生素探索;(5)增强与保护抗菌药性能的物质研究等方面进展。

常见院内分离革兰阴性细菌分布及耐药性监测

目的 了解医院感染常见革兰阴性细菌分布变迁和耐药情况。方法 2 0 0 1年 7月至 2 0 0 3年 2月该院临床分离菌用Kirby -Bauer法进行药物敏感试验 ,并按美国临床实验标准委员会 2 0 0 0年判断标准进行判断。结果 共分离出革兰阴性菌为 6 0 8株 ,前 3位细菌依次是 :大肠埃希菌占 35 9%、铜绿假单胞菌占 2 0 2 %、肺炎克雷伯菌占 15 8%。耐药性分析显示 :革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的耐药率最低为亚胺培南 (0～ 4 2 6 % ) ,最高为奈啶酸 (4 3 5 %～ 10 0 % ) ,大部分细菌呈多重耐药。临床分离菌中产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)菌株的检出率分别为 :大肠埃希菌为 2 9 8%、肺炎克雷伯菌为 39 6 %、铜绿假单胞菌为 5 7%、阴沟肠杆菌为 4 0 0 %、鲍曼不动杆菌为9 1%、奇异变形杆菌为 14 7%、嗜麦芽窄食单胞菌为 17 4 %。产ESBLs菌株对 2 3种临床常用抗菌药物的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株。结论 细菌耐药性仍是目前临床最为严重的问题 ,需要各有关部门共同商讨有效对策。

聚合酶链反应检测革兰阴性细菌16SrRNA

【目的】寻找诊断细菌感染病原更为敏感和有效的方法。【方法】根据细菌１６ＳｒＲＮＡ基因的高度保守性，设计合成革兰阴性细菌的共同引物，采用聚合酶链反应检测已知的革兰阴性细菌９株，革兰阳性菌４株。【结果】革兰阴性菌检测阳性率为１００％，（检测革兰阳性细菌４株结果均为阴性）。采用倍比稀释法检出大肠杆菌的最低浓度为４ＣＦＵ／ｍｌ。【结论】所用引物具有良好的特异性和敏感性，能达到初步鉴定细菌种属的目的。

革兰氏阴性细菌、HLA－B27与脊椎关节炎

强直性脊椎炎、反应性关节炎和Ｒｅｉｔｅｒ’ｓ综合征等是一类血清阴性的脊椎关节炎，与主要组织相容性抗原高度相关。关于这类疾病的发病机制至今仍不清楚。其中“分子模拟”是解释这类疾病发病机制的一种学说。此学说认为，ＨＬＡ－Ｂ２７和某些革兰氏阴性细菌的某些成分具有结构的相似性，在受感染的机体内，细菌和机体组织的ＨＬＡ－Ｂ２７抗原发生了分子模拟反应，从而造成了疾病的发生。本文拟就有关内容作一综述，但尚未获得分子模拟是引起这类疾病的令人信服的证据。

革兰氏阴性细菌细胞分泌工程的研究与应用

革兰氏阴性细菌细胞分泌工程的研究与应用郑穗平周婉冰（华南理工大学生物工程系，广州，５１０６４１）利用微生物表达合成和生成外源蛋白的基因工程技术日益展现出广泛的应用前景。近来对革兰氏阴性细菌（以下简称Ｇ－菌）的分泌途径有大量的报道，已构建相当多Ｇ－菌尤...

早产儿革兰阴性细菌败血症肝功能的变化

目的 研讨早产儿革兰阴性菌败血症肝功能变化。方法 将 2 0 0 0年 3月～ 2 0 0 4年 5月在厄立特里亚首都儿童医院新生儿病房收治的早产儿革兰阴性杆菌败血症 2 7例和早产儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症 1 5例肝功能进行比较。结果 早产儿革兰阴性杆菌败血症肝功能异常 1 3例 (48.2 % ) ,早产儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症的肝功能异常 2例 (1 3 .3 % ) ,两者碱性磷酸酶无区别 ;革兰阴性菌中肺炎克雷伯杆菌败血症有肝功能异常 6例 (66 .7% ) ,铜绿假单胞菌败血症无肝功能异常。结论 早产儿革兰阴性细菌性败血症尤其是革兰阴性菌败血症可有肝功能异常。

肝病患者革兰阴性细菌感染的临床分析

从肝病患者的体液及血液中分离、鉴定革兰阴性细菌菌株 ,同时测定革兰阴性细菌产超广谱 β 内酰胺酶率及对抗生素的耐药情况 ,以了解细菌感染的分布 ,为临床合理用药提供依据。结果 :肝病患者革兰阴性病原菌以大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和气单胞菌属占多数。产酶株主要分布在肺炎克雷伯菌和大肠杆菌 ,其敏感性低于非产酶株。提示

抗内毒素核心糖脂抗体防治革兰阴性细菌感染的研究现状

革兰阴性细菌（Ｇｒａｍｎｅｇａｔｉｖｅｂａｃｔｅｒｉａ，ＧＮＢ）感染仍然是当前临床医学中的一个令人棘手的难题，严重者并发症多，死亡率高。ＧＮＢ最主要的致病成分是位于细菌细胞壁上的内毒素。而临床上针对真正起主要致病作用的内毒素的治疗措施仍较少，效果也不...