应用阴离子交换树脂法进行食品中砷形态的研究

目的建立溶剂提取一阴离子交换树脂分离一氢化物发生原子荧光光谱法测定食品中无机砷、一甲基胂（MMA）和二甲基胂（DMA）的方法。方法以水一甲醇为提取剂，阴离子交换树脂分离，HG—AFS检测。结果方法检出限以砷计分别为：无机砷（As（Ⅲ）＋As（V））0.34μg/L、MMA0．57μg／L、DMA0．46μg／L；20μg/L砷标准偏差为：无机砷2，45％、MMA3．34％、DMA4．96％。在0～50μg/L砷量范围校正曲线线性关系良好。试样加标回收率为：无机砷95．40％～97．00％，MMA97．80％～104，80％，DMA104．23％～107．50％。结论对海带、紫菜等海产品及大米等食品的检测，证明该方法简便易行。

以强阴离子交换剂FG TMAE为介质的离子交换层析制备人凝血因子Ⅷ的初探

目的初步探索以强阴离子交换剂FGTMAE为介质进行离子交换层析来制备人凝血因子Ⅷ。方法以含不同氯化钠浓度的洗脱液进行线性梯度来初步确定离子交换层析的条件，并优化离子交换层析的洗涤液和洗脱液的离子强度和pH值以及样品的温度，最终确定以强阴离子交换剂FGTMAE为介质进行离子交换层析的最适条件。结果在室温（20～25℃）条件下，以pH7．0的含220mmol／L氯化钠的洗涤液和pH7．0的含450mmol／L氯化钠的洗脱液进行离子交换层析，可使人凝血因子Ⅷ的回收率（77．53％）和比活性（24．67IU／mg）均较高。结论以强阴离子交换剂FG TMAE为介质进行离子交换层析制备人凝血因子Ⅷ是可行的。

Sabin株脊髓灰质炎病毒纯化的离子交换层析条件研究

目的研究Sabin株脊髓灰质炎病毒(Sabin strain polio virus,sPV)纯化的离子交换层析(ion exchange chromatography,IEC)条件。方法在不同层析条件下对sPV凝胶层析粗纯液进行IEC,设定的层析参数分别为介质Q Sepharose FF或Eshmuno Q、上样量30%或40%柱体积、流速(150±5)或(240±8)cm/h。分别检测各型sPV纯化液的D抗原含量、蛋白浓度、病毒滴度、宿主细胞蛋白残留量和Vero细胞DNA残留量,计算D抗原回收率和比活。结果Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原回收率均明显高于Q Sepharose FF IEC。在上样量40%柱体积、流速(150±5)cm/h条件下,Eshmuno Q IEC纯化的各型sPV纯化液的D抗原比活均高于Q Sepharose FF IEC,差异均有统计学意义(Ⅰ型:t=4.23,Ⅱ型:t=5.73,Ⅲ型:t=4.18,P值均<0.05),而且前者的宿主细胞蛋白残留量(Ⅰ型:t=8.29,Ⅱ型:t=7.89,Ⅲ型:t=8.18,P值均<0.05)和Vero细胞DNA残留量(Ⅰ型:t=4.23,Ⅱ型:t=4.56,Ⅲ型:t=4.78,P值均<0.05)均低于后者,差异均有统计学意义。结论用IEC纯化sPV时,以Eshmuno Q代替Q Sepharose FF可增加上样量和流速,从而缩短IEC时间,提高纯化效率。

紫外线蓝光照射和树脂吸附清除血浆胆红素

目的探讨紫外线蓝光混合光照射血浆联合树脂吸附对血浆蛋白及胆红素的影响，初步建立紫外线蓝光和（或）树脂吸附净化血浆方法。方法将人工肝分离出的原血浆先用紫外线蓝光照射，再用D201型大孔强碱性阴离子交换树脂或D4006型非极性大孔吸附树脂吸附，根据采用的方法不同分为吸附组、照射组和照射吸附组，并与原血浆进行对照。观察在不同处理阶段（照射组、照射吸附组）及单纯吸附组蛋白和胆红素浓度变化。结果①照射组总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）和间接胆红素（IBil）浓度明显低于原血浆组（P〈0．01），血浆蛋白照射前后差异无统计学意义（P〉0．05）。②用D201树脂吸附时，照射吸附组胆红素（TBil、DBil和IBil）清除率分别为85．3％、85．8％和85．1％，吸附组分别为58．3％、50．8％和61．7％，两组的胆红素清除率和浓度差异有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；两组总蛋白、白蛋白差异无统计学意义（P〉0．05）。③用D4006树脂吸附时，照射吸附组胆红素（TBil、DBil和IBil）清除率分别为71．0％、74．5％和68．6％，吸附组分别为19．8％、17．6％和21．2％，两组胆红素清除率和浓度差异均有统计学意义（P〈0．01）；两组总蛋白、白蛋白差异无统计学意义（P〉0．05）。④在照射吸附组中，用D4006树脂时IBil清除率（68．6％）低于用D201树脂时IBil清除率（85．1％）（P〈0．05），使用D4006树脂组血浆自蛋白高于使用D201树脂组（P〈0．05）。结论紫外线蓝光照射血浆可直接降低胆红素浓度，明显提高阴离子交换树脂和吸附树脂胆红素清除率，对血浆蛋白回收影响较小，因此紫外线蓝光混合照射联合树脂吸附有望用于人工肝治疗。

静注人免疫球蛋白层析纯化条件的优化

目的利用响应面法对阴离子交换介质在静注人免疫球蛋白层析纯化中的应用条件进行优化,确立最佳层析参数。方法采用双因素三水平响应面法设计层析参数pH值和电导率,用双缩脲法和高效液相色谱法分别测定蛋白浓度和分子大小分布,以蛋白回收率、单体+二聚体含量评价纯化效果,获得最优层析参数并进行验证。结果优化的层析纯化平衡和上样条件为pH5.4,电导率1.05 mS/cm。在该条件下以血浆组分Ⅱ为原料,层析后蛋白回收率为(96.6±3.1)%,IgG单体和二聚体比例为(99.98±0.02)%,IgA含量为(2.6±1.1) mg/L,IgM含量为(4.5±1.4) mg/L。结论经响应面法优化后的阴离子交换层析,可用于纯化血浆组分Ⅱ制备静注人免疫球蛋白制品。