人肾尿酸转运蛋白1基因克隆、抗体制备及其在肾小管上皮细胞中的定位

目的制备人尿酸转运蛋白1(hURAT1)多克隆抗体并利用该抗体检测hURAT1在肾组织中的表达及亚细胞定位。方法用RT PCR方法从人肾组织中扩增出hURAT1基因全长及其抗原表位区,分别构建绿色荧光蛋白hURAT1pEGFP融合表达载体和GST融合表达载体pGEX5X1。诱导表达并纯化GST融合蛋白,利用改良的蛋白免疫法制备多克隆抗体;Westernblot及免疫组化方法观察人肾组织的hUART1基因产物的表达。将hURAT1pEGFP重组质粒转染细胞,激光共聚焦显微镜动态观察hU RAT1pEGFP在肾小管上皮细胞LLC PK1细胞膜的定位及表达。结果成功获得高效特异的hURAT1抗体,利用该抗体证实hU RAT1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘,Westernblot证实hURAT1蛋白在肾组织中表达。激光共聚焦显微镜动态观察显示hURAT1pEGFP定位于LLC PK1细胞膜。结论制备的hURAT1抗体及其全长基因可用于hURAT1基因的生理功能及病理研究,hURAT1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘。

治疗痛风新药——尿酸盐阴离子转运蛋白-1抑制剂来西雷特

来西雷特为一口服尿酸盐阴离子转运蛋白-1抑制剂,尿酸盐阴离子转运蛋白-1与尿酸在肾脏中的吸收密切相关,来西雷特通过抑制其作用,发挥降低血清尿酸的作用。来西雷特于2015年12月在美国获批,与黄嘌呤氧化酶抑制剂联合应用治疗单独应用黄嘌呤氧化酶抑制剂而没有使血清尿酸水平达标的痛风。来西雷特最常见的不良反应包括头痛、流感及胃食管返流等。

hURAT1基因启动子-45位C→G突变与高尿酸血症的相关性研究

目的探讨人尿酸盐阴离子交换器（hURAT1）基因启动子-45位C→G突变与原发性高尿酸血症的相关性。方法对217例原发性高尿酸血症患者（uA组）及491例健康对照者（CON组）应用PCR技术扩增目的片段，PCR产物以限制性内切酶MvaⅠ进行酶切后行20％聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。结果（1）UA组病人G等位基因和CG基因型频率显著高于CON组（P分别为0，031，0．031）。（2）所有入组者具有CG基因型者（突变型）血尿酸（UA）及甘油三酯（TG）明显高于CC基因型（野生型）（t=3．058，3．699，P〈0．01），总胆固醇（TC）、空腹血糖（FPG）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）2组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论hURAT1基因启动子-45位C→G突变可能与原发性高尿酸血症有关。