LOX基因降表达对人阴道壁成纤维细胞中ELN及MMP-2基因表达的影响

目的研究赖氨酰氧化酶(LOX)基因对人阴道壁成纤维细胞中弹性蛋白(ELN)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因mRNA表达的影响。方法将原代培养的人阴道壁成纤维细胞分成3个组(LOX基因降表达组、阴性对照组、空白对照组),分别用LOX-sh RNA重组慢病毒、阴性对照慢病毒转染前2个组细胞,计算转染效率。流式细胞仪分选慢病毒感染后带绿色荧光的人阴道壁成纤维细胞,传代后收集部分细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测3个组成纤维细胞中LOX、ELN、MMP-2的mRNA表达水平。结果 LOX-sh RNA慢病毒转染人阴道壁成纤维细胞共8例(绝经前4例,绝经后4例)。LOX基因降表达组成纤维细胞胞体变小,生长变慢,贴壁性降低,LOX mRNA的表达水平较阴性对照组和空白对照组显著下降(P<0.05)。LOX基因降表达组ELN mRNA表达较对照组明显降低,而MMP-2 mRNA表达较对照组明显升高。阴性对照组和空白对照组的LOX mRNA、ELN mRNA、MMP-2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LOX基因降表达后人阴道壁成纤维细胞ELN mRNA表达显著降低,MMP-2 mRNA表达显著增高,提示LOX通过调节ELN和MMP-2的表达参与盆腔脏器脱垂(POP)的发生。

雌激素对盆底功能障碍患者阴道壁成纤维细胞力学反应的影响研究

目的:探究雌激素对盆底功能障碍患者阴道壁成纤维细胞力学反应的影响。方法:选取近年来在山西省吕梁市人民医院进行手术治疗的10例盆底功能障碍患者作为研究对象。术后取其阴道壁组织块培养成纤维细胞,并将培养出的成纤维细胞分为静态组和应力组。对静态组成纤维细胞不做处理,对应力组成纤维细胞进行应力刺激后,将其分为空白对照组(空白组)、无水乙醇溶媒空白组(溶媒组)和雌激素干预组(雌激素组),在溶媒组成纤维细胞中加入无水乙醇,在雌激素组成纤维细胞中加入无水乙醇+17β-雌二醇,对空白组成纤维细胞不做处理,然后比较各组成纤维细胞中Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)mRNA、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA的表达水平。结果:与静态组成纤维细胞相比,应力组成纤维细胞中ColⅠmRNA、MMP-1mRNA的表达水平均更高,ColⅢmRNA、TIMP-1mRNA的表达水平均更低,P<0.05。与空白组及溶媒组成纤维细胞相比,雌激素组成纤维细胞中ColⅠmRNA、ColⅢmRNA、TIMP-1mRNA的表达水平均更高,MMP-1mRNA的表达水平更低,P<0.05。结论:盆底功能障碍患者的阴道壁成纤维细胞在应力刺激下可出现胶原代谢改变,用雌激素进行干预能在一定程度上改善阴道壁成纤维细胞胶原代谢的状态。