目的建立阵列式标签标记的高通量测序方法并结合多克隆预筛选实现对点突变单克隆细胞株的高效鉴定。方法通过CRISPR/Cas9介导的同源重组修复(HDR)在K562细胞的rs826415位点引入G到T点突变。侯选细胞按每孔10~20个的密度接种培养多克隆,...目的建立阵列式标签标记的高通量测序方法并结合多克隆预筛选实现对点突变单克隆细胞株的高效鉴定。方法通过CRISPR/Cas9介导的同源重组修复(HDR)在K562细胞的rs826415位点引入G到T点突变。侯选细胞按每孔10~20个的密度接种培养多克隆,以带有标签(barcode)的引物区分各多克隆细胞,PCR扩增含rs826415位点的区段,产物合并进行二代测序。生物信息学分析各多克隆细胞的同源重组率及插入/缺失率。将阳性率最高孔内的细胞进一步单克隆培养并鉴定基因型。结果通过CRISPR/Cas9同源重组法和有限稀释获得96个rs826415位点打靶的多克隆细胞。经阵列式标签高通量测序法分析各孔细胞同源重组且不伴随插入/缺失(HDR without indel)的比率,96个多克隆的平均阳性率为0.21%,最高达4.35%,将该多克隆细胞进一步单克隆培养,从30个单克隆中成功获得rs826415位点由G/G突变为T/G的杂合型细胞株。结论通过阵列式标签高通量测序策略结合多克隆细胞预筛选,实现了定点突变单克隆细胞株的高效鉴定,相比常规方法显著降低了工作量和成本。展开更多
针对基于天线阵列测角的射频识别(Radio Frequency Identification,RFID)定位系统成本高、无法估计目标姿态的问题,提出了一种基于标签阵列的姿态检索的定位算法。首先,分析了天线方向角、标签阵列姿态角和标签阵列信号到达角之间的关系...针对基于天线阵列测角的射频识别(Radio Frequency Identification,RFID)定位系统成本高、无法估计目标姿态的问题,提出了一种基于标签阵列的姿态检索的定位算法。首先,分析了天线方向角、标签阵列姿态角和标签阵列信号到达角之间的关系,建立了标签阵列姿态检索的定位模型;其次,对标签阵列中相位误差来源进行了分析,利用标签间的相位差对标签阵列信号进行重构,降低了读写器收发电路、标签电路及多径效应引入的相位误差对定位精度的影响;同时,分析了标签阵列中的互耦效应对相位的影响,提出了互耦效应相位校正方法,提升了标签阵列的测角精度;最后,提出了一种标签阵列姿态估计算法,使用多个天线的方向角实现对标签阵列姿态角估计和定位。实验结果表明,系统在室内环境下平均定位误差为0.2 m,标签阵列的姿态角估计平均误差为4.35°。展开更多
针对金属表面裂纹的多特征监测问题,提出了一种基于射频识别(Radio Frequency Identification, RFID)技术的裂纹多特征监测方法。首先,设计了一种RFID标签阵列,通过裂纹影响标签反射信号的相位特征来感知裂纹特征。然后,设计了一种基于...针对金属表面裂纹的多特征监测问题,提出了一种基于射频识别(Radio Frequency Identification, RFID)技术的裂纹多特征监测方法。首先,设计了一种RFID标签阵列,通过裂纹影响标签反射信号的相位特征来感知裂纹特征。然后,设计了一种基于几何法的裂纹粗定位算法,利用粗定位结果结合指纹法进行细粒度定位,计算得到裂纹的方向、位置和宽度。最后,通过在不同标签阵列密度以及指纹密度的情况下进行仿真,并进行真实实验来验证该算法的有效性和准确性。仿真及实验结果表明,与传统RFID指纹法相比,所提方法能有效降低裂纹多特征监测误差。展开更多
空间应用处理器Cache一直是抗辐射加固设计的薄弱环节,造成国产加固器件的Cache不能在轨应用,大大制约了空间应用处理器的性能.Cache中保存着处理器当前使用最频繁的指令和数据,Cache加固的效果,直接决定了空间应用处理器的抗单粒子翻转...空间应用处理器Cache一直是抗辐射加固设计的薄弱环节,造成国产加固器件的Cache不能在轨应用,大大制约了空间应用处理器的性能.Cache中保存着处理器当前使用最频繁的指令和数据,Cache加固的效果,直接决定了空间应用处理器的抗单粒子翻转(SEU)能力.处理器缓存标签阵列(Cache Tag Array)是Cache系统的核心,传统SEC仅能对Tag单位错误进行纠正,邻位双错会引起误纠正,在组相连和全相连的Cache中会引起较大的面积功耗开销.本文设计了结合比特重排序技术和扩展FastTag技术的高能效Cache Tag容错方法,具有三方面特点:(1)扩展传统FastTag技术在写回Cache应用的局限性;(2)冗余码率与SEC一样的条件下,降低邻位双错的误纠正概率;(3)和传统SEC方法相比,降低容错带来的面积功耗开销.经过仿真与评估,与传统SEC容错设计相比,能效比得到提高.可以将邻位双错检测率提高70%左右;面积开销降低12.1%;功耗开销降低47.6%;关键路径延迟降低0.2ns.展开更多
文摘目的建立阵列式标签标记的高通量测序方法并结合多克隆预筛选实现对点突变单克隆细胞株的高效鉴定。方法通过CRISPR/Cas9介导的同源重组修复(HDR)在K562细胞的rs826415位点引入G到T点突变。侯选细胞按每孔10~20个的密度接种培养多克隆,以带有标签(barcode)的引物区分各多克隆细胞,PCR扩增含rs826415位点的区段,产物合并进行二代测序。生物信息学分析各多克隆细胞的同源重组率及插入/缺失率。将阳性率最高孔内的细胞进一步单克隆培养并鉴定基因型。结果通过CRISPR/Cas9同源重组法和有限稀释获得96个rs826415位点打靶的多克隆细胞。经阵列式标签高通量测序法分析各孔细胞同源重组且不伴随插入/缺失(HDR without indel)的比率,96个多克隆的平均阳性率为0.21%,最高达4.35%,将该多克隆细胞进一步单克隆培养,从30个单克隆中成功获得rs826415位点由G/G突变为T/G的杂合型细胞株。结论通过阵列式标签高通量测序策略结合多克隆细胞预筛选,实现了定点突变单克隆细胞株的高效鉴定,相比常规方法显著降低了工作量和成本。
文摘针对基于天线阵列测角的射频识别(Radio Frequency Identification,RFID)定位系统成本高、无法估计目标姿态的问题,提出了一种基于标签阵列的姿态检索的定位算法。首先,分析了天线方向角、标签阵列姿态角和标签阵列信号到达角之间的关系,建立了标签阵列姿态检索的定位模型;其次,对标签阵列中相位误差来源进行了分析,利用标签间的相位差对标签阵列信号进行重构,降低了读写器收发电路、标签电路及多径效应引入的相位误差对定位精度的影响;同时,分析了标签阵列中的互耦效应对相位的影响,提出了互耦效应相位校正方法,提升了标签阵列的测角精度;最后,提出了一种标签阵列姿态估计算法,使用多个天线的方向角实现对标签阵列姿态角估计和定位。实验结果表明,系统在室内环境下平均定位误差为0.2 m,标签阵列的姿态角估计平均误差为4.35°。
文摘针对金属表面裂纹的多特征监测问题,提出了一种基于射频识别(Radio Frequency Identification, RFID)技术的裂纹多特征监测方法。首先,设计了一种RFID标签阵列,通过裂纹影响标签反射信号的相位特征来感知裂纹特征。然后,设计了一种基于几何法的裂纹粗定位算法,利用粗定位结果结合指纹法进行细粒度定位,计算得到裂纹的方向、位置和宽度。最后,通过在不同标签阵列密度以及指纹密度的情况下进行仿真,并进行真实实验来验证该算法的有效性和准确性。仿真及实验结果表明,与传统RFID指纹法相比,所提方法能有效降低裂纹多特征监测误差。
文摘空间应用处理器Cache一直是抗辐射加固设计的薄弱环节,造成国产加固器件的Cache不能在轨应用,大大制约了空间应用处理器的性能.Cache中保存着处理器当前使用最频繁的指令和数据,Cache加固的效果,直接决定了空间应用处理器的抗单粒子翻转(SEU)能力.处理器缓存标签阵列(Cache Tag Array)是Cache系统的核心,传统SEC仅能对Tag单位错误进行纠正,邻位双错会引起误纠正,在组相连和全相连的Cache中会引起较大的面积功耗开销.本文设计了结合比特重排序技术和扩展FastTag技术的高能效Cache Tag容错方法,具有三方面特点:(1)扩展传统FastTag技术在写回Cache应用的局限性;(2)冗余码率与SEC一样的条件下,降低邻位双错的误纠正概率;(3)和传统SEC方法相比,降低容错带来的面积功耗开销.经过仿真与评估,与传统SEC容错设计相比,能效比得到提高.可以将邻位双错检测率提高70%左右;面积开销降低12.1%;功耗开销降低47.6%;关键路径延迟降低0.2ns.