巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在大鼠2型星形胶质细胞中的表达

目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达;观察O-2A祖细胞、T1A和T2A在碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)的培养液中生长方式的改变。结果巢蛋白在O-2A祖细胞和T2A中表达,T1A不表达;SSEA-1仅在T2A中表达。在干细胞培养基中培养10d,T2A形成能增殖和连续传代的细胞球,细胞球巢蛋白标记阳性,贴壁后分化细胞具有神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞样形态;但相同培养条件下的O-2A祖细胞和T1A生长方式无改变。结论巢蛋白和SSEA-1在两型星形胶质细胞中的表达存在差异,T2A具有神经干细胞的某些生物学特性。

巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在O-2A谱系细胞中的表达

目的观察O-2A(oligodentrocyte-type-2 astrocytes)谱系细胞是否是表达神经干细胞的标志物。方法取新生大鼠脑皮质体外培养纯化的O-2A祖细胞、少突胶质细胞和2型星形胶质细胞,应用激光共聚焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白(nestin)和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达。结果nestin在O-2A祖细胞和2型星形胶质细胞中表达,在少突胶质细胞中不表达;SSEA-1仅在2型星形胶质细胞中表达。结论nestin和SSEA-1在O-2A谱系细胞中的表达存在差异,可能具有神经干细胞的特征。

SSEA-1、Oct-4在人胚胎生殖细胞的表达

目的体外培养人胚胎生殖细胞（EG细胞）,通过检测培养的细胞中SSEA-1、Oct-4的表达,鉴定人胚胎生殖细胞.方法取5～9周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养,采用流式细胞术及免疫细胞化学检测培养细胞的SSEA-1、Oct-4表达;取5～9周人胚胎的生殖腺嵴,制备石蜡切片,利用免疫组织化学方法,检测原始生殖细胞的SSEA-1表达.结果组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学及流式细胞仪显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达SSEA-1、Oct-4.石蜡切片免疫组织化学显示,人胚胎生殖腺嵴中有许多SSEA-1阳性表达的原始生殖细胞.结论组织块体外培养所获得细胞来源于原始生殖细胞,为未分化的人胚胎生殖细胞.

硫化氢对大鼠肾间质单核／巨噬细胞表面特异性标志抗原和肾损伤分子-1表达的影响

目的通过建立单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型，观察硫化氢（H：s）对肾间质纤维化和单核／巨噬细胞表面特异性标志抗原（ED-1）和肾损伤分子-1（KIM-1）表达的影响。方法96只雄性sD大鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量治疗组及高剂量治疗组，每组24只。模型组和治疗组采用左侧输尿管结扎术造成UUO，假手术组仅游离左侧输尿管而不结扎，术后立即分别予低、高剂量治疗组大鼠腹腔注射硫氢化钠1．4、7．0μmol／kg，每日2次；假手术组、模型组则予腹腔注射等量9g／L盐水。各组分别于建模后第7、14、21天分批处死动物8只，采用去蛋白法测定血浆H2s水平。HE染色评定肾小管间质病理指数评分，Masson染色测定。肾间质纤维化相对面积。免疫组织化学法检测ED-1、KIM-1表达。结果1．病理结果提示假手术组肾小管间质变化不明显。模型组和治疗组肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性，管腔扩张，。肾间质增宽，间质细胞和细胞外基质成分增多。模型组和治疗组各时间点。肾小管间质病理损伤明显高于假手术组（P〈0．05），高、低剂量治疗组肾小管问质病理损伤明显低于模型组（P〈0．05），但低、高剂量治疗组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。2．免疫组织化学分析显示模型组和治疗组各时间点肾小管问质ED-1、KIM-l表达明显高于假手术组（P〈0．05），治疗组肾小管问质ED-1、KIM-1表达明显低于模型组（P〈0．05），但低、高剂量治疗组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。3．模型组和治疗组各时间点血浆H：s水平低于假手术组（P〈0．05）。高、低剂量治疗组血浆H：s水平明显高于模型组（P〈0．05），但低、高剂量治疗组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论H：s可能部分通过减少肾小管间质ED-1和KIM-1的表达而达到减轻。肾间质纤维化的肾保护作用。

联合检测CEA、NSE、CYFRA21-1、CA72-4在老年肺部恶性肿瘤中的临床价值

目的联合检测胚胎抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白片段(CYFRA)21-1、糖类抗原(CA)72-4在老年肺部恶性肿瘤中的临床价值。方法选取158例老年肺癌患者为肺癌组,92例老年良性肺病患者为良性组,50例体检健康老年人为对照组,采用电化学发光法检测血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4水平。结果3组血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4水平差异有统计学意义(P<0.001);其中肺癌组均显著高于良性组和对照组,良性组CEA、CYFRA21-1及CA72-4水平均显著高于对照组(P<0.05);不同肿瘤类型患者血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4水平差异有统计学意义(P<0.001);其中CEA水平以腺癌患者最高,NSE水平以小细胞癌患者最高,CYFRA21-1、CA72-4水平以鳞癌患者最高(P<0.05);血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4联合检测灵敏度为84.18%,特异度为90.14%,准确度为91.67%,其灵敏度和准确度较单一检测明显升高(P<0.05),特异度无明显变化(P>0.05)。结论血清CEA、NSE、CYFRA21-1及CA72-4联合检测可有效提高早年肺癌患者的诊断灵敏度和准确度,其水平还与肺癌的组织学类型有关。

SSEA-4在不同分期卵巢腺癌中表达及与化疗耐药和预后相关性

目的 探讨阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-4在不同分期卵巢腺癌中表达及其与化疗耐药性及预后的相关性。方法 应用免疫组化法检测SSEA-4在不同分期卵巢腺癌组织中表达;分析不同分期及SSEA-4表达患者临床资料、近期化疗疗效、术后5年存活率、复发情况等。结果 Ⅳ期组卵巢腺癌转移及腹水显著高于Ⅰ~Ⅱ期组及Ⅲ期组(P<0.05),即随着卵巢腺癌分期的增加淋巴转移及腹水增多。患者年龄、绝经情况、妊娠次数及分化程度在不同SSEA-4表达的患者的卵巢癌组织中无差异(P>0.05);其中淋巴结转移情况及腹水发生在SSEA-4阳性表达组相较于阴性表达组显著偏高(P<0.05)。SSEA-4在Ⅳ期组表达显著高于Ⅲ期组及Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),即随着卵巢腺癌肿瘤分期的增加,SSEA-4阳性表达升高。SSEA-4阴性表达组化疗有效及化疗敏感性显著高于SSEA-4阳性组(P<0.05)。关于患者预后,SSEA-4阳性表达患者复发情况及死亡情况显著偏高(P<0.05)。SSEA-4阳性表达患者3、5年生存率显著低于SSEA-4阴性表达患者(P<0.05),1年生存率差异无统学意义(P>0.05)。SSEA-4阳性表达与不同卵巢腺癌分期与患者化疗有效、耐药性、复发具有显著正相关(P<0.05)。结论 SSEA-4在卵巢腺癌中的表达与肿瘤分期显著相关,可作为卵巢腺癌恶行程度的评价指标。SSEA-4与患者化疗耐药及预后显著相关,其表达强度可有效反映患者对化疗的敏感程度,可作为化疗耐药及预后的指标,有希望成为卵巢腺癌肿瘤恶性程度、近期化疗疗效及远期预后的有效指标。

DC-SIGN与微生物感染研究进展

树突状细胞(DC)在抵御病原体的过程中至关重要.然而, 近来的研究表明,一些病原体破坏了DC的功能以逃脱免疫监视.许多细胞表面分子与病毒包膜糖蛋白结合后并不介导病毒抗原的加工和呈递,相反,他们可作为捕获受体将病毒颗粒传递给靶器官或敏感细胞.HIV-1就可与DC特异的C型凝集素DC-SIGN(Dc specific intercellular—adhesion—molecule-3 grabbing nonintegrin,树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子;即CD209)结合,“绑架”C,感染宿主.DC—SIGN除了可与HIV-1、HCV结合外, 还可与其他多种病原体结合.对病原体和DC—SIGN的相互作用以及对DC功能的进一步研究,必将有助于抗感染的治疗.本文就DC—SIGN与微生物感染的研究进展作一综述.

电针对脊髓损伤大鼠星形胶质细胞的影响及机制

目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针治疗组,每组20只。分别于脊髓损伤造模后第3、7、14、28天时进行BBB评分(Basso-Beaie-Bresnehan scale),并用免疫组化方法检测大鼠脊髓损伤部位GFAP和SSEA-1变化并与对照组比较。结果电针组与模型组在3d和7d时,GFAP和SSEA-1阳性细胞数有差异(P<0.01),7d时阳性细胞数达到峰值,在14d时电针组和模型组的阳性细胞数有差异(P<0.05),而在28d时,电针组和模型组GFAP阳性细胞无明显差异(P>0.05),但SSEA-1阳性细胞有统计学差异(P<0.05)。结论电针治疗能够增加脊髓损伤模型大鼠星形胶质细胞逆分化,激发星形胶质细胞的干细胞潜能,从而促进损伤后脊髓功能的恢复;损伤后的脊髓GFAP和SSEA-1阳性表达的高峰期都在7d,提示脊髓损伤后7d内可能为电针治疗介入的黄金期。

4种肿瘤标记物联合血清铁蛋白早期诊断老年肺癌

目的探讨分析血清铁蛋白(SF)联合4种肿瘤标记物早期诊断老年肺癌的临床价值。方法选择185例老年早期肺癌患者作为肺癌组(其中鳞癌87例、腺癌79例、小细胞肺癌19例),60例老年良性肺病患者作为良性肺病组,健康老年人50例作为健康对照组,检测三组受试者血清SF、糖类抗原(CA)125、胚胎抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清细胞角蛋白片段(CYFRA)21-1水平,比较三组受试者各指标表达情况及各指标对老年早期肺癌诊断的敏感度和特异度,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对早期肺癌的诊断价值。结果肺癌组患者血清SF、CA125、CEA、NSE及CYFRA21-1水平均显著高于良性肺病组及健康对照组(P<0.05);而良性肺病组与健康对照组血清SF、CA125、CEA、NSE及CYFRA21-1水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清SF、NSE水平以小细胞肺癌患者最高(P<0.05),CA125、CEA水平以腺癌患者最高(P<0.05),CYFRA21-1水平以鳞癌患者最高(P<0.05)。与各指标单一诊断比较,五种指标联合检测灵敏度显著升高(P<0.05),而特异度无明显变化(P>0.05)。SF、CA125、CEA、NSE、CYFRA21-1诊断早期老年肺癌ROC曲线下面积分别为0.808、0.762、0.761、0.712、0.781,5项指标联合诊断早期老年肺癌ROC曲线下面积为0.915。结论血清SF联合4种肿瘤标记物能够有效提高早期老年肺癌患者的诊断检出灵敏度,有效提高患者诊断价值,从而有助于患者临床预后的改善。

血清铁蛋白联合4种肿瘤标记物早期诊断老年肺癌的价值研究

目的探讨分析血清铁蛋白(SF)联合4种肿瘤标记物早期诊断老年肺癌的临床价值。方法选择185例老年早期肺癌患者作为肺癌组,60例老年良性肺病患者作为良性肺病组,健康老年人50例作为健康对照组,3组受试者血清SF、糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)表达及灵敏度、特异度进行比较,ROC曲线分析各指标诊断价值。结果肺癌组SF、CA125、CEA、NSE及CYFRA21-1均高于良性肺病组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而良性肺病组与健康对照组SF、CA125、CEA、NSE及CYFRA21-1比较差异无统计学意义(P>0.05)。SF、NSE以小细胞肺癌患者最高,差异有统计学意义(P<0.05),CA125、CEA以腺癌患者最高,差异有统计学意义(P<0.05),CYFRA21-1以鳞癌患者最高,差异有统计学意义(P<0.05)。与各指标单一诊断比较,5种指标联合检测灵敏度升高,差异有统计学意义(P<0.05),而特异度无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。SF、CA125、CEA、NSE、CYFRA21-1诊断ROC曲线下面积分别为0.808、0.762、0.761、0.712、0.781,5项指标联合诊断ROC曲线下面积为0.915。结论 SF联合4种肿瘤标记物可提高早期老年肺癌患者诊断灵敏度,有效提高患者诊断价值,从而有助于患者临床预后的改善。

鸡胚胎干细胞的分离培养与鉴定

利用胰蛋白酶消化法从X期鸡胚中分离胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs),以鸡胚成纤维细胞为滋养层,进行体外培养,采用形态法和标志分子检测对获得的干细胞进行鉴定。结果显示,获得典型的呈巢状或岛状的鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells,cESCs)克隆,细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色呈蓝紫色,表明具有较高的内源性AKP活性;胚胎阶段特异性表面抗原SSEA-1(stage specific embryonic antigen 1,SSEA-1)鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。本试验成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。