补阳还五汤精简方对大脑中动脉阻塞模型大鼠海马组织Cdk5的调控

目的评价补阳还五汤精简方对大脑中动脉阻塞(MCAO)模型大鼠海马组织周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5,Cdk5)的调控。方法将♂SD大鼠随机分为假手术组、MCAO模型组、补阳还五汤干预组(灌胃3.15 g·kg^(-1))及补阳还五汤精简方干预组(灌胃2.41 g·kg^(-1)),每组按给药后1、3、7、14、28 d再各分5小组。采用免疫组化法、Western blot法和RT-PCR法考察不同时间点各组大鼠海马组织中Cdk5的表达。结果 MCAO模型大鼠海马组织中,脑缺血后1 d即出现Cdk5上调趋势,并随着脑缺血的加剧,Cdk5的表达继续上调,其中mRNA及蛋白水平在7~14 d达最大,28 d则出现下降趋势,与各时间点假手术组比较P<0.01,提示脑缺血损伤将激活Cdk5信号转导途径;补阳还五汤精简方干预后的3、7、14、28 d均能明显降低Cdk5的表达,与各时间点模型组比较P<0.05,且随着干预时间的延长,下调趋势越明显,干预28 d后,Cdk5的表达接近假手术组,提示补阳还五汤精简方可下调Cdk5的异常表达,与补阳还五汤原方比,两方对Cdk5的调控差异无统计学意义(P>0.05)。结论补阳还五汤精简方可能通过调控Cdk5的表达水平对脑缺血海马组织发挥保护作用。

蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞模型视网膜组织ET-1表达的影响

目的观察蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)模型ET-1表达的干预作用。方法取健康兔36只,每组9只,分为空白组、模型组、血栓通组、蛴螬组4组。采用波长532 nm的Nd:YAG激光光凝法建立RVO模型,连续灌胃给药,实验后7、14、21 d分别处死兔取材,石蜡包埋切片,用免疫组化法检测视网膜组织中ET-1表达活性,计算机图像分析系统并进行统计分析。结果蛴螬组7、14、21 d与模型组比较,ET-1表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);蛴螬组与血栓通组比较,差异无统计学意义(P>0.05);蛴螬组与空白组比较,7、14 d的ET-1表达活性明显高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05),21 d时的ET-1表达活性与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。结论蛴螬能够明显降低兔RVO模型ET-1表达,抗血栓形成,改善RVO后视网膜局部微循环,减轻缺血缺氧对血管内皮细胞的损害。

大鼠永久性大脑中动脉阻塞模型的建立

目的建立稳定可靠的线栓法大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)永久性脑缺血模型。方法对Koizumi和ZeaLonga模型构建方法加以改进。40只雄性SD大鼠随机均分为实验组和假手术组,分别进行模型制作和模型缺血的评价,采用2,3,5-氯化三苯四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色来计算大鼠脑梗死体积。结果大鼠MCAO模型制作成功率为95%;神经功能缺失评分1～3级百分率为95%。结论实验所采用的改良术式构建大鼠MCAO模型具有稳定性好、可重复率高、操作简便和手术时间短等优点,为基于大鼠永久性脑缺血模型开展的下游相关实验提供了良好的研究平台。

线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型的体会

线栓法大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型被普遍认为是脑缺血标准动物模型。该模型在制备过程中,易受到多重因素的影响。文章从血管解剖位置、插线的制备、切口位置、插线深度及翼腭动脉结扎等角度,对模型塑造过程中发现的现象与问题进行论述。

线栓法大脑中动脉阻塞模型及神经保护因子研究进展

缺血性脑卒中是脑血管血栓栓塞或血栓形成引起脑血流减少脑组织缺血坏死的病理过程,目前研究脑卒中病理机制及药物研发最常用的动物模型为大脑中动脉阻塞模型。本文就线栓法大脑中动脉阻塞模型及基于脑缺血动物模型的神经保护因子作一综述。

基于大鼠大脑中动脉阻塞模型的DTI研究进展

大鼠脑卒中模型具有诸多优点,其中大脑中动脉阻塞(MCAO)模型以其手术简单、成功率高、不影响脑缺血后脑水肿和颅内压等病生理变化,已广泛应用于局灶性脑缺血的研究。一些基于MCAO模型的神经放射学技术,如扩散张量成像(DTI),能够在活体状态下,评价脑缺血后大脑功能和结构的时间与空间上的改变,这有助于揭示脑卒中后的病生理过程。传统DTI能够评价组织结构完整性和白质连接,而一些DTI新技术,如扩散波谱成像(DSI)、Q-ball成像和扩散峰度成像(DKI)更是提高了这项技术的应用能力。这些基于MCAO模型的MRI研究,可提供良好的手段去发现脑卒中后组织结构与功能长时间的改变,并以此为基础,研究脑缺血的转归和一些药物的疗效。就基于MCAO模型的DTI研究最新进展予以综述。

支持阻塞与非阻塞模型且线程安全的环形缓冲的设计与实现——环形缓冲,攻克高级缓冲技术的关键

本文首先简介了各种缓冲技术的特征。结合uML规范揭示了这些技术间的构成关系,并进一步指出了环形缓冲在缓冲技术体系中的特殊地位。最后,文章的主体部分阐述和分析了线程安全的且同时支持阻塞与非阻塞模型的环形缓冲所牵涉到的关键问题和技术。

大鼠大脑中动脉阻塞模型中Zn^(2+)囊泡的释放

Zn^2＋是基因表达和很多酶活性所必须的微量元素，脑组织中含有丰富的锌（10μg/每克湿重组织），其中有10％存在于谷氨酸能神经元的突触囊泡中。虽然体外实验已经证实Zn^2＋的释放依赖于神经元的兴奋，但对脑缺血过程中Zn^2＋变化的研究不多，缺血过程中是否有Zn^2＋的释放尚不清楚。本实验用脑微量透析方法研究大鼠大脑中动脉闭塞脑缺血模型的Zn^2＋囊泡的释放情况。

应用光动力学方法制作实验性视网膜静脉阻塞模型

目的 应用光动力学方法制备实验性视网膜静脉阻塞模型 ,以观察眼底形态学和病理学改变。方法 取小型猪 15只 ,随机取单眼为实验组 ,静脉推入孟加拉玫红 (2 0mg/kg) ,1min后采用玻璃体切割机眼内照明的导光纤维直接照射视盘上方 0 5～ 1 0PD的视网膜主干静脉 15min ;分别于血栓形成后 1h、3d、7d、14d、2 1d及 2 8d进行间接眼底镜观察、荧光素眼底血管造影检查 ,取静脉阻塞区视网膜及血管行光镜和透射电子显微镜观察。对照组对侧眼不注射孟加拉玫红 ,直接用光导纤维照射靶血管 2 0min ,取出光导纤维 ,缝合切口。分别于光导纤维照射后 1h、2 4h、3d后观察眼底改变 ,同时摘除眼球 ,行光镜及电镜观察。结果 视网膜静脉血栓形成可靠 ,可见视网膜静脉纡曲扩张、广泛出血及水肿等典型病理改变。结论 利用导光纤维眼内照明技术与化学光敏剂方法制作的实验性视网膜静脉阻塞模型 ,是一种操作简单、定位准确、血栓形成可靠的实验技术。

散血明目片对兔视网膜静脉阻塞模型tPA、PAI-1表达的影响

目的:探讨活血通脉利水明目之散血明目片对兔视网膜静脉阻塞(RVO)模型视网膜组织中组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)表达的干预作用。方法:取健康有色家兔36只,每组9只,分为A组:健康空白组,B组:模型组,C组:血栓通组,D组:散血明目片组。采用波长532nm的Nd:YAG激光光凝法建立RVO模型,连续灌胃,实验后第7、14、21d分别处死家兔取材,石蜡包埋切片,用免疫组化法检测视网膜组织中tPA、PAI-1、表达活性。结果:D组与A、B、C三组比较:tPA活性明显高于A、B两组(P<0.05),与C组差异无显著性;PAI-1表达活性明显低于B组(P<0.05),与C组差异无显著性。结论:活血通脉利水明目之散血明目片能够明显提高RVO后视网膜组织tPA表达,降低PAI-1表达,从而抑制血栓形成,改善RVO后视网膜局部微循环,减轻缺血缺氧。

中风瘀热方对缺血性脑卒中模型大鼠的干预作用及机制

目的研究中风瘀热方对缺血性脑卒中模型大鼠的干预作用及机制。方法将85只大鼠随机分为假手术组(生理盐水,n=15)、模型对照组(生理盐水,n=18)、尼莫地平片组(阳性对照,10.8 mg/kg,n=18)和中风瘀热方高剂量组(20.52 g/kg,n=17)、中风瘀热方低剂量组(5.13 g/kg,n=17)。预防性连续给药7 d(每天1次)后,除假手术组外,其余各组均采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。造模成功后,各组大鼠继续给药3 d。实验期间,观察大鼠一般情况,进行神经功能评分;末次给药后,计算脏器指数,观察大鼠脑梗死面积及脑组织病理形态学变化,检测大鼠脑组织及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平及脑组织中胱天蛋白酶3(caspase-3)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白的平均光密度值。结果造模3 d后,与假手术组比较,模型对照组大鼠神经功能评分,脑指数、脾指数,脑梗死面积占比,脑组织和血清中TNF-α、IL-6水平,脑组织中caspase-3蛋白平均光密度值均显著升高(P<0.05或P<0.01);脑组织出现核固缩、弥散性水肿等病变。与模型对照组比较,各给药组上述指标均有不同程度的改善,其中中风瘀热方高剂量组大鼠脑指数、脾指数,脑梗死面积占比,脑组织和血清中TNF-α水平,脑组织中caspase-3蛋白和p-AKT蛋白的平均光密度值均显著回调(P<0.05或P<0.01)。结论中风瘀热方对MCAO模型大鼠有一定的防治作用;其机制可能是通过减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌,下调缺血侧脑组织中caspase-3蛋白表达,上调缺血侧脑组织中p-AKT蛋白表达,从而达到保护神经元的作用。

基于市场报价的阻塞管理模型及内点法实现

提出了一种电力市场下解决阻塞问题的新方法 ,它可以根据市场报价同时调整实时平衡市场下的发电机出力和削减部分短期双边合同量。建立了阻塞管理的非线性数学模型 ,应用改造的非线性原对偶内点法最优潮流求解以上模型 ,计算出的节点实时电价体现了如何在各用户中分摊阻塞管理费用。算例表明 ,该方法可以根据市场参与者的报价得到最优的调度方案 ,利用节点电价指导用户调整用电计划 ,从而有效地解决了阻塞问题。

大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究

目的通过对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型神经功能缺失评分的计算和脑梗死体积的测量,评价改良的大鼠MCAO再灌注模型,为实验研究提供可重复性好、稳定可靠的动物模型。方法20只SD大鼠随机分为A、B两组,A组用头端烧制成圆球的传统"圆头线栓",B组采用头端用万能胶包裹成梭形膨大的改良"梭头线栓"制作大鼠MCAO模型,阻断大脑中动脉血供3h后将"线栓"拔出,造成再灌注损伤。采用"盲法"分别于再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分;再灌注24h后处死大鼠,脑切片TTC染色,数码相机照相,采用图像分析系统测量脑梗死体积比;根据统计结果评价改良的MCAO再灌注模型,分析MCAO再灌注后神经功能缺失评分与脑梗死体积比之间的关系。结果B组大鼠脑梗死体积比大于A组(P<0.01);B组大鼠脑梗死体积比明显较A组稳定,变异系数(coefficient of variation,CV)分别为CVB=0.12,CVA=1.08);再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分,B组评分均高于A组(P<0.05);MCAO再灌注模型大鼠神经功能缺失评分与脑梗死体积比的大小成线性相关关系(r=0.873,P<0.01)。结论采用改良的"梭头线栓"制作MCAO再灌注模型,神经功能缺失评分和脑梗死体积比变异度小、稳定性高,是可靠的制模方法;神经功能缺失评分能反映脑梗死的严重程度,可用作评价药物疗效的指标。

脑络欣通对大脑中动脉阻塞再灌注模型大鼠神经干细胞增殖分化的影响

目的观察脑络欣通对大脑中动脉阻塞再灌注(middle cerebral artery occlusion-reperfusion,MCAO-R)模型大鼠神经干细胞增殖分化的影响。方法采用线栓法复制MCAO-R大鼠模型,将30只健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组和给药组。分别采用神经功能评分和TTC染色鉴定模型大鼠的神经功能缺损和脑缺血面积,采用免疫荧光染色法观察大鼠海马CA1、CA2、CA3、齿状回(dentate gyrus,DG)区巢蛋白(Nestin)和神经丝蛋白-H(hypophosphorylated neurofilament-H,NF-H)表达水平。结果给药组Nestin阳性表达主要发生在DG区,NF-H阳性表达主要发生在CA3区。脑络欣通促进神经干细胞增殖的作用在DG、CA1、CA2、CA3区均十分明显,以DG区尤为突出,促进神经干细胞分化的作用主要表现在CA3、DG、CA2、CA1区。与模型组比较,给药组大鼠海马各区的Nestin、NF-H阳性细胞均明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论脑络欣通具有促进海马区神经干细胞增殖并分化为神经细胞的作用。

慢性犬阻塞性睡眠呼吸暂停并发心房颤动模型的构建及对心房电生理和超微结构的影响

目的构建犬慢性阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea syndrome,OSA)并发心房颤动(atrial fibrillation,AF)的动物实验模型,观察慢性OSA对犬心房电生理特性及组织结构的影响。方法在麻醉下气管插管的6只比格犬行人为的反复气道阻塞,每天4h,共持续3个月,建立慢性呼吸暂停模型。通过程序刺激(S1S2)诱导AF模型,观察造模前、造模后第1、2、3个月气管插管堵塞前、后pH值、二氧化碳分压(PCO_2)、氧分压(PO_2)及观察造模前、造模后第1、2、3个月右心房有效不应期(effective refractory period,ERP)和AF持续时间。通过HE及电镜观察右心房大体及超微结构的变化。6只比格犬麻醉气管插管,但不堵塞气管插管,作为对照取组织进行HE及电镜。结果所有犬均造模稳定,动物状态良好,与干预前相比较,3个月后PO_2和pH值逐月降低,PCO_2逐月增加,提示造模成功。犬心房ERP逐渐缩短和AF持续时间逐渐延长(P<0.05)。心房肌组织结构明显紊乱,部分心肌纤维断裂、溶解,坏死部位肌间质线粒体聚集,线粒体大小、形态不一,部分线粒体肿胀,脊膜结构不清晰,部分线粒体萎缩、体积缩小。结论本方法能够成功构建稳定、可重复性好的犬慢性睡眠呼吸暂停并发心房颤动的动物模型,犬心房ERP逐渐缩短和AF持续时间逐渐延长,心房肌结构明显紊乱。本AF模型可应用于慢性OSA病理生理机制及相关研究。

胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织TIMP1mRNA表达及复方861抑制作用的研究

目的:观察胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织TIMP1 mRNA表达以及复方861的治疗作用。方法:给雌性Wistar大鼠胆管内逆行注入粘合剂加胆管结扎制备胆管阻塞性肝纤维化模型。术后第7天开始给予不同剂量的复方861灌胃,共49天。以RT-PCR法观察复方861对肝组织TIMP1 mRNA表达水平的影响。结果:模型组肝组织TIMP1 mRNA为1.691±0.646,明显高于正常对照组(P<0.05);复方861 3g/kg、6g/kg、9g/kg组肝组织TIMP1 mRNA分别为0.858±0.132、0.771±0.227、0.872±0.306,明显低于模型组(P<0.05或0.01)。结论:胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型肝组织TIMP1 mRNA明显增高,复方861能够抑制该增高,可能是其抗肝纤维化作用的机理之一。

蒙成药额日敦-乌日勒对大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO/R)大鼠血清及脑组织IL-6、IL-1β的影响

目的:探讨额日敦-乌日勒对大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO/R)大鼠血清及脑内IL-6、IL-1β的影响。方法:选取144只wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、对照组、额日敦-乌日勒低、中、高剂量组共6组。除假手术组外其他组采用改良Zea-longa法,建立MCAO/R模型。手术造模成功后24h开始灌胃给药,治疗组(额日敦-乌日勒125mg/kg、额日敦-乌日勒250mg/kg、额日敦-乌日勒500mg/kg),对照组(血塞通236.25mg/kg)。假手术组、模型组wistar大鼠每日一次灌胃纯净水。分别再灌注1、3、7天给药后行神经功能评分、心脏取血、断头取脑组织。采用ELISA法检测血清、脑组织IL-6、IL-1β的含量进行统计学分析。结果:wistar大鼠再灌注1、3、7天模型组与假手术组相比血清、脑组织IL-6、IL-1β含量均明显升高,具有统计学意义(P<0.01)。再灌注1天额日敦-乌日勒各组和血塞通组与模型组相比血清、脑组织IL-6、IL-1β含量无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。再灌注3、7天额日敦-乌日勒各组和血塞通组与模型组相比血清、脑组织IL-6、IL-1β含量明显降低,具有统计学意义(P<0.01)。再灌注3、7天额日敦-乌日勒高剂量组与血塞通组相比明显降低,具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:额日敦-乌日勒治疗缺血型脑卒中有一定的疗效,其作用途径可能是通过抑制IL-6、IL-1β的表达而起到神经功能恢复的作用。

脑络欣对大脑中动脉阻塞再灌注模型大鼠海马区细胞层面的影响

目的:观察脑络欣通对大脑中动脉阻塞再灌注(Middle cerebral artery occlusion and reperfusion,MCAO-R)大鼠海马区细胞层面的作用机制与效应。方法:将30只大鼠编号称体质量、记录、计算麻醉剂用量后随机分为假手术组6只和手术组24只。手术组大鼠采用线栓法造模,将造模成功的大鼠随机分为模型组和给药组,每组各12只。造模后第1天,予给药组大鼠脑络欣通溶液1 mL·kg^(-1)灌胃,假手术组和模型组予等量生理盐水灌胃,共7 d。制备大鼠脑组织石蜡切片并进行HE染色。结果:假手术组大鼠脑组织缺血面积为0,模型组和给药组脑缺血面积百分比比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组细胞排列散乱,锥体细胞数量减少,胶质细胞增生明显;给药组锥体细胞排列比较规则,在多个区域数量明显增多,甚至有迁移现象,偶见胶质细胞。结论:脑络欣通对大脑神经细胞不仅有促进增殖和分化的作用,而且能够促进神经干细胞在增殖分化后迁移,海马CA1、CA3区尤其明显,以替代缺血区损伤及死亡神经细胞,从而改善神经功能,促进脑功能的恢复。

基质金属蛋白酶对大鼠慢性阻塞性肺病模型气道细胞外基质重塑的作用及影响因素

目的:研究基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMP-1)在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型气道细胞外基质重塑中的作用及 N-乙酰半胱氨酸(NAC)、蛋白激酶 C 抑制剂 H7及转移生长因子(TGF-β)单抗干预的影响。方法:Wistar 大鼠随机分为(1)对照组;(2)COPD 模型组,采用熏香烟加气管注小量内毒素法复制 COPD 模型;(3)NAC 干预组(NAC 组);(4)H7干预组(H7组);(5)TGF-β单抗干预组。观察各组病理形态学改变;生化法测定支气管肺组织羟脯氨酸含量;免疫组化法和 RT-PCR 法测支气管肺组织 MMP-9、2及 TIMP-1,以及 TGF-βⅠ、Ⅱ受体的表达;SDA-PAGE 明胶酶谱学测定支气管肺组织 MMPs 酶活性。结果:模型组气道壁以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质及羟脯氨酸含量较对照组显著增多,NAC 组及 TGF-β单抗组较模型组显著减少,H7组羟脯氨酸含量较模型组显著增多。模型组 MMP-9、2及 TIMP-1,以及 TGF-βⅠ、Ⅱ受体在气道上皮、肺泡巨噬细胞、肺血管内皮细胞等细胞中蛋白和(或)mRNA 表达显著增强,72 kdMMP-2及92 kdMMP-9酶原活性显著增高,三个干预组 MMP-2、9及 TIMP-1的蛋白及 mRNA 表达较模型组显著减弱,72 kdMMP-2及92 kdMMP-9酶原活性显著减低,三个干预组TGF-βⅠ、Ⅱ受体亦较模型组有不同程度减弱。结论:以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质显著增生是 COPD 气道重塑的重要病理改变。COPD 气道细胞外基质降解及合成代谢异常活跃与气道细胞外基质重塑密切相关;NAC 可对 MMP-9/TIMP-1的失衡起调节作用,其表达及功能在一定程度上依赖 PKC 信号传导途径。抑制 TGF-β传导通路可能使胶原等细胞外基质降解及合成减少。