阿司匹林诱生型脂氧素A4对小鼠脊髓撞击损伤后神经病理性疼痛的影响及机制探讨

目的评估阿司匹林诱生型脂氧素A4(ATL)对小鼠脊髓损伤(SCI)模型中神经炎症和神经病理痛的影响。方法成年FVB小鼠T10节段脊髓进行改良Allen'脊髓撞击损伤。小鼠随机分成ATL组和Vehicle组,分别在SCI手术后4和24 h鞘内注射ATL(300 pmol)或vehicle。采用von Frey方法评估两组小鼠后脚机械刺激的敏感性;采用PCR方法检测两组小鼠脊髓小胶质细胞标记物和细胞因子信使核糖核酸(m RNA)表达;此外,通过小鼠大脑皮层组织小胶质细胞培养来评估ATL对小胶质细胞的激活和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放的直接影响。结果与Vehicle组小鼠比较,ATL处理导致SCI诱导的小鼠机械痛敏降低;脊髓小胶质细胞标记物和促炎性细胞因子m RNA水平也下降。而且,ATL处理对小胶质细胞标记物IBA-1和促炎性因子TNF-α表达影响。此外,原代皮层小胶质细胞表达ATL相应受体ALX,ATL通过ALX发挥抗炎作用。结论ATL通过ALX受体调节小胶质细胞激活和TNF-α释放,最终降低小鼠SCI后神经病理性疼痛。

阿司匹林诱生型脂氧素对急性肾损伤小鼠肾脏保护功能的研究

目的探讨阿司匹林诱生型脂氧素（ATL）对急性肾损伤（AKI）小鼠的肾脏保护作用。方法将88只无特定病原体（SPF）级C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法随机分为脂多糖（LPS）组（再分为2 h组、4 h组、8 h组、12 h组、24 h组5个亚组）、ATL＋LPS组（再分为2 h组、4 h组、8 h组、12 h组、24 h组5个亚组）和正常对照组，每组8只。LPS组小鼠给予LPS腹腔注射进行AKI造模，ATL＋LPS组在造模前30 min先给予ATL腹腔注射干预治疗，然后再给予LPS腹腔注射进行AKI造模。各组小鼠在造模后第2、4、8、12、24小时分别收集血清和尿液标本。酶联免疫吸附试验检测各组小鼠血清肌酐、尿素氮、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和尿液中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤因子1（KIM-1）、富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）和神经生长因子（netrin-1）指标。结果ATL＋LPS组4 h、8 h、12 h、24 h小鼠肾组织病理评分[（22.32±1.04）分、（31.11±1.86）分、（18.22±0.92）分、（20.87±3.18）分]均显著低于LPS组[（35.47±2.27）分、（52.28±2.82）分、（54.99±4.56）分、（53.41±4.76）分]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。ATL＋LPS组血肌酐[8 h：（143.07±5.02） μmol/L]、血尿素氮[12 h：（33.07±3.52） mmol/L]、血TNF-α[4 h：（196.33±14.18） ng/L、8 h：（221.77±10.11） ng/L]和血IL-1β[4 h：（50.25±2.67） ng/L]水平均低于LPS组对应时间点水平[血肌酐8 h：（227.43±11.17） μmol/L；血尿素氮12 h：（59.68±3.84） mmol/L；血TNF-α 4 h：（267.87±26.48） ng/L、8 h：（334.78±21.08） ng/L；血IL-1β 4 h：（89.45±5.87） ng/L]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。ATL＋LPS组尿液NGAL[4 h：（56.76±4.01） μg/L，8 h：（65.44±7.81） μg/L]、KIM-1[8 h：（78.19±9.48） μg/L]和netrin-1[8 h：（40.12±2.01） ng/L、12 h：（36.87±2.87） ng/L]水平均低于LPS组对应时间点各指标水平[NGAL 4 h：（168.77±10.77） μg/L、8 h：（155.33±8.26） μg/L；KIM-1 8 h：（124.73±13.47） μg/L；netrin-1 8 h：（89.17±2.74） ng/L、12 h：（81.11±3.88） ng/L]，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。 结论ATL可缓解LPS诱导的小鼠急性肾损伤，发挥其肾脏保护作用。

鞘内注射脂氧素A4对切口疼痛大鼠的抗伤害性感受作用

目的观察脊髓水平阿司匹林诱生型脂氧素A4(ATL)对切口疼痛大鼠热痛敏、机械痛敏的影响,探讨其是否具有抗伤害性感受作用及其作用机制。方法雄性SD大鼠72只制作动物切口疼痛模型,随机分为4组:生理盐水组(NS组),ATL组,脂氧素受体激动剂组(BML-111组),脂氧素受体拮抗剂组(BOC-2组),每组18只,于手术前(T0),术后2 h(T2)、4 h(T4)、6 h(T6)、8 h(T8)、10 h(T10)通过热板实验、探针刺激实验评估对大鼠热痛敏、机械痛敏的影响。实时PCR检测脊髓炎症因子(TNF-α、IL-6)m RNA的表达,Western blot检测腰段椎体p-ERK的表达。结果组内与T0比较发现,四组切口疼痛模型后2 h,大鼠TWL、MWT均减少(P<0.05),ATL和BML-111组内T4、T6、T8、T10与T2比较,TWL、MWT均增加(P<0.05),NS和Boc-2组内T4、T6、T8、T10与T2比较,TWL、MWT无明显变化。ATL和BML-111两组与NS组组间比较,T4、T6、T8、T10的TWL、MWT均增加(P<0.05)。RT-PCR显示,与NS组、Boc-2组比较,ATL组和BML-111组TNF-α、IL-6脊髓m RNA表达明显减少(P<0.05);Western blot结果显示,与NS组、Boc组相比,ATL组、BML-111组p-ERK蛋白表达降低;Boc组与NS组表达无差异。结论切口模型术后后足出现热缩足潜伏期缩短、机械缩足反应阈值减低,鞘内注射阿司匹林诱生型脂氧素A4可以减轻痛觉过敏,降低脊髓背角神经元中促炎症因子的表达,抑制脊髓p-ERK的表达。