阿尔泰金莲花总黄酮通过miR-23b-3p抑制RSV感染支气管上皮细胞凋亡和炎症反应的分子机制研究

目的:探讨阿尔泰金莲花总黄酮对呼吸道合胞病毒(RSV)感染支气管上皮细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法:将人支气管上皮细胞16-HBE分为NC组、RSV组、RSV+低、中、高剂量组、RSV+miR-23b-3p组、RSV+miR-NC组、anti-miR-23b-3p+RSV+高剂量组和anti-miR-NC+RSV+高剂量组。细胞计数(CCK-8)试剂检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Westernblot法检测蛋白表达情况,ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1α水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-23b-3p表达水平。结果:RSV感染的16-HBE细胞活性、CyclinD1表达水平降低,凋亡率、CleavedCaspase-3、Bax表达水平、TNF-α、IL-6、IL-1α水平升高,miR-23b-3p表达水平降低(P<0.01)。不同剂量阿尔泰金莲花总黄酮处理后,16-HBE细胞活性、CyclinD1表达水平升高,凋亡率、CleavedCaspase-3、Bax表达水平、TNF-α、IL-6、IL-1α水平降低,miR-23b-3p表达水平升高(P<0.01)。过表达miR-23b-3p后,细胞活性、CyclinD1表达水平升高,凋亡率、CleavedCaspase-3、Bax表达水平、TNF-α、IL-6、IL-1α水平降低(P<0.01)。抑制miR-23b-3p表达可以逆转阿尔泰金莲花总黄酮对RSV感染的16-HBE细胞活性,凋亡和炎症因子水平的影响。结论:阿尔泰金莲花总黄酮可能通过上调miR-23b-3p表达抑制RSV感染的支气管上皮细胞凋亡和炎症反应。

阿尔泰金莲花总黄酮对PM2.5致大鼠肺纤维化的防治作用研究

目的研究阿尔泰金莲花总黄酮(trollius altaicus flavonoids, TAF)对大气细颗粒物(PM2.5)致大鼠肺纤维化的防治作用。方法 60只Wistar大鼠随机分为正常对照组,PM2.5模型组,PM2.5模型+TAF低、中、高剂量组(125、250、500 mg/kg·bw),PM2.5模型+地塞米松(灌胃0.2 mg/kg·bw)阳性对照组,每组10只。除正常对照组与模型组外,各剂量组按设定剂量灌胃1次/d给予受试物,连续28 d。PM2.5暴露和给药同时进行,除正常对照组外,其余各组每周气管滴注PM2.5混悬液(50 mg/kg·bw)2次,染毒4周,共8次,建立肺纤维化大鼠模型。第29天,经腹主动脉采血、取肺组织、收集肺泡灌洗液(BALF),检测大鼠炎症反应水平、纤维化指标和氧化应激水平,观察肺组织病理学变化情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠外周血白细胞计数,血清和BALF中IL-1β、TNF-α、HYP、PINP和PIIINP含量升高(P<0.01),血清中LDH、MDA和NO含量升高(P<0.01),肺组织W/D升高(P<0.01),IL-10、SOD和GSH含量降低(P<0.01);病理结果显示,模型组大鼠肺组织大片实变、水肿、出血、肺泡结构破坏,肺间质炎细胞大量浸润,可见大量粉尘结节,肺实变区可见大量亮蓝色胶原纤维沉积。与模型组比较,TAF中、高剂量组大鼠外周血白细胞计数,血清和BALF中IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05或0.01),血清中LDH、MDA和NO含量降低(P<0.05或0.01),肺组织W/D降低(P<0.05或0.01),IL-10、SOD和GSH含量升高(P<0.05或0.01);TAF高剂量组各项检测指标与地塞米松组差异无统计学意义(P>0.05)。病理检查结果显示随TAF剂量增加大鼠肺组织形态结构破坏降低,肺实变、粉尘结节、炎症细胞浸润及胶原纤维沉积减少。结论 TAF对PM2.5致大鼠肺纤维化有一定的防治作用。