益肾化浊方对阿尔茨海默病模型小鼠内化作用的影响

目的:观察益肾化浊方对快速老化小鼠亚系8(SAMP8)小鼠谷氨酸受体2(GluR2)内化作用的影响,探讨其改善阿尔茨海默病学习记忆能力的作用机制。方法:采用激光共聚焦、蛋白质印迹法(Western Blotting)和免疫共沉淀检测小鼠海马神经元突触后膜GluR2相对表达量,相关蛋白的表达以及各蛋白间相互结合情况。结果:经益肾化浊方干预后,SAMP8小鼠突触后膜GluR2含量较前增多,降低了谷氨酸受体2L-丝氨酸(GluR2 Ser880)蛋白水平,提高了AMPA受体结合蛋白(ABP)、谷氨酸受体结合蛋白(GRIP)水平,同时促进了GluR2-N-乙基马来酰亚胺敏感因子(NSF)结合,抑制了GluR2-转接蛋白复合物(AP2)结合。结论:益肾化浊方可抑制SAMP8小鼠AMPA受体GluR2内化作用,该作用与减轻GluR2磷酸化和上调内化抑制蛋白GRIP、ABP的表达,促进GluR2-NSF的结合,减少GluR2-AP2的结合有关。

酸枣仁汤通过激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路改善阿尔茨海默病模型小鼠线粒体功能障碍

目的 以APP/PS1小鼠为阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型,通过AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路研究酸枣仁汤(SZRD)对AD线粒体功能障碍的作用和作用机制。方法 将30只APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组、SZRD低剂量组(L-SZRD)、SZRD高剂量组(H-SZRD),10只C57BL/6JNju小鼠设为对照组(WT)。Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力;硫黄素染色观察小鼠海马区老年斑;免疫组化检测小鼠海马区Aβ的表达;透射电镜观察小鼠海马区线粒体形态;试剂盒检测小鼠海马中ATP和ROS的含量;Western blot实验检测小鼠海马中AMPK、p-AMPK-ThrK172、SIRT1、PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的表达。结果 与APP/PS1组比较,L-SZRD和H-SZRD能有效提高小鼠学习记忆能力,减少海马区老年斑和Aβ沉积,改善线粒体结构损伤,增加海马中ATP含量,减少海马中ROS表达,增加海马中p-AMPK-ThrK172、SIRT1、PGC-1α、NRF1、NRF2、TFAM的表达。结论 SZRD可改善AD小鼠认知损伤、老年斑沉积和线粒体功能障碍,其机制可能与激活AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路有关。

雌激素对app/ps1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠海马老年斑形成的抑制作用

目的 :用无偏性体视学定量研究雌激素对app/ ps1双转基因 (app/ ps1dtg)AD模型小鼠海马β 淀粉样蛋白 (Aβ)沉积及老年斑形成的抑制作用。方法 :雌性app/ ps1dtg小鼠行双侧卵巢切除 ,于颈部皮下植入可持续释放 6 0d的 17β 雌二醇片剂 (17 βestradiol,E2 ) ;6 0d后取脑行冰冻切片 ,6E10免疫组化染色显示沉积于海马的Aβ ,刚果红组织学染色显示老年斑 ,无偏性体视学测量海马内Aβ斑及老年斑的总体积。结果 :E2抑制Aβ在海马内沉积 ,降低海马内Aβ斑的总体积 ,并抑制老年斑的形成。 结论 :E2防治阿尔茨海默病可能与E2抑制Aβ在脑内沉积并聚集形成老年斑有关。

还脑益聪方提取物对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织Aβ、APP及相关分泌酶表达的影响

目的观察由补肾益气、活血解毒中药组成的还脑益聪方提取物对β-淀粉样前体蛋白(APP)转基因造成的阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响,并初步探讨其作用机制。方法将3月龄AD模型小鼠随机分为模型组、还脑益聪方提取物大、小剂量组(2.8,1.4 g.kg-1)和盐酸多奈哌齐组(0.65×10-3 g.kg-)1,每组15只;同月龄相同遗传背景的C57BL/6J小鼠15只作为正常对照组。所试药物稀释相同体积灌胃给药,对照组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续灌胃6个月。采用免疫组织化学法结合彩色图像分析法观察各组小鼠脑组织APP、Aβ、β位点剪切酶(BACE)和早老蛋白1(PS-1)的表达;采用刚果红染色观察各组小鼠脑组织淀粉样沉积的变化。结果与正常对照组相比,模型组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著增多(P<0.01),刚果红染色示橘红色染色增多;与模型组相比,还脑益聪方组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著减少(P<0.05或P<0.01),橘红色染色较少。结论还脑益聪方提取物可通过减少脑组织的APP含量及抑制β-和γ-分泌酶,从而减少AD模型小鼠脑组织Aβ的生成及淀粉样沉积的形成,这也是其改善AD模型小鼠学习记忆能力的机制之一。

脂联素改善阿尔茨海默病模型小鼠焦虑情绪及工作记忆

目的:探讨脂联素(APN)预处理对9月龄三转基因阿尔茨海默病(3xTg-AD)模型小鼠学习记忆能力和焦虑情绪的影响。方法:选取9月龄3xTg-AD小鼠及C57BL/6J小鼠,分为4组:WT+Saline组、3xTg-AD+Saline组、WT+APN组和3xTg-AD+APN组,每组8只。将全部小鼠进行侧脑室埋管术后,恢复7 d,在自由清醒状态下分别经侧脑室给予生理盐水或APN,采用旷场、新物体识别及Y-迷宫3种行为学手段检测小鼠的情绪及学习记忆能力。结果:(1)在旷场实验中,与WT+Saline组小鼠相比,3xTg-AD+Saline组小鼠在中央区域的活动时间明显缩短,在外周区域的活动时间明显延长,给予APN后可有效逆转3xTg-AD小鼠的该现象,表明脂联素可有效缓解3xTg-AD小鼠的焦虑情绪。(2)新物体识别实验中,3xTg-AD+Saline组小鼠的辨别指数为(-16.7±10.1)%,明显低于WT+Saline组的(18.0±8.2)%(P<0.01)和3xTg-AD+APN组的(15.7±8.8)%(P<0.01),表明脂联素可明显改善3xTg-AD小鼠的识别记忆能力损伤。(3)Y-迷宫实验中,3xTg-AD+Saline组小鼠的自发交替正确率为(40.0±1.7)%,明显低于WT+Saline组的(56.6±4.6)%(P<0.01)和3xTg-AD+APN组的(53.9±5.6)%(P<0.01),表明脂联素能够逆转3xTg-AD小鼠工作记忆能力的损伤。结论:脂联素可以改善9月龄3xTg-AD小鼠的焦虑情绪及识别记忆和工作记忆能力损伤,可能在AD的预防和治疗中发挥有效作用。

APP/PS-1/tau三转基因阿尔茨海默病模型小鼠早期认知功能研究

目的观察APP/PS-1/tau三转基因阿尔茨海默病（3×Tg-AD）模型小鼠空间学习和记忆能力、海马CA1区突触可塑性和可溶性β-淀粉样蛋白42（Aβ42）表达变化,探讨3×Tg-AD小鼠早期认知功能障碍发生机制。方法 4月龄雄性3×Tg-AD小鼠和相匹配的129/C57BL/6杂交野生型小鼠各10只,旷场实验和Morris水迷宫实验观察小鼠在新环境中的焦虑程度和自主活动能力,以及空间学习和记忆能力;记录海马CA1区场兴奋性突触后电位和高频强直电刺激诱导的长时程增强;酶联免疫吸附试验检测海马组织可溶性Aβ42表达变化。结果与对照组相比,3×Tg-AD组小鼠旷场实验结果无明显改变（均P〉0.05）,定位航行实验第3~5天逃避潜伏期延长（P=0.001,0.003,0.001）,空间探索实验穿越平台区时间百分比降低（P=0.000）,海马CA1区高频强直电刺激诱导的长时程增强下降（均P〈0.01）,海马组织可溶性Aβ42表达水平升高（P=0.000）。结论 4月龄3×Tg-AD小鼠海马组织可溶性Aβ42表达上调,导致海马CA1区突触可塑性受损,出现空间学习和记忆能力下降。

参乌胶囊抑制阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-淀粉样肽生成的机制研究

目的 观察中药新复方参乌胶囊对β-淀粉样肽前体蛋白（APP）转基因小鼠脑内β-淀粉样肽（A11）代谢及β-和γ-分泌酶的影响。方法 APP转基因小鼠从4～10月龄灌胃给予参乌胶囊。用免疫组织化学法观察APP、Aβ、β位点剪切酶（BACE）和早老蛋白1（PS-1）的表达，并进行图像分析。结果 10月龄APP转基因小鼠模型组与同月龄正常对照组相比，脑内海马区APP、Aβ和PS-1（为γ-分泌酶的催化部位）的表达明显增多，而BACE（即β-分泌酶）的变化不明显。参乌胶囊能明显减少APP转基因小鼠脑内海马区APP的表达，减少脑内All的产生，抑制BACE和PS-1的表达。结论 参乌胶囊抑制脑内All的产生可能是通过减少APP含量及抑制β-和1-分泌酶而起作用的。

知母乙醇提取物对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响

目的:探讨知母乙醇提取物对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响。方法:腹腔注射D-半乳糖和亚硝酸钠制备小鼠阿尔茨海默病模型,灌胃给予知母乙醇提取物后用水迷宫观察小鼠学习记忆能力,测定脑组织中乙酰胆碱酯酶和血清超氧化物歧化酶活性。结果:知母乙醇提取物能明显减少错误次数(P<0.05)、降低脑组织内乙酰胆碱酯酶活性(P<0.01)、提高血清SOD活性(P<0.01)。结论:知母乙醇提取物能预防和改善阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆减退,其机制可能与其降低脑组织内乙酰胆碱酯酶活性和提高血清SOD活性有关。

新型Rho激酶抑制剂FSD-C10对阿尔茨海默病模型小鼠的神经保护作用

目的:探讨新型Rho激酶抑制剂FSD-C10对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型小鼠的神经保护作用。方法:20只8月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为AD模型组和FSD-C10治疗组,每组10只,分别经腹腔注射生理盐水和FSD-C10(25 mg·kg^-1·d^-1),持续治疗2个月;10只同月龄同性别野生型小鼠作为对照组。应用莫里斯水迷宫实验及SMART 3.0行为学系统记录并分析各组小鼠空间认知功能;免疫荧光组织化学染色法检测小鼠脑组织中β-淀粉样蛋白(Aβ)、磷酸化tau蛋白(p-tau)及突触相关蛋白[包括突触小泡蛋白(synaptophysin)、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸受体(AMPAR)和突触后致密区蛋白95(PSD-95)]的分布与表达;Western blot技术检测小鼠脑组织中第668位苏氨酸磷酸化的淀粉样前体蛋白[p-APP(Thr668)]、β位点APP剪切酶1(BACE1)及突触相关蛋白的表达。结果:与AD模型组比较,FSD-C10治疗组APP/PS1双转基因小鼠认知功能得以显著改善,中枢神经系统Aβ沉积明显降低,Tau蛋白数量减少,同时p-APP(Thr668)的水平增加,BACE1蛋白的表达下降,小鼠脑组织中突触相关蛋白synaptophysin、AMPAR和PSD-95的表达水平增加。结论:新型Rho激酶抑制剂FSD-C10具有神经保护作用,其机制可能通过促进APP/PS1双转基因小鼠脑内APP蛋白向非淀粉样途径代谢,减少脑内Aβ寡聚体的生成,降低Aβ老年斑的沉积,减少tau蛋白的数量,也可能通过上调突触相关蛋白synaptophysin、AMPAR及PSD-95的表达,增强突触可塑性而发挥神经保护作用。

氟西汀对阿尔茨海默病模型小鼠的神经元保护作用

目的:研究氟西汀对老年APP/PS1双重转基因阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响及对神经元的保护作用。方法:实验分为动物实验和细胞实验。动物实验中取APP/PS1双重转基因小鼠随机分为氟西汀组(n=8)和生理盐水组(n=8),另取C57同窝生同月龄正常小鼠10只为对照组。氟西汀组小鼠给予氟西汀(10 mg/kg)腹腔注射,生理盐水组及对照组注射等量生理盐水1次/d,持续8周。Morris水迷宫实验进行行为学检测。Tunel染色检测海马区神经元凋亡。细胞实验中将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)培养48 h后分为正常组、Aβ组、氟西汀组和氟西汀+Aβ组,后3组分别在含10μmol/Lβ-淀粉样蛋白、100 nmol/L氟西汀和100 nmol/L氟西汀+10μmol/Lβ-淀粉样蛋白的DMEM中继续培养48 h。行原位细胞凋亡染色检测各组细胞凋亡。结果:水迷宫定位航行实验中,氟西汀组小鼠较生理盐水组相比平均潜伏期明显缩短(P<0.01);空间探索实验中跨越平台次数增加(P<0.01);海马区凋亡神经元数量减少(P<0.01)。细胞实验中,氟西汀组和氟西汀+Aβ组与Aβ组相比,凋亡细胞数量明显减少(P<0.01)。结论:氟西汀对神经元细胞有保护作用,能减少神经元的凋亡,长期服用氟西汀能显著改善APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆力能力。

阿尔茨海默病模型小鼠视网膜超微结构的改变

目的观察阿尔茨海默病(AD)模型小鼠视网膜各层细胞形态学改变。方法 6月龄AD模型小鼠及6月龄c57小鼠进行Morris水迷宫实验,检测小鼠的学习记忆能力。取小鼠眼球,制备成半薄切片,透射电镜下观察视网膜各层细胞形态学改变。结果 6月龄AD模型小鼠游行持续时间显著长于6月龄c57小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);AD模型小鼠游行的路径长度和穿越次数均显著大于c57小鼠,但差异无统计学意义(P>0.05)。AD模型小鼠的视网膜光感受器细胞、外核层细胞、内网状层、内核层多层结构存在退行性改变。6月龄的AD模型小鼠脑内并未出现老年斑,但已经出现了学习记忆能力的下降。结论 AD模型小鼠视网膜多层结构存在神经退行性改变,这种改变早于颅内老年斑的形成。

中药复方脑益康干预阿尔茨海默病模型小鼠脑组织神经生长因子及脑源性神经营养因子mRNA的表达

目的:观察中药复方脑益康对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织脑神经生长因子、脑源性神经营养因子mRNA表达的影响,。方法:①实验于2004-10/2005-03在南通大学基础医学院病理生理学实验室完成。②采用D-半乳糖和亚硝酸钠腹腔注射建立阿尔茨海默病小鼠模型,ICR小鼠120只,采用随机数字法分为6组,正常对照组,模型对照组,脑复康对照组[0.4g/(kg·d)],脑益康小、中、大剂量组[(2.4,7.2,24g/(kg·d)]。脑益康由制首乌、巴戟天等组成(南通市中医院制剂室制成颗粒剂,每克颗粒剂含生药1.98g)。模型对照组、各给药组腹腔注射10g/LD-半乳糖120mg/(kg·d)和10g/L亚硝酸钠90mg/(kg·d),连续60d,正常对照组腹腔注射等容量的生理盐水。脑益康和脑复康均以5g/L羧甲基纤维素钠配制灌胃,连续60d。③每组随机取6只小鼠,取脑组织,采用反转录-聚合酶链反应方法检测脑组织中脑神经生长因子、脑源性神经营养因子mRNA的表达。结果:①脑益康小、中、大剂量组脑神经生长因子mRNA的表达与正常对照组比较差异无显著性(1.05±0.25,0.83±0.46,0.99±0.46,1.12±0.22,P>0.05);脑益康小、中、大剂量组脑源性神经营养因子mRNA的表达与正常对照组比较差异无显著性(0.73±0.20,0.49±0.12,0.63±0.15,0.32±0.22,P>0.05)。②模型对照组脑神经生长因子mRNA、脑源性神经营养因子mRNA显著高于正常对照组(1.98±0.60比1.12±0.22,1.32±0.37比0.32±0.22,P<0.05)。③与模型对照组脑神经生长因子mRNA和脑源性神经营养因子mRNA比较,阳性药脑复康对照组、脑益康小、中、大剂量组表达明显减少(P<0.05)。结论:脑益康提高阿尔茨海默病小鼠学习记忆作用的部分机制与其保护胆碱能神经元、改善神经生长因子、脑源性神经营养因子的逆行运输有关。

appps1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内胶质细胞的激活及iNOS的表达

目的 研究 10～ 12月龄雌性app ps1双转基因阿尔茨海默病 (AD)模型小鼠 (app ps1,dtg)脑内小胶质细胞和星形胶质细胞的激活 ,以及诱导型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxide,iNOS)的表达。 方法 免疫组织化学结合刚果红组织学染色 ,普通光学显微镜观察。 结果 在app ps1dtg小鼠皮质和海马内有广泛的神经炎斑形成 ,围绕在神经炎斑周围的小胶质细胞和星形胶质细胞处于活化状态 ,且活化的星形胶质细胞表达iNOS。 结论 app ps1dtg小鼠能够模拟AD病人脑内的主要病理过程。神经胶质细胞的激活及iNOS的表达在app ps1dtg小鼠和AD脑内病理过程中具有重要的作用。

大蒜素对阿尔茨海默病模型小鼠脑内TNF-α表达的影响

本文应用免疫荧光、Western blot及Real-Time PCR等实验方法检测大蒜素对阿尔茨海默病模型小鼠脑内TNF-α表达的影响。结果发现,与对照组小鼠相比,模型组小鼠脑内TNF-α的阳性表达增加,提示在APP/PS1转基因小鼠脑组织中存在神经免疫炎症反应,而大蒜素处理组TNF-α表达明显低于模型组小鼠。基于此结果,说明大蒜素可以降低阿尔茨海默病模型小鼠脑内TNF-α的表达,提示大蒜素在阿尔茨海默病的抗炎临床治疗方面具有重要的理论意义。

阿尔茨海默病模型小鼠视网膜退行性变研究

目的探讨淀粉样体蛋白（APP）／早老素1（PS1）双转基因阿尔茨海默病（AD）转基闪小鼠视网膜是否存在退行性变。方法11月龄APP／PS1双转基因AD模型雌性小鼠6只，同月龄同背景非转基因雌性小鼠6只作为正常对照。完整取出左眼球做石蜡切片行Tunel检测，行视网膜凋亡细胞计数。结果视网膜凋亡细胞计数：对照组与模型组视网凋亡细胞数分别是每视野（6．0±1．7），（13．2±2．8）个；2组视网膜凋亡细胞比较，模型组视网膜凋亡细胞增加（P〈0．05）。结论APP／PS1双转基因AD模型小鼠视网膜细胞凋亡增加，而且主要发生在节细胞层。

原儿茶酸对阿尔茨海默病模型小鼠体内多靶向的疗效及机制研究

目的:研究原儿茶酸(PCA)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠体内多靶向治疗的疗效及机制。方法:采用D-半乳糖和三氯化铝(AlCl3)诱导AD动物模型,实验分为空白对照组、AD模型对照组、石杉碱甲组0.4 mg/(kg·d)以及PCA低剂量组5 mg/(kg·d)、PCA中剂量15 mg(kg·d)组和PCA高剂量30 mg/(kg·d)组,观察各剂量组小鼠Morris水迷宫逃避潜伏期的时间、原平台所在象限停留时间和病理变化,测定各组小鼠脑组织的AchE、Aβ、MAP、BDNF mRNA含量。结果:PCA低剂量组、PCA中剂量组小鼠的潜伏期时间短于AD模型(P<0.05),而其原平台所在象限停留时间均长于AD模型对照组(P<0.05);PCA各剂量组对AchE、Aβ和MAP mRNA表达量均低于AD模型对照组(P<0.05),且各组mRNA基本恢复正常水平;PCA各剂量组对BDNF mRNA表达量均高于AD模型对照组(P<0.05),且各组mRNA基本恢复正常水平。结论:PCA通过缩短潜伏期,延长原平台所在象限停留时间,降低AchE、Aβ和MAP mRNA表达水平,升高BDNF mRNA表达量等多靶向发挥神经营养作用。

从DHA代谢角度探讨当归芍药散治疗APP/PS1阿尔茨海默病模型小鼠的作用及机制

目的研究当归芍药散水提液(DSS)对APP/PS1阿尔茨海默病(AD)双转基因模型小鼠认知功能的影响,并从脑内二十二碳六烯酸(DHA)代谢及对DHA代谢信号通路神经炎症、氧化应激探讨DSS治疗AD的作用机制。方法选择6月龄APP/PS1双转基因小鼠,随机分为模型组、当归芍药散高、中、低剂量组以及阳性药组,选择同背景同月龄转基因阴性雄性小鼠作为正常对照组。当归芍药散组分别为1.6,3.2和6.4 g·kg-1。阳性药组(多奈哌齐)给药剂量为3 mg·kg-1。每天灌胃1次,连续给药1个月后开始行为学测试。行为学测试结束次日,小鼠称重,10%的水合氯醛腹腔注射麻醉,分离全脑并称重,采用液质联用技术对脑内未酯化的DHA进行含量测定;采用Western蛋白印迹法对DHA从细胞膜释放、代谢的酶i PLA2和15-LOX以及参与炎症介质释放、代谢的酶c PLA2,COX-1,COX-2,5-LOX和12-LOX蛋白表达量进行检测;ELISA测定炎症介质PGE2,TXB2和LTB4;试剂盒检测小鼠脑内抗氧化酶MDA,SOD,GSH和ROS。结果 Morris水迷宫定位航行结果提示:与正常组相比,同背景同月龄的APP/PS1模型组逃避潜伏期明显延长(P<0.05);阳性药组(P<0.05)以及DSS 1.6,3.2和6.4 g·kg-1组(P<0.01)可明显缩短AD模型小鼠的逃避潜伏期。Morris水迷宫空间探索结果提示:与对照组相比,模型组第一次穿越平台时间明显延长(P<0.01)、穿越平台次数明显减少(P<0.01);阳性药组、DSS 1.6,3.2和6.4 g·kg-1组可明显缩短AD模型小鼠第一次穿越平台的时间(P<0.01)、增加其穿越平台的次数(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,阳性药组、DSS1.6,3.2和6.4 g·kg-1组小鼠脑内未酯化的DHA含量明显增多(P<0.05);除DSS 1.6 g·kg-1外,阳性药、DSS 3.2和6.4 g·kg-1组可明显上调小鼠海马、皮质内15-LOX和i PLA2蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),下调参与炎症介质释放、代谢的酶c PLA2,COX-1,COX-2,5-LOX和12-LOX蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,阳性药组、DSS 1.6,3.2和6.4 g·kg-1组海马、皮质内的神经炎症介质PGE2,TXB2和LTB4明显减少(P<0.05,P<0.01),MDA和ROS明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性增加(P<0.05)。结论当归芍药散能改善APP/PS1双转基因AD模型小鼠的学习记忆障碍,改善血脂水平,能提高AD模型小鼠海马、皮质内未酯化DHA的含量并且上调DHA经酶代谢产生NPD1有关到15-LOX和i PLA2蛋白的表达,减少神经介质PGE2,TXB2和LTB4的生成,并且下调与神经介质生成有关的c PLA2,5-LOX,12-LOX,COX-1和COX-2蛋白的表达,并且还能改善AD模型小鼠脑内的氧化应激状态。

不同β-淀粉样蛋白抗体含量的IVIG对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能干预效果初探

目的 探讨市售不同β-淀粉样蛋白(Aβ)抗体含量的静注免疫球蛋白(IVIG)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠认知功能的干预效果。方法 选取市售的国内8个不同血液制品公司的IVIG(IVIG1~8),酶联免疫吸附(ELISA)法检测其Aβ_(40/42)抗体含量后,按高、中、低分为3种Aβ_(42/40)抗体水平的IVIG做动物干预实验:将40只3月龄三转基因AD(3xTg-AD)小鼠随机均分为4组,雌雄各半,实验组(实验组1~3)分别腹腔注射高、中、低3种Aβ_(42/40)抗体水平IVIG(1 g·kg^(-1)剂量、2次/周,持续12周),对照组等量生理盐水腹腔注射。注射24次后立即利用小鼠行为学分析系统对4组小鼠做认知行为学检测及分析。结果 8种国内不同厂家生产的IVIG Aβ抗体含量(μg/mL)差异较大,Aβ_(40)单体抗体为0.7±0.05~3.1±0.05、Aβ_(40)寡聚体抗体为11.7±0.7~32.0±2.2、Aβ_(42)单体抗体为1.8±0.1~27.9±0.3、Aβ_(42)寡聚体抗体为2.3±0.1~49.4±2。从高、中、低Aβ_(42/40)抗体水平的IVIG中各选择1种(IVIG-1、IVIG-8、IVIG-6)分别注射给3个实验组小鼠;不同IVIG干预后实验组1~3组与对照组小鼠认知行为检测分析:旷场试验中进入中心区域时间(s)分别为0.5±0.9、23.4±6.1(P<0.01)、4.6±2.8、2.6±2.3,粪便数量(粒)分别为1.6±0.7、1.2±0.4、2.4±0.5、3.8±0.8(P<0.01);新物体识别试验:探索新物体分值分别为71.3±29.5、71.8±20.5、75.9±26.9、25.6±23.7(P<0.05);巴恩斯迷宫试验:实验组2与对照组小鼠探索目标洞时间(min)在d6为(50.3±19.3 vs 21±14.6(P<0.05)、d13为58.2±20.9 vs 19.2±15.9(P<0.05),其他各实验组与对照组相比无明显变化。结论 目前市售的产自国内的IVIG制品的Aβ_(40)/_(42)抗体水平存在明显差异;3月龄3xTg-AD小鼠经过其连续干预3个月后,认知功能均有所改善,改善效果与IVIG中Aβ抗体有关,但与抗体浓度不呈正相关。

烟碱不同给药途径对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力下降改善作用差异的研究

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是一种与年龄高度相关的、以进行性认知障碍和记忆力损害为主的中枢神经系统退行性疾病,患者典型病理学改变为β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)异常沉积形成的老年斑(senile plaques,SP)、神经元纤维缠结(neurofibrillary tangle,NFT)等,并伴有神经元减少以及基底前脑核海马区胆碱能神经元蜕变[1].AD患者主要临床表现为记忆力、判断力、抽象思维等一般智力的丧失以及睡眠障碍[2].

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-淀粉样前体蛋白基因表达影响研究

目的:探讨黄连解毒汤对APP/PS1双转基因阿尔茨海黙病模型小鼠脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达的影响。方法:选用3月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠,随机分为空白对照组(CMC组)、西药安理申对照组(阳性对照组)、黄连解毒汤大剂量组(大HLJDT组)、黄连解毒汤中剂量组(中HLJDT组)、黄连解毒汤小剂量组(小HLJDT组),连续灌胃给药6个月后,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察各组APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-APP基因表达情况。结果:CMC组小鼠β-APPmRNA表达量较西药安理申组明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),黄连解毒汤各剂量组小鼠β-APPmRNA表达量较CMC组明显降低(P<0.05),其中中剂量组小鼠β-APPmRNA表达量与西药安理申组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:各剂量黄连解毒汤均能降低APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因表达,其中中剂量组降低效果明显优于西药安理申。