尿脂阿拉伯甘露聚糖检测在HIV阴性活动性结核病诊断中的应用及效果

目的探讨最新检测方法尿脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)检测(化学发光法)对HIV阴性活动性结核的诊断价值。方法连续性纳入2022年10月至2022年12月在北京胸科医院结核病科就诊的疑似结核病患者113例,其中,28例疑似但确诊为非结核病患者作为非TB组(对照组),85例确诊结核病患者作为TB组(病例组)。在治疗前收集尿液样本进行LAM抗原检测,并收集临床痰液进行抗酸染色涂片法、MGIT960痰培养法和GeneXpert法检测的实验室资料。以临床诊断为参考标准,评价4种方法对检测活动性结核病的诊断效能。结果以临床综合诊断为标准,痰Gene Xpert诊断结核病的灵敏度最高,并且诊断结果与临床诊断结果一致性最高(Kappa>0.4),其次为MGIT960培养;而尿LAM的灵敏度较低,漏诊率较高,并且临床诊断的一致性较低(Kappa<0.4),临床应用价值较低。以LAM检测为基础,与其他检测方法并联试验的诊断结果显示,LAM检测与痰Gene Xpert联合的敏感度最高,并且较单独使用有较大提升,而且诊断结果与临床结果有较高的一致性(Kappa>0.70),具有临床应用价值。结论单独使用AM检测诊断结核病的价值较低,但与痰Gene Xpert并联联合诊断,可提高诊断敏感度,并且诊断结果与临床结果有较高的一致性,具有临床应用价值。

尿液脂阿拉伯甘露聚糖在HIV阴性肺结核患者中的诊断效能评价

据统计,2021年全球约有1060万例结核病新感染病例,其中141.3万人死于结核[1]。中国的新发病例数为78万,形势非常严峻[2]。传统的病原学检测方法如抗酸染色涂片镜检、BACTEC MGIT 960培养(MGIT 960)、Gene Xpert MTB/RIF(Xpert)虽是肺结核(pulmonary tuberculosis,PTB)病原学诊断的“金标准”,但存在灵敏度低,培养周期长等缺点[3]。

脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)在结核病诊断中的应用

脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomannan,LAM)是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)细胞壁的组成成分,是一种糖脂,可使巨噬细胞失活,并清除氧化自由基。LAM存在于结核病患者的尿液、血清和肺部,因此人们开发了以LAM作为生物标志物的床旁检测(point-of-care-testing,POCT)方法,以减少诊断延迟,及时采取相应干预治疗措施阻断结核病传播。与检测单纯结核病患者相比,LAM检测技术对于诊断晚期免疫缺陷和CD4细胞计数低的艾滋病病毒(HIV)感染相关结核病患者具有更好的敏感性,对于这部分患者以及无法产生痰液的儿童、重症结核病患者等具有较好的应用价值。本文通过介绍LAM的结构、功能及其在结核病诊断中的应用研究进展,以期为未来结核病防控提供参考和思路。

胸水中脂阿拉伯甘露聚糖抗原检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨胸水中的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原对结核性胸膜炎的诊断价值,以获取一种诊断结核性胸膜炎的辅助指标。方法收集胸水标本共96例,其中结核性胸膜炎46例,非结核性胸膜炎50例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胸水中的LAM抗原。结果结核性胸膜炎胸水中LAM抗原阳性率为54%,非结核性胸膜炎胸水中LAM抗原阳性率为22%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸水中LAM抗原检测可作为结核性胸膜炎诊断的一项新指标。

结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及活性初步鉴定

目的：提取纯化结核分枝杆菌（MTB）脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）。方法：MTB菌体彻底破碎后，去脂，去蛋白，上清液经苯酚萃取，酒精沉淀，得到LAM；以提取的LAM作为包被抗原检测血清中的LAM抗体。结果和结论：提取到LAM抗原，免疫印迹表明，LAM迁移范围相对分子质量为25x10^3-40x10^3，主要集中在35x10。处。在64例肺结核患者中，有43例LAM-ELISA检测阳性（敏感性为67．19％）；在67例健康志愿者中，有64例LAM-ELISA检测阴性（特异性为95．52％）。

采用尿液检测脂阿拉伯甘露聚糖指导抗结核药物治疗对HIV住院患者死亡率影响的即时分析：一项实用、平行分组、多中心、开放、随机对照的临床试验

研究背景艾滋病（AIDS）并发结核病（TB）诊断困难并导致高死亡率。常见的TB诊断方法包括x射线胸部透视和痰液MTB检测（包括显微镜下检测和核酸扩增）。但AIDS并发TB的患者常表现为肺外结核，痰液少，一些替代性方法（如痰液诱导，或其他侵入式取痰方法）也很难实施，

抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖ELISA的建立及其临床应用

目的提取纯化结核分枝杆菌(MTB)脂阿拉伯甘露聚糖(LAM),建立抗LAM抗体(LAM-IgG)检测的酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法 MTB菌体彻底破碎后,去除蛋白、脂质、核酸,得到粗制的脂多糖。经Sephacryl-100凝胶过滤层析分离纯化,得到LAM。以该LAM作为间接ELISA的包被抗原来检测血清中的LAM抗体。结果所得LAM经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)银染,与对照标准品大小一致,为37 000。115例肺结核患者LAM抗体阳性率71.3%;92例非结核肺部疾病患者假阳性率11.9%;188名健康体检者假阳性率3.2%。敏感性71.3%,特异性93.9%。结论本研究成功提取到LAM抗原,此抗原可作为间接ELISA的包被抗原用于结核抗体的检测。

血清抗脂阿拉伯甘露聚糖及38kDa抗体的检测对涂阴肺结核及肺外结核诊断价

目的 评估血清抗脂阿拉伯甘露聚糖３８ｋＤａ抗体（ＬＡＭ－３８ｋＤａ－ＩｇＧ）检测对涂阴肺结核和肺外结核的诊断价值。方法 采用斑点免疫金渗滤法检测５７例涂阴肺结核，５２例肺外结核，３２例涂阳肺结核，２９例肺癌患者及３３例正常人血清中的ＬＡＭ－３８ｋＤａ－ＩｇＧ。结果 涂阴肺结核组ＬＡＭ－３８ｋＤａ－ＩｇＧ阳性率为７３．７％，其中痰结核杆菌涂（－）培（＋）组为８４．６％，涂（－）培（－）组为７０．５％；肺外结核组阳性率为７１．２％；涂（＋）肺结核组阳性率９３．８％；肺癌组假阳性率３１％；健康组假阳性率９．１％。结论 提示血清ＬＡＭ－３８ｋＤａ－ＩｇＧ测定对涂阴肺结核和肺外结核有一定的辅助诊断价值。

脂阿拉伯甘露聚糖诊断结核性脑膜炎的评价

目的评价分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)的诊断价值并给出受试者工作特征曲线(ROC)。方法应用斑点金免疫渗滤技术平行检测结核性脑膜炎(TBM)及非结核性神经精神系统疾病血清(Serum)和脑脊液(CSF)中抗LAM抗体。Serum稀释25倍,CSF分别按1、2、4、8、16、32倍稀释。进行抗LAM抗体检测。结果Serum敏感性(Sencitivity,Se)为96.9%,特异性(Specificity,Sp)58.3%。CSF在稀释倍数为12、4、、8、163、2时Se分别为93.6%,90.6%,56.3%,37.5%,12.5%,3.1%,Sp分别为83.3%、95.8%、95.8%、100%、100%、100%。最佳截切值(Cut-Off)为2倍稀释。统计分析表明,CSF在2倍稀释时其Se与Serum无显著性差异,但Sp有显著性差异。结论应用斑点金免疫渗滤技术检测抗LAM抗体诊断价值较高。

检测尿液脂阿拉伯甘露聚糖对结核病诊断价值的荟萃分析

目的荟萃分析检测尿液脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)对结核病的诊断价值。方法收集有关研究检测尿液LAM诊断结核病的文献,计算纳入研究的合并敏感度、特异度等指标,绘制综合受试者工作特征曲线并计算曲线下面积。结果共纳入12篇文献,LAM诊断结核病的合并敏感度为0.53,95%可信区间(CI)为(0.51,0.56);合并特异度为0.91,95%CI为(0.90,0.92);合并阳性似然比为6.28,95%CI为(4.11,9.61),合并阴性似然比为0.50,95%CI为(0.36,0.69);合并诊断优势比为14.84,95%CI为(7.94,27.74)。SROC曲线下面积为0.85。结论检测尿液LAM对结核病具有一定的诊断价值,可作为重要的结核病诊断指标。

早期分泌性抗原靶6、脂阿拉伯甘露聚糖诊断结核性脑膜炎的价值

目的探讨早期分泌性抗原靶6(Esat6)、脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)检测在结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(Elisa法)检测结核性脑膜炎患者(结脑组,20例)、非结核性脑膜炎患者(非结脑组,20例)和对照组(以头痛为主诉者,20例)脑脊液及血清中Esat6和LAM含量,并进行比较。结果结脑组患者脑脊液、血清中的Esat6及LAM含量均明显高于非结脑组和对照组(均P<0.05);非结脑组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结核性脑膜炎患者脑脊液及血清中Esat6与LAM水平存在显著相关性(r=0.961,r=0.894,均P<0.05)。结论脑脊液、血清中Esat6和LAM检测可作为结核性脑膜炎的辅助诊断指标。

结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖尿检用于儿童结核病诊断的研究进展

结核病(tuberculosis,TB),特别是儿童结核病,仍是影响全球健康的重要因素。由于传统的结核病诊断技术灵敏度、特异度较差,结核病病例常因为无法得到准确、及时的诊断而被延误治疗。儿童结核病病灶含菌量低,且患儿常无法咳出痰,因此,儿童结核病诊断较成人结核病诊断更具有挑战性。脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomannan,LAM)是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)细胞壁上的特异性抗原,可以在结核患者的尿液标本中检测到,尿LAM检测有助于快速、准确地诊断结核病。本综述旨在总结LAM检测用于儿童结核病诊断的研究进展。

菌阴性肺结核诊断评分系统联合血清抗脂阿拉伯甘露聚糖抗体对菌阴性肺结核的临床诊断价值

目的探讨菌阴性肺结核诊断评分系统联合血清抗脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗体诊断菌阴性肺结核的临床价值。方法将396例疑似菌阴性肺结核患者根据病理学诊断结果分为结核组(n=200)和非结核组(n=196),均进行菌阴性肺结核诊断评分系统评分及血清抗LAM抗体检测,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析菌阴性肺结核诊断评分系统、抗LAM抗体单独应用及二者联合应用诊断菌阴性肺结核的价值。结果菌阴性肺结核诊断评分系统单独诊断菌阴性肺结核的灵敏度为60.00%,特异度为95.92%,ROC曲线下面积为0.832;抗LAM抗体单独诊断菌阴性肺结核的灵敏度为69.00%,特异度为65.82%,ROC曲线下面积为0.779;菌阴性肺结核诊断评分系统联合抗LAM抗体诊断菌阴性肺结核的灵敏度为84.00%,特异度为86.22%,准确率为85.10%,ROC曲线下面积为0.906。菌阴性肺结核诊断评分系统和抗LAM抗体联合检测诊断菌阴性肺结核的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积均高于二者单独诊断(均P<0.05)。结论菌阴性肺结核诊断评分系统联合血清抗LAM抗体可提高诊断菌阴性肺结核的灵敏度,并保持较高的特异度,对菌阴性肺结核的诊断有重要的临床价值。

基于尿液的脂阿拉伯甘露聚糖抗原检测对肺结核的诊断价值

目的分析尿液的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原检测方法对肺结核患者的诊断价值,为尿液LAM抗原试剂盒在中国地区的推广提供依据。方法2023年3—5月,前瞻性收集首都医科大学附属北京胸科医院诊治肺部疾病患者228例[男134例,女94例,年龄20~82(44.8±16.7)岁],其中肺结核患者143例,非结核病患者85例。收集所有患者的痰标本和尿液,进行传统病原学检测和尿液LAM抗原检测,分析各检测阳性组合的筛查结果,并通过卡方检验等统计学方法对结果进行进一步分析。结果尿液LAM试剂盒的检测敏感度为46.2%(95%CI:37.9%~54.7%),检测特异度为96.5%(95%CI:89.3%~99.1%),总体符合率为64.9%。联合应用尿液LAM抗原检测和结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert)两种方法检测阳性样本的检出率(60.8%,87/143)高于单独应用Xpert检测阳性样本的检出率(49.7%,71/143),差异有统计学意义(P<0.05)。风险因素分析结果表明,尿液LAM抗原检测结果阴性的风险随着细菌载量的降低而增加。结论尿液LAM抗原检测方法特异度高,与传统病原学联用可有效提高检出率。尿液LAM抗原检测法仍具有受细菌载量影响和区分非结核分枝杆菌样本能力不强等局限性,需进一步试验验证。

脂阿拉伯甘露聚糖抗原检测用于艾滋病病毒感染者和艾滋病患者结核病诊断的研究进展

结核病是艾滋病病毒感染者和艾滋病患者(people living with HIV/AIDS,PLWHA)死亡的主要原因,给其带来巨大的疾病负担,在PLWHA人群中早期筛查结核病,是降低传播、控制其病情发展的关键举措。脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomannan,LAM)是MTB的糖脂,可以在结核患者尿液中检测到,LAM有助于快速、准确诊断结核病。本文综述了LAM及其在PLWHA诊断中的应用与局限性,希望为PLWHA结核病的诊断提供参考依据。

龟分枝杆菌脂葡聚糖对人角膜上皮细胞IL-8和IL-6表达的影响及其信号转导通路

目的:研究龟分枝杆菌细菌壁内脂葡聚糖对人角膜上皮细胞IL-6和IL-8表达的影响及其可能信号转导通路。方法:提取龟分枝杆菌细菌壁内脂葡聚糖作用于原代培养人角膜上皮细胞(human corneal epithelia,HCE)。实验分为实验组(脂葡聚糖样品处理组)、阳性对照组(LPS处理组)和空白组。脂葡聚糖处理后的0,6,12h各时间点采用RT-PCR法在mRNA水平检测实验组中IL-6和IL-8的表达水平;脂葡聚糖处理后的0,6,12,24h各时间点采用ELISA法在蛋白水平检测实验组、阳性对照组和空白组中IL-6和IL-8的表达。免疫细胞化学法检测空白组与实验组(时间点24h)HCE细胞内NF-κB的表达与定位。结果:实验组中,12h内IL-6和IL-8在mRNA水平明显增加,6h时即达到峰值(IL-6是空白组的32.7倍,IL-8是对照组的36.8倍);在蛋白质水平,培养上清内IL-6和IL-8含量在24h内呈现时间依赖性上升(6,12,24h各时间点与对照组之间均有统计学差异,P<0.05),与阳性对照组变化一致。空白组NF-κB定位于细胞浆内,实验组NF-κB被激活,移位至细胞核内。结论:龟分枝杆菌来源的脂葡聚糖可以促使人角膜上皮细胞过表达IL-6和IL-8,其信号转导通路可能是通过核转录因子NF-κB进行的。

结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖

结核杆菌细胞壁抗原一直是新型结核病疫苗、新诊断方法和抗结核新药物的研究靶标。近十几年来人们关注到一类菌壁糖脂——脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomannan,LAM)。LAM是细胞壁的主要成分,发挥重要的免疫效应,且在结核病诊断、治疗、预防方面有很高的研究价值。本文就LAM的结构、提取纯化方法、生物合成、功能、临床应用作一简要综述。