N^+注入诱变筛选阿拉伯糖利用缺陷型肌苷高产菌株

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HSD06为出发菌株发酵制备肌苷,注入不同剂量的N+离子束选育不能利用阿拉伯糖的突变株。结果表明低剂量和较低的致死率利于正突变株的筛选。当照射剂量为2×1014ions/cm2时,获得肌苷高产菌株B67,肌苷的摇瓶发酵产量为15.12g/L,比出发菌株提高了18.6%。

离子束诱变筛选SG^r和ara^-双突变肌苷高产菌

以枯草芽孢杆菌HSD060为出发菌株,注入不同剂量N^+离子束,定向筛选磺胺胍抗性(SG^r)或阿拉伯糖利用缺陷株(ara^-)单突变株,复筛得到产量提高显著的单突变株B13(SG^r)和B67(ara^-),肌苷的摇瓶发酵产量分别比出发菌株提高16.3%和20%。注入剂量为3×10^(15)ions/cm^2时,SG^r突变率较高:1×10^(16)ions/cm^2时,ara^-突变率较高;且发生SG^r突变的频率高于ara^-突变。再次以最适剂量分别对B13、B67菌株进行离子束诱变,筛选SG^r和ara双突变菌株,经复筛得到产量显著提高的双突变株B13-105、B13-5和B67-1,平均肌苷发酵产量比相应的单突变株分别提高23.5%、20.4%和23.1%。