电针“内关”穴抗心肌缺血损伤中下丘脑室旁核内阿片肽的作用

目的探讨电针“内关”穴抗心肌缺血损伤的作用机理。方法取清洁级日本大耳白兔40只,按随机数字表法分为模型对照组10只;纳络酮对照组10只;电针加脑脊液组10只;电针加纳络酮组10只。观察下丘脑室旁核(PVN)微量注射纳络酮后电针“内关”穴对心肌缺血家兔心肌超微结构、Ⅱ导联心电图及心肌细胞跨膜电位的影响。结果PVN纳络酮微量注射对正常家兔心肌功能无影响,对缺血心肌功能影响轻微,在结扎(缺血)60min时发挥一定的保护作用(P<0·05);电针“内关”穴对缺血心肌有明显的保护作用,该作用可被PVN注射纳络酮所削弱(P<0·05),但不能完全阻断。结论(1)PVN在电针“内关”穴抗心肌缺血效应过程中发挥了重要作用;(2)PVN内阿片肽参与介导了“内关”穴抗心肌缺血的针刺效应;(3)除PVN及其内阿片肽外,PVN内的其他递质和中枢其他核团也可能在电针“内关”穴抗心肌缺血效应中发挥作用。

基于μ阿片受体羧基端^(375)STANT^(379)磷酸化位点的多肽干预对吗啡介导的受体下游信号通路的影响

目的探讨基于μ阿片受体(MOR)羧基端^(375)STANT^(379)磷酸化位点的多肽TAT-Q368-T379干预,对μ阿片受体下游信号通路的影响。方法将HA-MOR质粒与pGloSensorTM-22F质粒共转染的HEK-293细胞分为空白组(A组)、DAMGO组(B组)、吗啡组(C组)、0.5×10^(-5)mol/L多肽TAT-Q368-T379与吗啡联用组(D组)、10-5mol/L多肽TAT-Q368-T379与吗啡联用组(E组)、2×10^(-5)mol/L多肽TAT-Q368-T379与吗啡联用组(F组),通过GloSensor cAMP生物传感器测定各组细胞中的cAMP含量。将MOR-C端标记Nanoluc的质粒以及β-arrestin2-N端标记EYFP的质粒共转染完成的HEK-293细胞分为空白组(G组)、DAMGO组(H组)、吗啡组(I组)、10^(-5)mol/L多肽TAT-Q368-T379与吗啡联用组(J组)、3×10^(-5)mol/L Cmpd101与吗啡联用组(K组),通过蛋白质相互作用分析法测定各组细胞MOR激动后对β-arrestin2的募集效应。将HA-MOR质粒转染完成的HEK-293细胞分为空白组(L组)、吗啡组(M组)、10^(-5)mol/L多肽TAT-Q368-T379与吗啡联用组(N组)以及3×10^(-5)mol/L Cmpd101与吗啡联用组(O组),通过细胞免疫荧光染色法检测各组细胞的受体平均荧光强度。结果GloSensor cAMP生物传感器检测结果显示,C~F组细胞EC_(50)值差异有显著性(F=13.12,P<0.05),其中D、E、F组EC_(50)值较C组均显著减小(P<0.05)。蛋白质相互作用分析法分析显示,I~K组细胞E_(max)值差异有显著性(F=185.95,P<0.05),其中J、K组E_(max)值较I组均显著减小(P<0.01)。细胞免疫荧光染色法染色结果显示,L~O组细胞表面受体荧光强度比较差异有显著性(F=17.46,P<0.05),其中与M组比较,N、O组细胞表面受体荧光强度均显著增高(P<0.01)。结论基于MOR羧基端^(375)STANT^(379)磷酸化位点设计的多肽TAT-Q368-T379可有效增强吗啡介导的MOR下游G蛋白信号通路的激活,减少吗啡介导的β-arrestin2招募,从而减少由吗啡介导的MOR的内吞。

内源性阿片样肽与癫癎

内源性阿片样肽是在中枢神经系统内及全身多处腺体内合成的小分子物质,它既是激素又是神经调质,具有广泛的神经生物学功能。其在中枢神经系统内不仅具有增加脑兴奋性及癫癎易感性的致癎作用,而且还具有降低神经系统兴奋性的保护性抗癎作用,其致癎和抗癎作用的失衡与兴奋性和抑制性氨基酸递质的失衡一起参与了癫癎的病理生理过程。

内啡肽,脑啡肽和其它阿片样肽在生理学和医学中的意义

【引言】英语endrophin(内啡肽),是由(end)ogenous(内源性)和m(orphin)e(吗啡)合成的,原指脑中具有与阿片(吗啡)类生物硷类似生物学作用的肽类。enkephalin(脑啡肽)一词则源出希腊字根(“头内”),专指也具有吗啡样作用的两种特异性五肽。dynorphin(强啡肽)亦来自希腊文(dyna 意为“强大”),指具有非同寻常的阿片样强烈作用的一类肽。以上命名的必要性和意义,将在本章论述中阐明。所有这些物质也被称为内源性阿片样肽(endogenous opioidpeptides)。

内源性阿片肽系统在快眼动睡眠剥夺所致大鼠内脏感觉降低中的作用

背景:内脏感觉过敏是功能性胃肠病的重要病理生理机制之一。快动眼(REM)睡眠剥夺可降低大鼠内脏感觉,但具体机制不清。目的:研究内源性阿片肽系统是否参与构成REM睡眠剥夺所致大鼠内脏感觉降低的机制。方法:24只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为实验对照组、睡眠剥夺组和睡眠剥夺加阿片受体拮抗剂纳洛酮干预组(纳络酮组)。采用花瓶技术制作REM睡眠剥夺大鼠模型。睡眠剥夺持续48h后行结直肠扩张,记录腹壁肌电图,观察疼痛感觉阈值,以反映内脏感觉功能的变化。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定大鼠结直肠和丘脑阿片受体μ、κmRNA表达的变化。结果:给予不同压力扩张刺激后,睡眠剥夺组腹外斜肌放电次数显著低于实验对照组,疼痛感觉阈值高于实验对照组(P<0.05);纳洛酮组放电次数显著高于睡眠剥夺组,疼痛感觉阈值低于睡眠剥夺组(P<0.05),与实验对照组相比则均无显著差异。与实验对照组相比,睡眠剥夺组结直肠阿片受体κmRNA表达上调(P<0.05),丘脑κ受体mRNA表达无明显变化,上述部位μ受体mRNA表达均无明显变化。结论:REM睡眠剥夺降低大鼠内脏感觉的作用与内源性阿片肽和阿片受体κ表达上调有关。

胎儿窘迫与孕妇静脉血及脐血中内源性阿片肽水平的关系(英文)

背景:内源性阿片肽是一类重要的介质与调质,参与机体多种生理和病理过程,其与新生儿脑病的关系受到广泛关注。目的:探讨内源性阿片肽与胎儿窘迫发生的关系。设计:以健康孕妇为研究对象,病例-对照的对比观察。单位:解放军第二军医大学长征医院妇产科病房。对象:选择在第二军医大学长征及长海医院住院分娩并符合纳入标准的正常妊娠健康孕妇40例(对照组)及发生胎儿窘迫的健康孕妇43例(胎儿窘迫组)。方法:采用放射免疫法测定40例对照组孕妇及胎儿窘迫组孕妇静脉血及其新生儿脐血中阿片肽(β-内啡肽、强啡肽A1-13和亮啡肽)的水平,同时行脐动脉血血气分析。主要观察指标:两组孕妇静脉血及脐血中内源性阿片肽的水平及相关性。结果:胎儿窘迫组新生儿脐血中β-内啡肽、强啡肽强啡肽A1-13和亮啡肽水平犤(453±68),(242±33),(498±68)ng/L犦明显高于对照组犤(251±39),(103±22),(322±40)ng/L犦(t=2.713,2.762,P<0.01;t=2.132,P<0.05)。脐动脉血血气分析:pH为7.0±0.1,氧分压为(1.7±0.6)kPa,二氧化碳分压为(8.9±0.7)kPa;其中β-内啡肽水平与脐血pH,氧分压呈显著负相关(r=-0.418,-0.437,P<0.01),与二氧化碳分压呈显著正相关(r=0.442,P<0.01);强啡肽A1-13水平与脐血pH及氧分压呈负相关(r=-0.337,-0.383,P<0.05),与二氧化碳分压呈显著正相关(r=0.346,P<0.05)。两组血浆中3种肽水平比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:内源性阿片肽参与了胎窘的病理过程与胎儿窘迫的发生发展密切相关,对胎儿出生后早期康复干预具有量化数据参考价值。

阿片受体介导心肌保护机制的研究

心肌阿片受体参与了缺血预处理对心脏的调节作用,阿片类物质通过激活心肌阿片受体能模拟缺血预处理对心脏的作用。心肌阿片受体的激活所产生的早期时相和后时相心肌保护作用的信号途径涉及G i/G o、蛋白激酶C、酪氨酸激酶和ATP敏感钾离子通道等途径。在心脏外科手术或者冠心病等心脏病的治疗中应用阿片受体激动剂,并尝试联合其他心肌保护药物如莨宕碱类药物来保护心脏必将成为临床心肌保护的趋势和重要组成部分。

孤啡肽鞘内注射对创伤大鼠免疫功能的影响

目的:观察鞘内注射孤啡肽(orphanin-FQ,OFQ)对创伤大鼠免疫功能的影响。方法:分别给正常及创伤大鼠鞘内注射0.1、1.0、5.0、10.0、20.0#gOFQ及生理盐水(NS),用3H-TdR释放法测定各组大鼠脾脏自然杀伤细胞(NK细胞)活性,并进行对比分析。结果:正常大鼠鞘内注射OFQ0.1、1.0μg后,大鼠NK细胞活性与NS组相比无明显差异,而鞘内注射5、10、20μgOFQ后,NK细胞活性明显降低(P<0.05),提示鞘内注射较小剂量OFQ对正常大鼠NK细胞活性无明显影响,而较大剂量的OFQ则具有免疫抑制作用。创伤应激的大鼠鞘内注射NS,OFQ0.1、1.0、5.0、10.0μg,结果显示NK细胞活性均明显降低(P<0.05),注射20μgOFQ后,其NK细胞活性明显低于NS组和创伤组,提示创伤大鼠鞘内注射较小剂量和较大剂量OFQ均具有免疫抑制作用,而较大剂量OFQ则可以加强创伤引起的免疫抑制。结论:脊髓OFQ在正常大鼠和创伤应激大鼠都具有免疫调节效应。

μ阿片受体外显子7在大鼠内啡肽-2镇痛效应中的作用

目的 评价μ阿片受体外显子7在大鼠内啡肽-2镇痛效应中的作用.方法 取鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠24只,体重220～260 g,采用随机数字表法分为3组（n=8）：生理盐水对照组（C组）、阴性siRNA对照组（N-siRNA组）和μ阿片受体外显子7-siRNA组（E7-siRNA组）.C组鞘内注射生理盐水30μl,N-siRNA组鞘内注射阴性siRNA质粒20μ1＋lipofectamine 2000脂质体10μg,E7-siRNA组注射μ阿片受体外显子7-siRNA质粒20 μl＋lipofectamine 2000脂质体10μl,1次/d,连续3d.于第4天时（基础状态）测定机械痛阈,痛阈测定结束后lh时,鞘内注射内啡肽-2 10 μg.分别于给予内啡肽-2后5、20、40和60 min时测定机械痛阈,计算镇痛效应百分比.结果 3组间基础机械痛阈比较差异无统计学意义（P＞0.05）.与C组比较,N-siRNA组给予内啡肽-2后各时点镇痛效应百分比差异无统计学意义（P＞0.05）,E7-siRNA组给予内啡肽-2后5和20 min时镇痛效应百分比降低（P＜0.01）.结论 μ阿片受体外显子7参与了大鼠内啡肽-2的镇痛效应.

针刺对脑—心卒中患者血中内皮素、一氧化氮含量影响的动态观察

目的:探讨针刺治疗急性脑卒中引发心脏损伤的机制,观察不同腧穴组方的疗效差异。方法:将100例急性脑卒中引发心脏损伤患者随机分为2组,针刺现察组50例,针刺对照组50例。观察治疗前、后2周急性脑卒中引发心脏损伤患者血浆ET、血清NO含量的变化。结果:急性脑卒中引发心脏损伤患者血浆ET、血清NO含量显著高于健康对照组。针刺观察组治疗1周、2周后,血浆ET、血清NO含量明显降低,其改善程度明显优于对照组。结论:针刺可良性调整急性脑卒中引发心脏损伤患者血中ET、NO水平,维持神经内分泌体液平衡,保护受损心肌,并且不同的选穴组方,其疗效有显著的差异。

电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠NO、ET及CGRP的影响

目的:探讨电针"丰隆"穴对高脂血症大鼠血脂的调节作用及作用机制。方法:将80只Wistar大鼠随机分为正常组(喂基础饲料)、模型组(喂高脂饲料)、电针组(喂高脂饲料+电针"丰隆")、西药组(喂高脂饲料+普伐他汀钠灌胃)。检测各组大鼠治疗前后血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)以及降钙素基因相关肽(CGRP)的含量变化。结果:①与正常组比较,模型组大鼠体重、TC、TG、LDL-C、ET水平显著升高(P<0.01,P<0.05),HDL-C、NO和CGRP水平明显降低(P<0.05)。②与模型组比较,西药组、电针组大鼠体重、TC、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.01),NO和CGRP水平显著升高(P<0.01,P<0.05)。③与电针组比较,西药组HDL-C水平显著升高(P<0.01),ET水平降低但两组之间差异没有显著性意义(P>0.05)。结论:①电针组和西药组均对高脂血症大鼠TC、TG、LDL-C、NO以及CGRP具有较好的良性调节作用,并可在一定程度上降低ET水平。

耳针、中药对糖尿病大鼠CGRP、ET的影响

目的 :研究耳针、中药对糖尿病大鼠血浆降钙素基因相关肽 (Calcitoningenerelatedpep tide ,CGRP)、内皮素 (Endothelin ,ET)等的影响。方法 :利用链脲佐菌素 (STZ)诱发的糖尿病大鼠接受耳针、中药治疗 14周后 ,放免法测定血浆CGRP、ET等指标。结果 :与正常组相比糖尿病大鼠血浆CGRP、ET水平明显升高 ,而耳针、中药治疗后明显降低。结论 :耳针、中药防治糖尿病微血管病变的一种可能机制是良性调整血浆CGRP、ET水平。

头穴透刺对急性高血压性脑出血患者血浆ET、CGRP的影响

目的探讨头穴透刺治疗急性脑出血的作用机制。方法将60例急性脑出血患者随机分为头穴透刺组(30例)和西药对照组(30例)。两组基础疗法相同,头穴透刺组再加患侧百会透太阳针刺治疗,比较两组治疗前后血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平的变化。结果头穴透刺组治疗14d后血浆ET水平明显低于西药对照组(P<0·01),血浆CGRP水平明显高于西药对照组(P<0·01)。结论头穴透刺对急性脑出血患者血浆ET、CGRP水平有明显良性调节作用。头穴透刺是通过调节脑出血患者ET、CGRP异常水平来达到治疗目的,从而改善患者的预后。

针刺对原发性高血压病的疗效及其对血浆内皮素的影响

方法：将６０例符合ＷＨＯ原发性高血压病诊断标 准的患者随机分为２组，每组各３０例。治疗组采用单纯针刺疗法，取穴为双侧行间、风池 ，每日治疗１次；对照组口服复方降压片１片，每日３次。分别于首次治疗前及１５天以后取血 ，测定血浆内皮素。结果：治疗组治疗１５天后血浆内皮素水平明显下降 ，与治疗前及对照组治疗后比较，差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）。

电针对实验性糖尿病大鼠血糖和血脂蛋白(a)的调控作用(英文)

背景:许多研究结果证明电针可以引起内源性阿片肽系统的变化。目的:观察电针治疗后糖尿病大鼠模型血糖及脂蛋白(a)的变化,探讨阿片系统在电针治疗糖尿病中的作用。设计:以实验动物为观察对象的随机对照实验。单位:山东大学医学院病理生理学教研室。材料:实验于2004-07/12在山东大学医学院病理生理学教研室完成。选用140只雄性Wistar大鼠。方法:随机选取10只Wistar大鼠做空白对照组。剩余130只大鼠腹腔注射20g/L链脲霉素溶液50mg/kg,空白对照组腹腔注射等量生理盐水。3周后,断尾取血测餐后2h血糖,有明显糖耐量减退者给予高热量饲料饲养28d,为模型大鼠。造模成功64只。随机分为3组,即模型对照组(20只),电针治疗组(22只),电针加纳络酮组(22只)。治疗后,检测血糖及血脂蛋白(a)。主要观察指标:经治疗后各组大鼠的血糖和脂蛋白(a)变化。结果:74只大鼠进入结果分析。电针能够明显降低链脲霉素所致糖尿病大鼠血糖及血脂蛋白(a)水平。而注射纳络酮的大鼠对电针反应不敏感犤治疗后模型对照组、电针治疗组、电针加纳络酮组的血糖值分别为(13.91±3.79),(10.33±2.36),(12.96±2.23)mmol/L;脂蛋白(a)值分别为(13.75±2.69),(10.81±2.96),(13.01±3.23)mg/L犦。结论:电针治疗可以有效的降低糖尿病大鼠血糖水平和降低糖尿病大鼠的动脉硬化危险因子血脂蛋白(a)。虽然无法从经络的角度明确解释其机制,但根据纳络酮干预后电针治疗时大鼠血糖及脂蛋白(a)已不产生干预作用的实验结果,可以推测针刺是通过阿片肽系统而发挥对血糖和血脂蛋白(a)的干预效果。

炎症局部注射β-EP和LEK抗血清对电针镇痛效果的影响

目的 :为了进一步探讨 β-内啡肽 ( β- EP)和亮脑啡肽 ( L EK)在电针 ( EA)对炎症痛镇痛中的作用机制 ,观察了佐剂性关节炎 ( AA)大鼠炎症局部注射 β- EP和 LEK抗血清对电针镇痛效果的影响。方法 :动物用 Freund's完全佐剂造模后分为对照组、EA组、β- EP抗血清组和 L EK抗血清组 4组 ,除对照组外 ,其余 3组给予 EA治疗 ,实验第 7d处理和治疗前 1 5 min在各组动物炎症局部分别注射生理盐水 (对照组和 EA组 )和 β- EP抗血清及 L EK抗血清 0 .1 ml,处理和治疗后以辐射热灯照射炎症局部引起动物热痛缩腿反应的潜伏期来判定痛阈。结果 :EA组的痛阈明显高于对照组 ( P<0 .0 1 ) ,β- EP抗血清组和 LEK血甭组的痛阈均低于 EA组 ( P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 ) ,β- EP抗血清组的痛阈低于LEK抗血清组 ( P<0 .0 5 )。结论 :炎症局部的 β- EP在

吗啡对体外培养人子宫内膜基质细胞ERmRNA表达的影响

目的 研究吗啡对体外培养的人子宫内膜基质细胞的雌激素受体信使核糖核酸 (ERmRNA)表达的影响。方法 体外分离培养人子宫内膜腺上皮细胞和基质细胞 ,并通过免疫细胞化学的方法进行鉴定 ;将基质细胞给予 17 β雌二醇或吗啡及纳洛酮干预 ,通过RT PCR的方法半定量分析吗啡对基质细胞ERmRNA表达的影响。结果 雌激素上调基质细胞ERmRNA的表达 ,吗啡作用 2 4h ,呈剂量依赖性抑制基质细胞ERmRNA的表达 ,r =- 0 .94 6 (P <0 .0 5 )。结论 外源性阿片类药物吗啡抑制基质细胞雌激素受体mRNA的表达。

盐酸纳美芬联合电针刺激治疗急性脑损伤患者的临床效果及其对血清D-二聚体、内源性阿片肽水平的影响

目的分析盐酸纳美芬联合电针刺激治疗急性脑损伤患者的临床效果及其对血清D-二聚体、内源性阿片肽水平的影响。方法选取2013—2018年江阴市中医院治疗的急性脑损伤患者91例,采用随机数字表法分为对照组(n=45)和观察组(n=46)。两组患者均给予常规治疗,对照组患者给予盐酸纳美芬治疗,观察组患者给予盐酸纳美芬+电针刺激治疗;两组患者均连续治疗2周。比较两组患者临床效果,治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、血肿体积、水肿体积及血清β-内啡肽、强啡肽、D-二聚体、炎性因子〔包括白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素4(IL-4)、白介素10(IL-10)〕水平,并比较两组患者治疗期间不良反应发生率。结果 (1)观察组患者临床效果优于对照组(P<0.05)。(2)与对照组患者比较,观察组患者治疗前NIHSS评分及血肿体积、水肿体积相似,差异无统计学意义(P>0.05),而治疗后NIHSS评分降低,血肿体积、水肿体积减小(P<0.05)。(3)与对照组患者比较,观察组患者治疗前血清β-内啡肽、强啡肽、D-二聚体水平相似,差异无统计学意义(P>0.05),而治疗后血清β-内啡肽、强啡肽、D-二聚体水平降低(P<0.05)。(4)与对照组患者比较,观察组患者治疗前血清IL-6、TNF-α、IL-4和IL-10水平相似,差异无统计学意义(P>0.05),而治疗后血清IL-6、TNF-α水平降低,血清IL-4、IL-10水平升高(P<0.05)。(5)两组患者治疗期间不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论盐酸纳美芬联合电针刺激可有效提高急性脑损伤患者的临床效果,改善患者神经功能,减小患者血肿、水肿体积,降低血清D-二聚体、内源性阿片肽水平,减轻炎性反应,且安全性较高。

纳络酮在神经外科的应用近况

纳络酮(Naloxone,NLX)是阿片受体纯拮抗剂而无激动活性,与阿片受体的亲和力是吗啡的16倍,是内源性阿片肽的2～3倍,能竞争性拮抗应激状态下大量内源性阿片肽所致的广泛病理生理效应,可逆转呼吸、循环抑制和意识障碍.过去NLX仅用于吗啡类药物中毒解救,基础方面用于对阿片受体、内源性阿片样物质和镇痛药作用机理等的研究.近年来,随着临床药理学研究的深入,该药已广泛用于临床各科.本文就NLX在神经外科的应用近况作简要综述.