2种剂量亚叶酸钙对氟脲嘧啶增效作用的体外比较研究

目的比较 2种剂量亚叶酸钙 (leucovorin)对 5 氟脲嘧啶 (5 fluorouracil,5 Fu)的增效作用。方法采用MTT法体外药敏试验测定亚叶酸钙 2 0mg/m2 和 2 0 0mg/m2 在以 5 Fu为主的 4种化疗方案中 30例胃癌细胞的药物敏感性 ,通过比较细胞抑制率 (cellinhibition ,CI)分析 2种剂量亚叶酸钙的体外增效作用 ,得出亚叶酸钙对 5 Fu增效作用的最佳剂量。结果亚叶酸钙 2 0 0mg/m2 用量在以 5 Fu为主的 4种联合化疗方案中的体外增效作用高于 2 0mg/m2 (P <0 .0 5 )。结论在以 5 Fu为主的 4种联合化疗方案中较大剂量 (2 0 0mg/m2 )亚叶酸钙更能增强其体外抗癌作用 。

FAU的碘化标记及其在小鼠体内的生物学分布

目的研究^(125)I-氟-碘阿糖呋喃基尿嘧啶(FIAU)的性质及在小鼠体内的生物学分布。方法利用 Iodogen 碘化标记法对氟脱氧呋喃糖尿嘧啶(FAU)进行标记,用 Sep-Pak C18反相色谱柱进行纯化;观察^(125)I-FIAU 的标记率、放化纯、体外稳定性及其在小鼠体内的生物学分布。结果以Iodogen 固相氧化法标记 FAU,得到^(125)I-FIAU,标记率为(63.12±5.01)%;产物经 Sep-Pak C18反相色谱柱纯化后放化纯为(98.60±0.52)%;^(125)I-FIAU 在 PBS 及人血清中37℃条件下稳定,24 h 后放化纯>95.04%。生物学分布实验表明:标记物从小鼠血液中清除迅速,用每克组织百分注射剂量率(%ID/g)表示,0.5 h 为(4.33±1.00)%ID/g,2 h 下降为(0.77±0.06)%ID/g,至24 h 时基本清除完毕;肾脏是其主要排泄器官。结论 Iodogen 固相氧化法可以进行 FAU 碘化标记,得到标记率、放化纯及稳定性较好的^(125)I-FIAU,该标记物主要经肾脏排泄。

131^I-FIAU在不同载体介导的HSV1-tk转导心肌细胞中的实验研究

目的为以单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶基因（HSV1-tk）为报告基因的核素心脏显像寻找合适的载体并提供依据。方法以胶原酶单次消化法获得乳鼠原代心肌细胞，分别应用重组腺病毒Ad5-HSV1-tk（Ad5-tk）和脂质体lipofectamine^TM2000包裹的重组质粒pDC316-tk（pDC316-tk／lipoplex）将报告基因HSV1-tk转导入细胞，以空载体腺病毒作为对照；采用Iodogen固相氧化法对特异性报告探针氟-碘阿糖呋喃基脲嘧啶（FIAU）进行131^I标记，经Sep-Pak C18反相色谱层析柱纯化后，测定标记物的标记率和放化纯；比较各组细胞对131^I-FIAU的摄取情况，并应用半定量反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫细胞化学方法，在mRNA和蛋白质水平检测不同载体介导HSV1-tk转导心肌细胞后HSV1-tk的表达。结果131^I-FIAU的标记率为（53．82±2．05）％，放化纯为（94．85±1．76）％，标记物在体外稳定存在；转导后5h，Ad5-tk感染组和pDC316-tk／lipoplex转染组对131^I-FIAU的摄取率分别为（12．55±0．37）％、（2．09±0．34）％，且各时间点摄取率前者均明显高于后者（t=12．978～38．253，P均〈0．01）；2种载体介导心肌细胞转导后24h，RT—PCR即可检测到HSV1-tk mRNA的表达，且Ad5-tk感染组的表达水平明显高于pDC316-tk／lipoplex转染组（3．11±0．14与1．60±0．05，t=17．663，P〈0．01）；免疫细胞化学检测中二者阳性率分别为（81．70±0．40）％、（22．06±0．32）％，差异有统计学意义（t=23．237，P〈0．01）。结论腺病毒载体介导HSV1-tk感染心肌细胞的效率和对标记探针的摄取率均明显高于脂质体介导组，其可做为活体报告基因心脏显像的载体，可得到更为清晰的显像图。