磷酸氟达拉滨对MUTZ-1细胞作用及机制研究

目的:在体外研究磷酸氟达拉滨(fludarab ine)对人骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞的作用以及可能的作用机制。方法:采用MTT法、透射电境、DNA凝胶电泳、流式细胞仪以及RT-PCR等分析方法。结果:磷酸氟达拉滨能抑制MUTZ-1细胞的生长,24、48、72 h的IC50分别为137.65 m g/L、6.27 m g/L、0.51 m g/L,具有浓度和时间依赖性。经透射电境、DNA凝胶电泳和A nnex inⅤ/P I检测,证实1~16 m g/L磷酸氟达拉滨对MUTZ-1细胞作用24 h后,可以诱导MUTZ-1细胞凋亡,其对Bcl-2、Bax、surv iv in、X IAP、cIAP1和cIAP2基因mRNA表达均无明显下调作用,但可以导致MUTZ-1细胞线粒体膜电位的下降。结论:1 m g/L^16 m g/L磷酸氟达拉滨不但能抑制MUTZ-1细胞生长而且能诱导细胞凋亡,诱导细胞凋亡是其主要细胞毒作用之一。线粒体膜电位下降是其诱导细胞凋亡的重要环节之一。

STAT1信号通路在成骨细胞凋亡蛋白表达中的作用

目的研究转录活化蛋白1(STAT1)信号通路在成骨细胞凋亡蛋白表达中的作用。方法用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度氟达拉滨对成骨细胞的毒性作用,Western blot和ELISA方法检测在不同时间及地塞米松浓度下,Bcl-2相关X蛋白(BAX)、裂解的caspase-3蛋白(cleaved caspase-3)、STAT1及STAT1的磷酸化蛋白(p-STAT1)的蛋白水平。大鼠成骨细胞设对照组、单纯氟达拉滨组、地塞米松组、地塞米松+氟达拉滨组,ELISA方法检测BAX、STAT1和p-STAT1的蛋白量及分光光度法测cleaved caspase-3的蛋白水平。结果在地塞米松刺激作用下,成骨细胞凋亡相关蛋白及p-STAT1的蛋白水平增高,且具有时间及浓度依赖性。应用氟达拉滨下调p-STAT1水平后,地塞米松+氟达拉滨组凋亡相关蛋白表达较地塞米松组下降(P <0. 05)。结论氟达拉滨可以通过抑制p-STAT1的活性下调cleaved caspase-3等凋亡蛋白水平。