核黄素产生菌阿舒假囊酵母发酵条件的初步研究

对阿舒假囊酵母摇瓶发酵条件进行了初步研究。首先,考察了不同碳源(葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和淀粉)和有机氮源(牛肉膏、酵母膏、玉米浆和蛋白胨)对阿舒假囊酵母发酵的影响,结果表明葡萄糖和酵母膏最利于核黄素的合成。在此基础上,采用L9(43)正交设计对阿舒假囊酵母的发酵培养基进行优化,结果表明有机氮源对核黄素产量的影响最显著,优化后的发酵培养基配方为:葡萄糖50g/L,酵母膏20g/L,玉米浆20g/L,KH2PO42.0g/L,MgSO41.0g/L,NaCl1.0g/L,此最佳配方下的核黄素产量达1145.67(±82.08)mg/L,比原始发酵培养基配方下的核黄素产量提高了230.05%。最后,对阿舒假囊酵母摇瓶培养条件进行了研究,结果表明装液量为30mL、接种量为5%、发酵培养基初始pH值控制在6.0时,所得到的核黄素产量最高。

促进因子对阿舒假囊酵母合成核黄素的影响

研究在发酵培养基中添加不同促进因子(玉米浆、酵母膏和豆油)对阿舒假囊酵母合成核黄素的影响。试验结果表明:添加10g/L玉米浆是最促进阿舒假囊酵母菌体生长和核黄素合成的最适质量浓度;40g/L酵母膏分别在0h补加20g/L,24h和48h各补加10g/L,其核黄素产量达到1587.37mg/L,比在0h1次添加40g/L酵母膏的产量提高了21.07%;在发酵培养基中添加2～5g/L豆油,对核黄素的合成均有促进作用。

阿舒假囊酵母过量合成核黄素性能的改良

以６０Ｃｏ的ｒ射线为诱变剂，核黄素合成途径的中间产物的结构类似物为“筛子”，筛选了阿舒假囊酵母（Ｅｒｅｍｏｔｈｅｃｉｕｍａｓｈｂｙｉ）的四种抗性突变株：杀结核菌素抗性突变株（Ｔｕｂｒ）、２－脱氧葡萄糖抗性突变株（２－ＤＧｒ）、８－氮杂鸟嘌呤（８－ＡＧｒ）和抗残液突变株。杀结核菌素抗性突变株Ｔ３０的摇瓶核黄素产量由出发菌的２．５～２．８ｍｇ／Ｌ提高并稳定在３．５ｍｇ／Ｌ以上，经初步优化（培养基配方）后，稳定在５．４ｇ／Ｌ以上。

阿舒假囊酵母合成的精油及其抗真菌活性与机理

利用发酵法对阿舒假囊酵母进行发酵,用萃取法和水蒸气蒸馏法从发酵液中提取精油;通过气相色谱-质谱(GC-MS)法确定其成分;分别利用抑菌圈和二倍稀释法实验法测定了精油的抗真菌能力、最小抑菌浓度和最小杀菌浓度;利用荧光标记法、精油处理酵母后细胞内容物检测法及透射电子显微镜研究了精油的抗菌机理.结果表明,阿舒假囊酵母发酵法得到的精油产率为0. 54 g/L.用GC-MS法鉴定了22种化学成分,占精油总量的98. 82%.精油主要由单萜、倍半萜、芳香醇和倍半萜烃类物质组成.精油对白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、季也蒙念珠菌、新型隐球菌和酿酒酵母具有良好的抗菌活性,其最小抑菌浓度分别为31. 25,31. 25,62. 5,31. 25,15. 625和15. 625μg/m L;最小杀菌浓度分别为62. 5,62. 5,125. 0,62. 5,31. 25和31. 25μg/m L.结果表明,精油的抗菌机理可能是破坏真菌的细胞壁、细胞膜,使胞内物质外泄,最终导致真菌死亡.该研究结果为发酵法合成精油及其应用提供了新思路.

核黄素产生菌阿舒假囊酵母种子培养条件研究

在摇瓶培养条件下,对核黄素产生菌阿舒假囊酵母种子的质量控制策略进行了详细研究。首先,确定以葡萄糖、蛋白胨、玉米浆、KH2PO4和MgSO4等因素为试验考察对象,采用L9(43)正交设计对阿舒假囊酵母的种子培养基进行了优化。结果表明,在原始种子培养基配方的基础上增加有机N源(蛋白胨和玉米浆)以及葡萄糖的用量,可显著提高发酵过程中核黄素的合成量,最终确定阿舒假囊酵母的种子培养基配方为:葡萄糖30 g/L、蛋白胨15 g/L、玉米浆5 g/L、KH2PO41.0 g/L、MgSO40.75 g/L。在此种子培养基配方下,摇瓶发酵所得的核黄素产量达345.68 mg/L,比原始种子培养基配方下的核黄素产量提高了43.33%。接下来,对阿舒假囊酵母种子培养过程的代谢变化情况进行考察。结果表明:种子大约在6 h以后进入旺盛的对数生长期,随着菌体量不断增大,总糖浓度迅速下降,在48 h时生物量达到最大,此时菌体干重达到5.96 g/L左右,之后种子进入衰亡期。最后对接种时机进行了考察,结果表明:在摇瓶发酵过程中,最佳的接种时机应控制在36～38 h。

阿舒假囊酵母摇瓶分批补料发酵产核黄素的研究

利用摇瓶分批补料培养模式考察了补料基质对核黄素合成的影响。首先考察了葡萄糖补加浓度对阿舒假囊酵母菌体生长和核黄素合成的影响,结果表明,葡萄糖的补加对阿舒假囊酵母的菌体生长具有促进作用,但是当葡萄糖的补加浓度超过0·5g/100mL发酵液时,会对核黄素的合成产生严重的阻遏或抑制效应。在此基础上,考察了补加不同碳源对核黄素发酵的影响,结果显示,补加1·0g/100mL发酵液的蔗糖或麦芽糖虽然均利于菌体生长,但同样会对核黄素的合成具有负作用。最后考察氮源的补加对阿舒假囊酵母发酵的影响,结果表明,补加酵母膏和玉米浆能显著促进菌体的生长,且二者最终的核黄素合成量分别为1582·1mg/L和1816·77mg/L,均明显高于不补加任何氮源实验方案下的1135·48mg/L。

维酶素生产菌阿舒假囊酵母的发酵培养基优选

本研究采用二次通用旋转组合回归设计方法，对维酶素发酵培养基豆腐渣中添加麦麸、小米和玉米粉的最优化组合进行定量研究。建立了维酶素产量形成的培养基的反应模式，利用回归模式对培养基的最优化组合和各单因子要素反应规律及其互作效应进行了探讨。

核黄素产生菌阿舒假囊酵母(Eremothecium ashbyii)抗反馈抑制突变株的选育

在调查阿舒假囊酵母(Eremothecium ashbyii)营养要求的基础上,设计了适合该菌生长的合成培养基,在合成培养基上诱变筛选得到了数株抗嘌呤拮抗物8-AG的突变株。选择其中三株U_(95-1)、U_(95-2)和U_(95-3)进行传代和摇瓶发酵试验,U_(95-3)的核黄素发酵单位低于出发菌,未经传代的U_(95-1)、U_(95-2)比出发菌株的发酵水平分别提高15.5％和9.8％,经5～10代传接,其产核黄素的遗传性状稳定。该研究表明,从代谢控制角度通过减轻核黄素合成途径中重要调节酶的反馈抑制对提高E. ashbyii的核黄素产量和稳定性是可行的,为该菌的菌种改良提供了一条遗传育种途径。

利用阿舒假囊酵母发酵副产物生产核黄素

利用阿舒假囊酵母发酵副产物生产核黄素作者Ａ．Ｅ．ＫａｌｉｎｇａｎＭ．Ｒ．Ｖ．Ｋｒｉｓｈｎａｎ概况维生素Ｂ２广泛存在于动植物体中，一般用化学法和微生物发酵法生产。维生素Ｂ２主要用于医药，也用于面包、面粉、谷物食品和饲料中。Ｌａｇｏ和Ｋａｐｌａｎ（１９８...

紫外线诱变原生质体选育核黄素高产菌株

以产核黄素生产用菌——阿舒假囊酵母RS-89为出发菌株,用对致期生长的菌丝体,经0.5%蜗牛酶+0.5%纤维素酶作用2h可获得大量原生质体,其再生率为6.1%。对经UV诱变的原生质体再生株进行初筛、发酵复筛,从中获得了菌落大、色素深、产量高于出发菌株30%的高产稳定株——UP-91。

提高豆渣固态发酵核黄素产率的研究

在豆渣固态发酵生产核黄素工艺基础上，研究了改变液体种子和固体发酵培养基成分对阿舒假囊酵母菌核黄素产率的影响。结果表明，发酵培养基中添加１０％麦麸或２％小米可使核黄素产率分别提高２５％或１４％，添加２５μｍｏｌ／Ｌ碘乙酸则比对照组核黄素产率提高６．２─１０．４％。正交实验表明，接种量５％，并添加１０％麦麸、２％小米、１％玉米浆和２５μｍｏｌ／ｋｇ碘乙酸可使核黄素的产率最高达到６．１４ｍｇ／ｇ基料，蛋白质含量由１０．２％提高到１５．８％．

电视显微摄影技术在微生物教学及科研中的应用

通过对一株核黄素高产株阿舒假囊酵母Ｔ３０的菌丝形态、孢子囊、孢子、发酵过程中出现的膨大菌体及发酵终点核黄素结晶产物的显微观察，介绍一种适用于微生物材料（如：细菌、霉菌、酵母菌等）、动植物材料（如：动物组织、植物花朵）、生物大分子物质（如：淀粉颗粒）、工业结晶（如：核黄素晶体）及金相实验、普通物理实验的显微观察、检测和记录的方法。这一技术可普遍地应用于电视教学及科研实践。

核黄素产生菌的原生质体诱变选育

用紫外线对核黄素产生菌的原生质体进行诱变选育获得一株核黄素的高产突变株其核黄素发酵单位较出发菌株提高66%

代谢调节理论指导下的核黄素发酵条件

发表了从葡萄糖到核黄素的整条生物合成途径。根据这条代谢途径和Ｔ３０突变株的发酵条件试验结果，对阿舒假囊酵母合成核黄素的过程中碳基质流量在ＥＭＰ和ＨＭＰ途径中的分配，油和骨胶在核黄素合成中的不同作用，以及丙酮酸的氧化能力等与核黄素过量合成的关系进行了初步的讨论。

几种丝状真菌原生质体的制备及其再生成菌体的研究

以黑曲霉、米曲霉、木霉、阿舒假囊酵母等几种工业生产用重要真菌为实验对象。通过研究其菌龄、酶的选择及配比、酶解时间等对原生质体制备的影响,以及再生频率的大小和再生过程的显微摄影观察,初步摸索到酶法制备上述丝状真菌原生质体及其原生质体再生成菌体的条件。从而为在原生质体水平上对这些菌株进行遗传操作,尤其是外源基因导入这些菌株对其进行遗传改良提供了实验基础。

开发指南

制作豆腐的豆腐渣,目前绝大部分人把它当作饲料,未进一步开发和利用。 为了更好地利用豆腐渣原料,把它加工为较精制的食品,不仅可以提高豆腐产值而且也能增加豆制 市场疲软,商品销路不佳,企业如何渡过难关?对策之一就是注重开发“边缘产品”。