RP-HPLC法测定番荔枝种子中阿诺宁Ⅰ

目的考察不同产地番荔枝种子中阿诺宁Ⅰ。方法采用HPLC法测定。选用C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(75∶25),检测波长为220nm,柱温30℃,体积流量1mL/min。药材粉末分别采用正己烷脱脂和氯仿回流提取,用甲醇溶解即得。结果阿诺宁Ⅰ在0.3～3.0μg与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.9%,RSD为1.78%。结论建立的定量方法可以用于番荔枝种子中阿诺宁Ⅰ的质量控制。

阿诺宁各组分的抗肿瘤活性和急性毒性比较研究

目的阿诺宁(Anuoning)是具有高抗癌活性的番荔枝内酯有效部位药物。对阿诺宁(A)及其主要成分(B)、非主要成分(C)3个组分进行抗肿瘤活性和急性毒性对比试验。方法用MTT法测定阿诺宁各组分对各种人癌细胞、正常细胞和耐药性(MDR)细胞的细胞毒作用,用小鼠肿瘤S180模型进行体内抗肿瘤试验。应用Bliss方法计算小鼠的半数致死量(LD50)。结果A、B、C在1×10-4～10.0μg/mL质量浓度时,对人癌细胞CNE2的IC50分别为3.1×10-4、4.3×10-3、0.19μg/mL;对Bel-7402细胞的IC50分别为0.078、0.043、0.39μg/mL;对KB细胞的IC50依次为0.46、0.24和1.26μg/mL;对MCF-7细胞的IC50分别为1.72、2.97、>10μg/mL;在上述质量浓度下对人体正常脐血管内皮细胞(ECV304)的IC50分别为0.39、0.27、0.99μg/mL。在10μg/mL质量浓度时,A、B、C组分对人体正常肝细胞(CLC)的平均生长抑制率均小于20%。A、B、C组分对多药耐药(MDR)细胞MCF-7/Adr的IC50分别为0.32、3.15、>10μg/mL,对KBV200细胞的IC50分别为0.027、0.72、0.83μg/mL。在体内试验中,A在30μg/kg,对小鼠肿瘤S180的3批实验的平均抑瘤率为(52.8±9.5)%(P<0.05～0.001);B在15、30和60μg/kg剂量时的平均抑瘤率依次为(40.1±5.7)%、(50.7±10.3)%、(61.9±3.7)%(P<0.05～0.001);C在45、90和180μg/kg剂量下的平均抑瘤率分别为(32.7±3.4)%、(33.5±0.6)%、(30.6±7.3)%(P<0.05～0.01)。对小鼠ip一次A、B、C的LD50及其95%可信限分别为1.38mg/kg和0.97～1.95mg/kg,0.39mg/kg和0.36～0.43mg/kg,2.39mg/kg和2.12～2.69mg/kg。结论A、B、C组分在体内外试验均显示不同程度的抗癌活性,其中A的抗肿瘤活性强,毒性较小。MDR细胞对A、B、C组分均不产生抗药性。

阿诺宁乳化剂的抗瘤作用和急性毒性试验

目的 研究阿诺宁乳化剂的抗瘤作用和急性毒性反应。方法 用小鼠和裸鼠移植性肿瘤模型测定体内抗瘤活性 ,用Blliss方法计算小鼠给药的急性毒性的LD50 。结果 阿诺宁乳化剂在 4 ,8和 16mg·kg-1,灌胃 (ig) qd× 10d ,对小鼠肝癌HepS 3批实验的平均抑瘤率分别为 39.2 % ,4 6 .9%和 5 5 .7% ;对小鼠肉瘤S 180的平均抑瘤率分别为 34.6 % ,4 7.3%和5 4 .4 % ;对小鼠L2 的平均抑瘤率分别为 37.5 % ,4 5 .9%和 5 6 .5 %。阿诺宁乳化剂在 7.5 ,15 ,30和 6 0 μg·kg-1腹腔注射 (ip)×10d剂量下 ,对小鼠肝癌 (HepS)实验的平均抑瘤率分别为 31.0 % ,4 2 .9% ,5 0 .2 %和 6 2 .4 % ;对小鼠肉瘤S 180的平均抑瘤率依次为 2 3.6 % ,39.4 % ,5 0 .9%和 6 1.2 % ;在 15 ,30和 6 0 μg·kg-1,ip ,每日 1次 ,每周 6次 ,共 4周的剂量下 ,对人肝癌 (Bel 74 0 2 )裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为 32 .0 % ,5 0 .5 %和 6 0 .2 % ;在上述 3个剂量下 ,对人肺腺癌 (GLC 82 )裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为 30 .3% ,4 1.9%和 5 6 .1%。结果表明 ,阿诺宁乳化剂ig ,ip对上述 5种肿瘤均有明显的抑制作用 ,且其抑瘤率与阿诺宁乳剂的剂量相关。用Bliss方法统计出阿诺宁乳化剂对小鼠ig一次的半数致死量 (LD50 )及其 95 %可信限为 74 .75 (5 8.6 7?

阿诺宁两活性成分在大鼠肝微粒体中的酶动力学研究

[目的]建立番荔枝内酯类化合物squamocin和bullatacin的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,并测定其在大鼠肝微粒体中的酶动力学参数。[方法]建立微粒体孵育体系,启动反应后测定不同时间孵育体系内剩余的squamocin和bullatacin的浓度,用底物消除法计算其酶动力学参数。[结果]在大鼠肝微粒体中,squamocin和bullatacin的表观米氏常数KM值分别为(1.6±0.5)和(2.0±0.4)μmol/L。[结论]该方法适用于squamocin和bullatacin的酶动力学常数的测定。