饲草附生乳酸菌对碳源的选择性

【目的】探究饲草源乳酸菌对碳源的选择性,为不同草种筛选适宜的青贮菌种。【方法】选取饲草中分离获得的16株代表性乳酸菌作为研究对象,在MRS液体培养基中以葡萄糖、蔗糖、果糖、木糖、棉籽糖以及5种糖混合为碳源,进行不同菌株发酵培养。每株乳酸菌设3个重复,每个糖处理设空白对照(不接菌)。采用高效液相色谱仪测定各处理发酵24 h后液体培养基中剩余碳源含量和乳酸产量。【结果】(1)蔗糖是大部分菌株发酵首选碳源,在棉籽糖、葡萄糖、果糖和木糖的选择上不同菌株差异较大,发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum,LbFWM)首选棉籽糖和木糖,假肠膜明串珠菌(Leuconostioc pseudomesenteroides,LeP-IR)首选木糖。(2)罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri,LbR-EG)和柠檬明串珠菌(Leuconostoc citreum,LeC-IR)对蔗糖,LbF-WM和LbR-EG对果糖,LbF-WM、LbR-EG和LeP-IR对棉籽糖的利用率均达100%,屎肠球菌(Enterococcus faecium,EF-KG)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis,LbB-KG)、戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus,LbPe-EG)、乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,LcL-SC)对葡萄糖的利用率高于其他碳源。(3)灰黄色肠球菌(Enterococcus durans,EG-IR)利用葡萄糖和混合糖,LbPe-EG利用果糖,肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides,LeM-IR)利用棉籽糖和混合糖,LbPe-EG利用蔗糖,LbF-WM利用木糖,格氏乳球菌(Lactococcus garvieae,LcG-IR)利用混合糖发酵乳酸产量最高。(4)耐久肠球菌(Enterococcus durans,ED-IR)利用葡萄糖,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LbPl-IR)、LbPe-EG利用果糖,LbPl-IR和LeM-IR利用棉籽糖,LbPe-EG、LbPl-IR和ED-IR利用蔗糖,LeP-IR利用木糖,LcG-IR和EG-IR利用混合糖产乳酸效率较高。LbPl-IR在5种单糖中产酸效率均达80%以上。【结论】不同菌株对同一碳源的利用率、产酸量和产酸效率均不同;同一株菌株对不同碳源的利用率、产酸量和产酸效率也不相同。其中,蔗糖为大部分菌株的首选碳源,蔗糖和葡萄糖的利用率和产乳酸量较高,葡萄糖的产酸效率较高;青贮调制时,可针对饲草中分布乳酸菌种类选择最适碳源。

四川泡豇豆原料表皮附生乳酸菌抗生素抗性及抗性基因污染分析

以鲜豇豆为研究对象,利用生理生化特征、16S r RNA、抗生素抗性和抗性基因检测分析其表皮附生乳酸菌对氯霉素(CHL)、四环素(TET)和氨苄青霉素(AMP)的抗性与抗性基因。结果表明:从鲜豇豆表皮共分离得到182株乳酸菌,分别属于Weissella confuse(50.0%)、Weissella cibaria(15.4%)、Enterococcus sulfurous(7.1%)和Lactococcus lactis subsp.lactis(27.5%)。32株(17.6%)乳酸菌对CHL和TET有抗性,其中,6株W.confuse(3.3%)和4株L.lactis subsp.Lactis(2.1%)对CHL单一抗性,4株W.confuse(2.1%)和5株L.lactis subsp.Lactis(2.7%)对TET单一抗性,6株W.confuse(3.2%)、2株W.cibaria(1.1%)、1株E.sulfurous(0.5%)和4株L.lactis subsp.Lactis(2.1%)对CHL和TET二重抗性;编码外排泵基因efr A、efr B、nor B、nor C、nor E和sug E中,efr B的检出率最高,达31.3%,efr B和sug E的检出率最低,为3.1%。TET被检抗性基因tet(A)、tet(B)、tet(C)、tet(D)、tet(H)和tet(L)中,tet(C)的检出率最高,达90.9%,tet(B)的检出率最低,为4.5%。

全株水稻表面优势乳酸菌的筛选与鉴定

本试验旨在对全株水稻表面的优势乳酸菌进行分离、筛选与鉴定,以期挖掘出青贮优良菌种资源。利用平板涂布法对全株水稻上的乳酸菌进行分离,以生长速度和产酸能力进行初筛,以抗氧化能力(H2O2耐受能力、DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率)进行复筛,对筛选出的优势乳酸菌进行生理生化特性分析和分子生物学鉴定。结果表明,从水稻植株表面共分离得到154株乳酸菌,培养48 h后,有16株OD_(600nm)值>2且pH值<4的乳酸菌,其中有9株乳酸菌具有抗氧化能力,综合表现最好的菌株是YMA3,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除率分别为72.23%、72.46%、86.33%。YMA3表现出较强的高温或酸性环境适应性,鉴定为粪肠球菌。

用附生植物乳酸菌发酵剂处理不同刈割期苜蓿青贮料的发酵特征

研究苜蓿在第一、第六生长期刈割，凋萎后用4种添加剂分别处理青贮料。所用添加剂分别为附生植物乳酸菌发酵剂(FJLB)、蔗糖(S)、FJLB＋S，对照组青贮料(C)用同样数量的无菌FJLB处理。苜蓿第六(1996年10月17日)和第一生长期(1997年4月14日)的干物质量分别为20％和17％。凋萎苜蓿干物质含量分别为26％、31％、36％和29％、36％、48％。尽管两刈割期的附生植物乳酸菌形成的菌落团(CFU)无差异，但第六生长期苜蓿比第一生长期苜蓿的发酵品质好。与第一生长期苜蓿相比较，第六生长期苜蓿具有较低的PH值和氨—N浓度，较高的乳酸盐和醋酸盐浓度与较高的乳酸盐和醋酸盐比率。这些现象对＜29％干物质含量的对照组青贮料效果更为明显。FJLB处理大大提高了两刈割期青贮料的乳酸盐发酵(p＜0．05)，与第六生长期苜蓿相比，第一生长期苜蓿蒋的梭菌发酵有较大的降低，氨—N和醋酸盐浓度下降。对第六生长期苜蓿来说，用FJLB和S共同处理与用FJLB或S单一处理比较，它的发酵品质反应更大。本研究讨论了不同刈割期苜蓿和不同水分含量条件下，用FJLB处理对它们的影响及变化。