陈旧骨骼DNA提取及性别鉴定

用本室建立的方法对3～15年的陈旧骨骼进行DNA提取，并用X、Y同源引物扩增AInelogenin基因X、Y特异性片段，所有检材均得出正确结论，表明该方法快速、灵敏、可靠，适用于陈旧骨骼性别鉴定。

陈旧骨骼DNA提取

目的寻找从陈旧骨骼中提取DNA的有效方法。方法运用传统的有机法结合Microcon100纯化柱提取骨骼DNA。结果用常规荧光标记复合STR基因分型法可对提取到的陈旧骨骼DNA进行成功分析。结论有机法结合Micrcon100纯化柱提取陈旧骨骼DNA法可有效应用于实际检案。

联合运用CTAB与磁珠提取陈旧骨骼DNA

用Chelex-100法或酚-氯仿法提取骨骼DNA,一般采用PK消化.该法虽对比较新鲜且有软骨组织存在的骨骼DNA提取效果较好[1],但对陈旧性骨骼DNA提取,难以达到理想效果.

DNATyper^(TM)15与Identifiler^(TM)试剂盒对陈旧骨骼、牙齿和指甲样本检验结果的比较分析

目的通过国产DNATyperTM15和进口IdentifilerTM试剂盒对陈旧骨骼、牙齿和指甲样本的检验结果比对分析,了解国产试剂盒对降解检材的检验效果,探讨在案件检验中应用的可行性。方法提取陈旧骨骼、牙齿和指甲样本的DNA后,用DNATyperTM15及IdentifilerTM试剂盒同步扩增,并用检出率、杂合子基因座上等位基因均衡性(PHR)和等位基因分型结果一致性,对DNATyperTM15和IdentifilerTM试剂盒进行比较。结果 45例陈旧骨骼、牙齿和指甲样本,DNATyperTM15试剂盒成功检出399例,检出率88.7%,IdentifilerTM试剂盒成功检出404例,检出率89.8%;DNATyperTM15试剂盒和IdentifilerTM试剂盒共同检出398例,在这398例样本中,PHR≤0.5分别为128个和117个;同一样本中,相同基因座上两种试剂盒检出的等位基因分型结果完全一致。经统计学分析,两种试剂盒的检出率和杂合子基因座上等位基因均衡性的检测结果均无统计学差异(P>0.05)。结论国产DNATyperTM15试剂盒可有效应用于实际案件中陈旧骨骼、牙齿及指甲样本的检验。

陈旧骨骼及牙齿的性别检验

为分析陈旧骨骼及牙齿的性别，建立了从陈旧人骨骼和牙齿中提出DNA的方法。通过PCR技术扩增，得到X－Y染色体上的单拷贝同源基因片断（AmelogeninGene）。结果显示，从死亡后2年、4年、7年和10年的4个骨骼和牙齿样品中，均成功地获得了特异的PCR扩增片段。女性为单一的106bp条带，男性为106bp和112bp两条谱带。其快速、简单、可靠，为陈旧骨骼和牙齿的性别鉴定提供了方法。

自动荧光分析法检验陈旧骨骼和牙齿的vWA和LPL位点

为鉴定陈旧骨骼和牙齿的尸源 ,对DNA的提取方法进行了研究,并建立了vWA和LPL位点的自动荧光分析技术,该法简便、快速、有效、可对存放2、3、4、7年的陈旧骨骼和牙齿成功地进行检验。

陈旧骨骼牙齿进行复杂亲缘关系分析

目的 通过提取陈旧骨骼、牙齿中的DNA进行复杂亲缘关系鉴定。方法 对1-4号遗骸的股骨、牙齿进行预处理,在大体系疑难检材DNA提取仪上提取,并进行定量;血样采用96道全自动工作站提取;所有样本均采用VeriFiler Plus等5种不同试剂盒进行扩增检测;对1号遗骸、孙1进行线粒体全基因组测序;根据检验结果进行亲缘关系分析。结果 根据常染色体STR分型,1号与2号遗骸存在亲缘关系,1号遗骸与贾1、贾2、贾3、孙1存在祖孙关系;根据Y染色体STR分型,2号、3号遗骸与贾1、贾2、贾3倾向来自同一父系,4号遗骸与贾1等Y-STR分型不一致,不符合同一父系遗传特征;根据mtDNA全基因组检测结果,不排除1号遗骸与孙1来自同一母系。结论 通过优化预处理、提取方法以及多种检测技术联合应用,并运用多种亲缘评判标准,能够对陈旧的骨骼、牙齿等疑难检材进行复杂亲缘分析。

46年陈旧骨骼DNA检验1例

1 案例资料 1．1简要案情 王某，女，46年前去世，当时土葬，2011年7月发现尸骨被盗，需要对公安部门破获盗窃年轻女性尸骨案中提取的陈旧尸骨与王某女儿（现年49岁）血液样本进行DNA分型比对，以确定尸骨身源。

陈旧性骨骼DNA提取技术的研究

对陈旧性骨骼建立一个高回收率并能除去 PCR 反应抑制物的提取 DNA 的方法。采用 CTAB 法提取 DNA。结果显示,该方法不但能有效去除 PCR 抑制物,而且对水泡、火烧、土埋以及10年左右的骨骼所提取的 DNA 均能成功地进行荧光标记 STR 多基因座扩增检验。实验表明,该方法稳定,重复性好,适合陈旧骨骼标本的 DNA 提取。

30年碎骨DNA成功检验破案1例

1案例1.1案例简介1990年1月18日,在肥西县铭传乡聚县某供电站附近,谢某将解某某杀害后,将尸体掩埋于供电站旁的一处废弃的管道下。现公安机关依据谢某供述,挖出部分碎骨,为了查明尸源,当地公安机关提取部分碎骨及解某某妻女DNA样本至本市公安局物证鉴定所做DNA鉴定进行身份认定。

土埋40余年股骨用于亲权鉴定的分析2例

陈旧骨骼是高度腐败或白骨化尸检中重要的生物检材,涉及多数为重要案件,如火灾、爆炸、地震、海啸等重大群死群伤案件,迁坟、寻根访祖、考古等民事或历史事件。因陈旧骨骼长期受复杂环境因素的影响,DNA高度降解,核DNA模板含量低、质量差,且存在较多抑制物,对其进行检验较为困难。本文结合日常检案,对2例土埋陈旧股骨在亲权鉴定中的应用进行分析,希望借此为相关研究提供参考价值。