基于“陈气致病”理论研究miRNA-mRNA网络调控糖尿病动脉粥样硬化的机制

目的探讨糖尿病动脉粥样硬化关键基因及“陈气致病”科学内涵。方法糖尿病动脉粥样硬化模型小鼠与白血病病毒B株敏感(Friend Virus B NIH Jackson,FVB)小鼠各9只,采用GO和KEGG分析差异基因分子功能、生物过程、细胞成分及通路富集情况,采用免疫组化检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结域蛋白3(NLR family pyrin domain containing 3,NLRP3)在海马、胃、心肌及主动脉组织中表达,构建miRNA-mRNA网络,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证该网络。结果46个DEGs在模型小鼠主动脉组织中差异表达。GO表明DEGs生物过程主要集中于miRNA介导的翻译抑制、皮脂腺发育等方面,分子功能主要集中于内涵体、内体膜等方面,细胞成分主要集中于通道活性、磷脂酰肌醇-3-磷酸结合等方面。KEGG表明DEGs富集于白细胞经内皮细胞迁移过程、叉头转录因子(forkhead box class O,FoxO)信号通路等方面;免疫组化结果提示在主动脉组织中NLRP3含量最高;构建由46个mRNA及23个miRNA组成miRNA-mRNA调控网络,Miranda分析提示小鼠主动脉中miR-874-3p与NLRP3的3’端非编码区(non-coding region,UTR)存在互补结合位点,qPCR结果表明,模型小鼠主动脉组织中NLRP3水平显著升高,miR-874-3p水平显著降低。结论高糖环境中低表达的miR-874-3p对NLRP3的抑制减弱可能是糖尿病动脉粥样硬化炎症形成的重要机制及“陈气致病”的科学内涵。