降植烷诱导小鼠类风湿关节炎的模型

目的：利用降植烷构建一种模拟人类风湿性关节炎发病过程的小鼠模型。方法：6-8周雌性BALB/c小鼠30只,随机分为模型组和对照组,每组15只。模型组于0周、9周、18周时经腹腔注射0.5 ml降植烷;对照组注射0.5 ml生理盐水。观察各组小鼠后足足掌厚度变化,并对关节炎的肿胀程度进行评分;H＆E染色评估滑膜增生和炎性细胞浸润程度;流式细胞术方法检测小鼠脾脏中巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞、T细胞和B细胞的亚群变化。结果：21周时,模型组有11只小鼠出现足爪红肿,足掌平均厚度为（2.90±0.51）mm,与对照组（1.29±0.47）mm比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;关节炎评分为9.55±2.80。H＆E染色结果显示模型组胫骨远端骨小梁吸收破坏,累及骨皮质,关节软骨可见坏死脱落、纤维化,呈现出明显的类风湿关节炎病理改变。流式细胞术分析结果显示,造模21周时,脾脏细胞中CD11b、CD11c和GR1表达明显增加,提示巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞亚群数量增加;同时,CD4、CD8、CD154的分子表达也明显上调,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：经腹腔注射降植烷能够成功诱导小鼠关节炎,并产生与RA患者类似的组织病理和免疫学改变。降植烷诱导的小鼠关节炎模型,能够较为准确地模拟临床类风湿关节炎的发病过程。

降植烷诱导不同品系大鼠建立类风湿性关节炎动物模型的比较

目的:探讨不同品系大鼠用于建立能够分泌类风湿因子(RF)的类风湿性关节炎动物模型。方法:选择雌性Wistar大鼠、雌性Lewis大鼠和雌性DA大鼠各10只,分成3组,分别在实验大鼠尾根部皮下多点注射降植烷150mg。观察大鼠关节是否肿胀和关节炎指数变化,测定RF水平,取脾细胞观察类风湿性关节炎特异性B细胞的数量。结果:10只Lewis大鼠有6只出现关节肿胀,脾细胞涂片显示血清RF检测呈阳性的Lewis大鼠RF特异性B细胞明显多于其他大鼠。而Wistar大鼠和DA大鼠组都没有出现关节肿胀,血清RF检测也呈阴性。结论:降植烷150mg在Lewis大鼠尾根部皮下多点注射方法,能够建立分泌RF的类风湿性关节炎动物模型。

不完全佐剂和降植烷诱发小鼠单抗腹水的比较

不完全佐剂和降植烷诱发小鼠单抗腹水的比较孙同哲，刘俊霞，白金芬，周立，郭桂庆，张金香（中国医学科学院血液学研究所天津３０００２０）制备小鼠腹水，生产单克隆抗体、降植烷（商品名Ｐｒｉｓｔａｎｅ．化学名２．６．１０．１４－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ－ｐｅｎｔ...

降植烷通过内质网应激诱导大鼠巨噬细胞自噬

目的探讨佐剂降植烷诱导自噬增强的确切机制。方法构建降植烷刺激的大鼠巨噬细胞系模型;Western blotting检测细胞模型能量代谢分子腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及内质网应激通路真核起始因子2α(eIF2α)和肌醇依赖酶1α(IRE1α)的表达与活化,及转录因子EB(TFEB)的表达及入核情况;采用二硫苏糖醇(DTT)、4-苯基丁酸(4-PBA)调控细胞内质网应激水平并观察对mTOR表达和细胞自噬的影响。结果降植烷刺激的NR8383细胞模型中,eIF2α在刺激0.5 h活化,mTOR表达在刺激后1、3 h较对照组(0 h)显著降低,AMPK及IRE1α无明显变化。降植烷刺激的NR8383细胞模型的mTOR表达下调,在4-PBA干预时表达回升,而增强的LC3-II表达受到抑制;在DTT干预细胞模型时,mTOR表达则进一步下调,同时LC3-II表达则更高。降植烷诱导细胞的TFEB表达升高并活化入核。结论降植烷可能通过诱导内质网应激实现巨噬细胞自噬增强。

克痹康对降植烷诱导的类风湿性关节炎大鼠的影响

目的:观察克痹康对类风湿性关节炎大鼠的治疗作用。方法:用降植烷诱导DA大鼠建立类风湿性关节炎模型,观察克痹康对DA大鼠体重、关节炎记分、血清一氧化氮(NO)含量、类风湿因子(RF)等级以及关节组织病理变化的影响。结果:与模型组相比,克痹康1.0 g/kg、0.5 g/kg和0.25 g/kg组发病率和关节炎记分显著降低;克痹康1.0 g/kg组和克痹康0.5 g/kg组NO浓度和模型组比显著降低;克痹康1.0 g/kg组RF浓度等级明显降低。病理分析结果显示克痹康能显著降低滑膜炎和关节炎记分。结论:克痹康能明显改善降植烷诱导DA大鼠类风湿性关节炎症状。

不完全佐剂与降植烷在生产单克隆抗体腹水中的对比研究

按常规方法用降植烷(Pristane)作为生产单克隆抗体(McAb)腹水的诱发剂，由于降植烷需要进口、有致癌作用．而且诱生腹水的能力也不够理想，为此，作者寻找其它诱生剂以代替降植烷，经过初选之后，确定用不完全佐剂(IFA)与降植烷进行对比研究。现将结果报告如下：

不完全佐剂与降植烷在产生McAb腹水作用的比较

本文报道用降植烷和不完全佐剂(Incomplete freund's adjuvant,IFA)为诱导剂,刺激BALB/C小鼠产生McAb腹水。实验结果表明,不完全佐剂明显优于降植烷,而且毒性小,无致癌作用,故可大力推广。另外,本文还探讨了腹水量与小鼠的体重及存活时间的关系。

青藤碱和甲氨蝶呤对降植烷诱导的关节炎大鼠血清IL-10和TNF-α的影响

目的:探讨青藤碱和甲氨蝶呤对降植烷诱导的关节炎大鼠(pristane induced arthritis,PIA)血清白细胞介素-10(interleuk in-10,IL-10)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-,αTNF-α)的影响。方法:将40只Lew is大鼠随机平均分为5组,即正常组、模型组、青藤碱组、MTX组、青藤碱+MTX组,除正常组大鼠,在其它大鼠尾根部位皮内注射0.2m l/只剂量的降植烷以建立PIA模型,同时口服青藤碱(120mg.kg-1.d-1)和/或MTX(3.8mg.kg-1.w-1)共8w。正常对照组大鼠皮内注射等量的生理盐水并口服生理盐水(10mg/kg/w)。给药8w后采血,用放射免疫分析检测血清IL-10和TNF-α的水平。结果:MTX组大鼠血清IL-10(及TNF-α)水平均明显低于模型组大鼠(P<0.05);模型组大鼠血清TNF-α含量明显高于正常对照组和含MTX治疗组(P<0.05),与单用青藤碱治疗组比较无显著性差异。结论:甲氨蝶呤可能对PIA大鼠血清IL-10和TNF-α均有明显抑制作用。

狼疮丸对降植烷诱导小鼠系统性红斑狼疮的治疗作用

通过建立降植烷诱导的系统性红斑狼疮(SLE)的小鼠模型,明确狼疮丸对于SLE小鼠模型的治疗作用。30只6~8周龄雌性小鼠BALB/c被随机分为3组,即对照组(首日单次腹腔注射生理盐水0.5 mL)、模型组(首日单次腹腔注射降植烷0.5 mL)和狼疮丸治疗组(首日腹腔注射降植烷0.5 mL,第2天起狼疮丸每日按剂量灌胃)。注射前及注射后每月采用尿蛋白试纸测定小鼠尿蛋白1次;注射后1、2、3、4、5、6个月ELISA法检测小鼠血清中抗双链DNA抗体(anti-dsDNA)、抗核抗体(anti-ANA)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6);第6个月测定IgG蛋白;6个月处死动物后,观察肾脏HE染色及免疫荧光染色后的变化。与对照组相比,模型组在腹腔注射降植烷1个月后出现尿蛋白升高。4个月时,77.7%小鼠尿蛋白含量达到+++。狼疮丸治疗组可显著改善模型组小鼠尿蛋白含量(P<0.05);ds-DNA、ANA、TNF-α、IL-6、IgG浓度均显著低于模型组(P<0.05、P<0.01和P<0.001);与模型组相比,治疗组小鼠肾脏中的IgG、CD3表达显著减少(P<0.001)。狼疮丸能降低降植烷诱导的SLE样小鼠模型中尿蛋白、dsDNA、ANA、TNF-α、IL-6和IgG的浓度,并能减轻肾脏的损伤程度,对SLE小鼠具有较好的治疗作用。

降植烷诱导的关节炎大鼠血清IL-6的动态变化

目的:研究降植烷诱导的关节炎(pristaneinducedarthritis,PIA)大鼠血清白介素-6(IL-6)的动态变化。方法:用pristane免疫大鼠建立PIA动物模型,放射免疫分析检测血清IL-6的水平。结果:大鼠血清IL-6水平在pristane免疫后的1、3、8周增高,与免疫前比较有显著性差异(P<0.01),出现2次高峰分别在1和8周;5周IL-6下降,与1周比较有显著性差异(P<0.01)。结论:IL-6可能有参与了PIA发病、反复和进展。

降植烷诱导鼠关节炎模型研究进展

类风湿关节炎是一种以慢性、进行性、对称性、侵蚀性外周关节损害为特征的常见自身免疫性疾病。建立模拟人类患者的动物模型是研究此类疾病的有效方法。不同动物模型具有不同的特点,降植烷诱导鼠关节炎模型是常用模型,在临床表现、病理学改变、免疫学特点和遗传背景等各个方面均与人类患者类似。

敲除小鼠Ormdl3基因可部分缓解降植烷诱导的狼疮表型

目的探讨ORMDL3基因与系统性红斑狼疮(SLE)临床表型之间的关系。方法采用TALEN技术构建Ormdl3基因敲除小鼠。取纯合敲除小鼠(Ormdl3^-/-)与同窝野生小鼠(Ormdl3^+/+)各20只,分为4组,分别腹腔注射降植烷与PBS各0.5 mL,在注射3个月和6个月后比较各组小鼠24 h尿蛋白水平,HE染色比较肾脏损伤程度,称重比较脾脏质量、体质量,流式细胞术比较脾脏组织CD4^+/CD8^+T细胞比例。结果(1)注射降植烷3个月及6个月后,Ormdl3^-/-敲除小鼠脾脏肿大程度低于同时注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠;(2)Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷6个月后,24 h尿蛋白水平较同样注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠差异无统计学意义(P=0.066);HE染色结果显示Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷后肾脏损伤程度较注射降植烷的Ormdl3^+/+野生小鼠轻。(3)降植烷诱导的Ormdl3^+/+野生小鼠脾脏CD8^+T细胞比例下降(P<0.05),进而导致CD4^+/CD8^+T细胞比例升高(P<0.05),而Ormdl3^-/-敲除小鼠在注射降植烷后能够抵抗CD4^+/CD8^+T细胞比例上升的趋势。结论Ormdl3基因缺失可部分缓解降植烷诱导的狼疮小鼠模型表型程度,初步提示ORMDL3可能在导致SLE发病过程中具有一定作用。

大鼠单克隆抗体——Ⅶ.用降植烷和福氏佐剂预处理大鼠后腹水产生及单克隆抗体产量的增加

作者研究了腹腔注射降植烷、福氏不完全佐剂(IFA)以及上述两种佐剂的混合物(V/V)(称PIFA)对Louvain大鼠腹水产生及单克隆抗体(McAb)产量的影响。当腹腔注射杂交瘤或免疫细胞瘤细胞的同时注射2ml PIFA可获得最佳结果。若与未经处理的对照大鼠相比,腹水产生增加4.7倍,单克隆抗体产量增加6倍多。 大鼠-大鼠杂交瘤系统有以下优点:①在小鼠系统不适宜的情况下。

降植烷诱导C57BL/J6狼疮性肾病鼠模型的建立和生物学鉴定

目的构建C57BL/J6狼疮性肾病(LN)鼠模型,探讨降植烷在其发病机制中的生物学作用。方法 C57BL/J6小鼠随机分为两组,实验组予一次性腹腔注射降植烷0.5ml,对照组予一次性腹腔注射生理盐水0.5ml。注射后第5、10天分别检测脾脏中吞噬细胞、树突状细胞及B细胞表面分子的变化情况;每月定期检测血清中抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(dsDNA)及尿蛋白,7个月后观测肾脏HE染色和免疫复合物(IC)的沉积情况。结果小鼠腹腔注射降植烷第5、10天后,脾脏中的吞噬细胞、树突状细胞不同程度活化(P<0.05),B细胞表面CD21、CD86、MHC-Ⅱ等分子表达也不同程度上调(P<0.05);4个月后血清ANA、dsDNA有不同程度的表达(P<0.05);7个月后,78%的小鼠出现蛋白尿(≥+),肾脏HE切片显示肾脏出现肾小球肿胀,淋巴细胞浸润等典型的肾病改变,IC沉积。而对照组中血清ANA、dsDNA阴性,未见蛋白尿,肾脏组织未见病理改变。结论降植烷成功地诱导了C57BL/J6LN鼠模型。

降植烷诱导大鼠类风湿关节炎模型的建立

目的用降植烷(pristane)免疫Lewis大鼠诱导关节炎,建立类风湿关节炎(RA)动物模型。方法采用组织病理学和X线摄片的方法观察大鼠的发病程度和病理特点。结果大鼠关节炎发病率为62.5%,主要累及远端关节,关节炎症状呈慢性反复及进行性加重。关节X线摄片及病理显示关节滑膜增生、软骨组织及骨组织呈典型的关节炎病变。结论Pristane诱导关节炎()大鼠模型与人类PIARA发病及病理特点极为相似,是研究RA较理想的模型。

降植烷诱导小鼠系统性红斑狼疮模型研究

目的建立降植烷诱导的系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型,并对模型进行全面验证。方法 6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为两组,模型组单次ip降植烷0.5 m L,对照组单次ip生理盐水0.5 m L。注射前及注射后2、3、4、5、6个月ELISA法检测血清中抗SLE抗体(anti-SLE)、抗双链DNA抗体(anti-ds DNA);注射前及注射后每月1次采用目测尿蛋白试纸测定小鼠尿蛋白;6个月处死动物,观察肾脏HE染色及直接免疫荧光染色后镜下变化。结果小鼠ip降植烷2个月后,其自身抗体(anti-ds DNA、anti-SLE)浓度显著高于对照组(P<0.05、0.01),且6个月内抗体浓度逐渐升高;6个月时,73%模型组小鼠出现++++尿蛋白;肾脏HE切片显示模型组小鼠肾脏出现肾小球肿胀、炎症细胞浸润等典型的肾病理改变,直接免疫荧光染色见模型组小鼠肾小球毛细血管存在免疫复合物沉积,对照组小鼠肾脏组织未见改变。结论降植烷成功诱导SLE动物模型。

降植烷诱导大鼠关节炎模型的建立及免疫学评价

目的 建立降植烷诱导大鼠关节炎模型，初步评价其免疫学特点。方法 雌性Lewis大鼠100只，随机分为5组：对照组（C组）、P0.2组、R0.25组、P＋Ⅰ组和P＋P组，每组20只。分别于尾根部皮内注射生理盐水0．2mg、降植烷0．2mg、0．25mg、降植烷0．2mg后1周追加等量不完全弗氏佐剂（IFA）、降植烷0．2mg后1周追加降植烷0．1mg。于注射当日开始每周观察大鼠关节炎指数评分1次，并于注射当日、第14、28、42、56天测定踝关节辐射热痛阈、血清类风湿因子（RF）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平。于注射第56天处死大鼠，光镜下观察踝关节组织病理学结果。结果 P0.2组、P0.25，组、P＋Ⅰ组和P＋P组关节炎发生率差异无统计学意义（P〉0，05）；发病大鼠发病时间和最高关节炎指数评分差异无统计学意义（P〉0．05）；与C组比较，其余4组发病大鼠各时点踝关节辐射热痛阈降低，血清RF、TNF-α及IL-1β水平升高（P〈0．05）；发病大鼠踝关节组织切片显示关节滑膜增生、骨和软骨破坏、大量炎性细胞渗出等典型关节炎改变。结论大鼠尾根部皮内注射降植烷后，关节出现明显红肿，成功建立关节炎模型，在痛觉、组织病理学，尤其是免疫学等方面的改变均与临床类风湿关节炎患者类似。

降植烷诱导的DA大鼠类风湿性关节炎模型的建立和评估

目的:建立大鼠类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)模型及检测相关指标,为研究RA的发病机制及其临床治疗提供依据。方法:本研究以Dark-Agouti(DA)大鼠为模型动物,采用尾根部皮内一次性注射降植烷300μl的方法建立RA模型,并检测不同时间点大鼠体重、关节病理评分、爪容积、后爪关节活动度、机械缩爪阈值、热缩爪潜伏期等指标。结果:注射降植烷后7～14 d DA大鼠100%发病,表现为四肢掌指关节、指间关节以及踝关节红肿,爪容积增加,动物行走障碍,关节活动度下降,机械缩爪阈值明显下降,第21～28天达高峰。结论:降植烷尾根部注射引起的DA大鼠关节炎发病率高,操作简单易行,与临床RA患者表现有高度相似性,是一种较好的RA模型。