补肾降浊方在糖尿病肾病中的作用及其机制研究

目的 探究补肾降浊方在糖尿病肾病中的作用及其机制研究。方法 复制糖尿病肾病大鼠模型,使用11.04 g/(kg·d)补肾降浊方治疗。根据不同方法将大鼠随机分为Control组、DN组、DN+补肾降浊方组,每组6只。通过生化分析仪测定尿样中的尿白蛋白水平、血尿素氮和血肌酐含量,HE染色检测肾组织病理损伤,Masson染色检测肾组织纤维化情况,实时荧光定量聚合酶链反应检测SIRT1 mRNA,Western blotting检测MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白的表达。结果 DN组血尿素氮、血清肌酐、尿白蛋白水平较Control组升高(P <0.05),补肾降浊方组较DN组降低(P <0.05)。DN组SIRT1 mRNA相对表达量较Control组降低(P <0.05),DN+补肾降浊方组较DN组升高(P <0.05)。Control组肾小球和肾小管形态完整,而DN组肾小管基底膜增厚,肾小球肥大,表明DN组大鼠肾功能受到严重损害。与DN组比较,DN+补肾降浊方组大鼠肾小管基底膜增厚和肾小球肥大情况明显减少。与Control组比较,DN组肾小球和肾小管腔中胶原蛋白的沉积量明显增加。与DN组比较,DN+补肾降浊方组大鼠肾小球和肾小管腔中胶原蛋白的沉积量明显减少。DN组SIRT1蛋白较Control组降低(P <0.05),p-p38/p38、p-NF-κB p65/NF-κB p65较Control组升高(P <0.05);DN+补肾降浊方组SIRT1蛋白较DN组升高(P <0.05),pp38/p38、p-NF-κB p65/NF-κB p65较DN组降低(P <0.05)。结论 补肾降浊方促进SIRT1的表达,抑制MAPK/NF-κB信号通路,改善糖尿病肾病肾组织损伤。

基于网络药理学和实验验证探讨益肺宣肺降浊方治疗血管性痴呆的机制研究

目的通过网络药理学以及动物实验探讨益肺宣肺降浊方治疗血管性痴呆(VaD)模型大鼠的分子机制。方法通过TCMSP数据库平台筛选益肺宣肺降浊方的有效成分以及相关靶点,因麦冬无法在TCMSP数据库找到,利用查阅文献以及BATMAN-TCM生物信息学分析工具检索麦冬的成分。通过疾病数据库(GeneCards)获取VaD相关靶标并预测益肺宣肺降浊方治疗VaD的潜在靶点。通过STRING和Cytoscape 3.7.2软件绘制“复方活性成分-交集靶点”网络结构,同时建立PPI网络模型并找到关键靶点。对益肺宣肺降浊方治疗VaD的靶标进行GO富集分析与KEGG通路富集分析。29只老鼠随机分为假手术组、模型组、中药组以及西药组。运用2-VO法(双侧颈总动脉永久性结扎法)造模,水迷宫检验大鼠学习记忆行为;HE染色观察各组动物海马CA1区病理变化,荧光检测各组大鼠大脑VEGF的含量,ELISA检测各组大鼠脑组织IL-6和TNF-α含量;采用Western blot检测Nrf2、HO-1、P-Akt/Akt以及NF-κB的蛋白表达水平。结果共获得益肺宣肺降浊方靶点380个,与VaD二者基因交集靶点为183个;交集核心靶点基因PPI网络构建包含92个节点和2610条边。GO结果提示与VaD治疗相关的生物学进程包括对脂多糖、氧化应激,细胞迁移的反应等,KEGG富集分析提示关键的通路涵盖NF-κB、Akt、VEGF、NOD样受体信号等通路。治疗后,与模型组大鼠对比,中药组穿越平台次数明显增多,海马CA1区组织结构及细胞形态完整及少有细胞变性,Nrf2、Akt及HO-1表达水平显著增高,NF-κB表达水平明显下降(P<0.05),炎症指标IL-6、TNF-α明显下调(P<0.01),免疫单荧光显示中药组血管内皮因子含量增加,同时抗氧化因子SOD活性提高,氧化损伤因子MDA含量下降(P<0.05)。结论网络药理学分析提示益肺宣肺降浊方可通过调控多条信号通路以及生物过程治疗VaD,益肺宣肺降浊方提高Nrf2、P-Akt/Akt及HO-1、VEGF蛋白表达水平,改善VaD大鼠海马CA1区神经细胞变性,且可能是通过激活AKT/Nrf2/HO-1改善VaD海马区病变,抑制氧化损伤以及下调NF-κB通路,减少神经炎症,进而改善VaD模型大鼠认知功能。

益肺宣肺降浊方通过影响脑源性神经营养因子改善血管痴呆记忆的作用机制

目的:探讨益肺宣肺降浊方及通过影响脑源性神经营养因子(BDNF)改善血管痴呆记忆的作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,益肺宣肺降浊方低剂量组,益肺宣肺降浊方中剂量组,益肺宣肺降浊方高剂量组,石杉碱甲组,每组15只。其中除假手术组外均构建大脑中动脉栓塞法(MCAO)大鼠血管性痴呆模型。益肺宣肺降浊方低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予1.25、2.5、5 g/kg的益肺宣肺降浊方灌胃,假手术组和模型组给予同等体积的生理盐水灌胃,石杉碱甲组给予3 mg/kg的石杉碱甲灌胃。各组每日灌胃1次,持续给药4周后,进行Morris水迷宫试验检测动物神经行为学;Morris水迷宫结束后,获取大鼠海马组织,通过TUNEL染色检测海马组织细胞凋亡情况;用免疫组织化学检测海马组织中BDNF表达。结果:Morris水迷宫行为学结果显示,与模型组比较,不同剂量的益肺宣肺降浊方组的逃避潜伏期显著减少(P<0.05),穿越平台次数明显增加(P<0.05);TUNEL结果表明益肺宣肺降浊方可有效抑制海马神经元凋亡(P<0.05);免疫组织化学结果显示益肺宣肺降浊方显著上调大鼠海马组织中BDNF的表达(P<0.05)。结论:益肺宣肺降浊方可改善血管痴呆大鼠的学习和记忆功能障碍,其作用机制与抑制神经元凋亡和上调BDNF表达有关。

温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬的影响

目的:探讨温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对线粒体自噬的影响。方法:通过重组大鼠β-NGF分化PC12细胞,Aβ_(25-35)干预其成为阿尔茨海默病细胞模型,确定Aβ_(25-35)造模的最佳浓度和时间点,设立温肺降浊方含药血清低(2%)、中(4%)、高(8%)浓度组。MDC染色和JC-1染色法观察自噬小体和线粒体膜电位,免疫荧光化学染色、qPCR和Western Blot检测各组细胞中PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达。结果:β-NGF分化PC12细胞在第6天后成为海马神经元细胞形态结构,AD细胞造模条件以5μmol/L终浓度的Aβ_(25-35)干预48 h最佳。与正常对照组比较,模型组自噬小体显著增多,线粒体膜电位明显降低,PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,温肺降浊方含药血清可使模型细胞自噬小体减少,线粒体膜电位明显升高,PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:温肺降浊方可减轻Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬通路有关。

基于ERS信号蛋白异常表达探讨清肝降浊方治疗NAFLD的机制研究

目的通过试验研究探讨清肝降浊方基于ERS信号蛋白异常表达治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制。方法采用高脂饮食饲喂的方法,诱导建立非酒精性脂肪肝病大鼠动物模型。给药8周后,进行肝功能指标AST、ALT、AKP检测、血清中TC、TG、NEFA及肝组织匀浆中TC、TG检测、肝组织匀浆中SOD、MDA检测,检测信号通路相关蛋白ATF4、eIF2a、CHOP的表达水平。结果清肝降浊方865.1 mg/kg、432.6 mg/kg和216.3 mg/kg给药组动物血清AST、ALT、AKP活性及肝组织中ATF4、CHOP表达量、TG含量均明显的低于模型组,而肝组织中SOD活性显著高于模型组(P<0.01或P<0.05);865.1 mg/kg和432.6 mg/kg 2个给药组动物血清TC、TG、NEFA含量及肝组织中TC、TG、MDA含量、eIF2a表达量均低于模型组(P<0.01或P<0.05)。结论清肝降浊方治疗NAFLD作用机制可能是通过调节ERS信号蛋白异常表达,从而达到防治非酒精性脂肪肝病。

温肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马神经元的作用机制

目的:观察温肺降浊方对血管性痴呆(VaD)大鼠的作用机制。方法:建立VaD大鼠模型,随机分为模型组、西药组、温肺降浊方低剂量组、温肺降浊方中剂量组、温肺降浊方高剂量组,每组6只。另取6只大鼠设为假手术组,模型组和假手术组给予0.9%氯化钠溶液灌胃;西药组给予尼莫地平灌胃;温肺降浊方各剂量组给予相应剂量的温肺降浊汤灌胃。给药28 d后,采用Morris水迷宫实验评价各组大鼠学习记忆能力;HE及Nissl染色法进行组织病理学检测。采用RT-qPCR和Western blot检测各组大鼠海马组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)/肌醇需求酶1α(IRE1α)/剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1S)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路相关mRNA和蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数则减少。与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区病理损伤严重,神经元细胞明显减少,尼氏小体数量明显减少,SIRT1 mRNA和蛋白表达则降低(均P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠IRE1α、XBP1S、CHOP mRNA和XBP1S、CHOP蛋白及p-IRE1α/IRE1α明显升高(均P<0.01)。与模型组比较,温肺降浊方中剂量组、温肺降浊方高剂量组、西药组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加(均P<0.05)。与模型组比较,西药组和温肺降浊方各剂量组大鼠海马CA1区病理损伤减轻,神经元细胞数量增加,尼氏小体数量增加。与模型组比较,西药组和温肺降浊方各剂量组SIRT1 mRNA和蛋白表达升高,且温肺降浊方高剂量组和西药组表达较高。IRE1α、XBP1S、CHOP mRNA和XBP1S、CHOP蛋白以及p-IRE1α/IRE1α水平降低,且温肺降浊方高剂量组和西药组水平更低(均P<0.01)。结论:温肺降浊方通过激活SIRT1/IRE1α/XBP1S/CHOP信号通路,减轻VaD大鼠海马神经元区病变,从而发挥改善VaD大鼠认知能力的作用。

温肺降浊方对血管性痴呆模型大鼠ERK1/2信号通路相关蛋白的影响

目的:观察温肺降浊方对血管性痴呆(VaD)模型大鼠细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)信号通路的影响,探讨其治疗VaD可能的相关作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组和模型组(等体积0.9%氯化钠溶液灌胃),温肺降浊方低、中、高剂量组(1.5、3、6 ml剂量灌胃)。观察造模后大鼠水迷宫评分和HE病理变化,免疫组化、RT-qPCR和Western blot检测海马组织中ERK1/2、钙蛋白酶(Calpain)、Bcl-2关联死亡启动子重组蛋白(Bad)、B淋巴细胞瘤-xl(Bcl-xl)蛋白和mRNA表达情况。结果:与假手术组相比,模型组和温肺降浊方各剂量组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台次数缩短(P<0.05),海马组织形态稀疏、水肿及核缩小;海马组织ERK1/2、Calpain、Bad蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),Bcl-xl蛋白和mRNA表达下降(P<0.05)。与模型组比较,温肺降浊方高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增加(P<0.05),海马组织形态逐渐紧密、水肿减少,数量增多;海马组织ERK1/2、Calpain、Bad蛋白和mRNA表达下降(P<0.05),Bcl-xl蛋白和mRNA表达升高(P<0.05)。结论:血管性痴呆可能与大鼠海马中的ERK1/2、Calpain、Bad蛋白升高及Bcl-xl蛋白降低有关,温肺降浊方可以抑制VaD大鼠海马中的ERK1/2通路激活,减少神经细胞凋亡,延缓疾病进展,改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。

通补降浊方联合针刺辅治轻中度系统性红斑狼疮脾肾不足兼湿瘀交阻型疗效观察

目的:观察通补降浊方联合针刺辅治轻中度系统性红斑狼疮(SLE)脾肾不足兼湿瘀交阻型的疗效。方法:78例分为参照组39例和研究组39例。两组均用西药对症治疗,研究组加用通补降浊方联合针刺治疗。结果:研究组总有效率高于参照组(P<0.05)。治疗后研究组面部红斑灼热、腰膝酸软痛、关节疼痛、神疲乏力等证候积分均低于参照组(P<0.05)。治疗后研究组SLE病情活动程度评分(SLEDAI)、24h蛋白尿定量(24hTUP)、血素氮(BUN)、血肌酐(Scr)低于参照组(P<0.05)。治疗后研究组补体C3、补体C4高于参照组,血清C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)低于参照组(P<0.05)。结论:通补降浊方联合针刺辅治轻中度SLE脾肾不足兼湿瘀交阻型疗效较好。

健脾降浊方治疗脾虚痰浊型肥胖合并高脂血症患者的临床观察

观察健脾降浊方治疗脾虚痰浊型肥胖合并高脂血症的疗效。方法 72例肥胖合并高脂血症患者随机分为观察组及对照组,每组36人,对照组予以基础治疗,观察组在对照组的基础上加用中药方健脾降浊方,治疗周期为12周。观察治疗前后患者TG、TC、LDL-c、BMI以及中医证候评分。结果 治疗后两组TG、TC、LDL-c、BMI均较前有明显下降(p<0.05),且观察组效果优于对照组(p<0.05)。结论 健脾降浊方治疗脾虚痰浊型肥胖合并高脂血症临床效果肯定。

理脾降浊方治疗2型糖尿病的网络药理学和蛋白质组学研究

目的:研究理脾降浊方(LPJZF)治疗2型糖尿病(T2DM)的潜在分子机制。方法:首先,基于网络药理学筛选出LPJZF中的活性成分和作用靶点,通过基因表达综合数据库筛选出与T2DM相关的差异表达基因,并运用蛋白质-蛋白质相互作用、基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析LPJZF在治疗T2DM中的作用靶点和通路。其次,用LPJZF对T2DM大鼠进行干预,采用蛋白质组学鉴定差异蛋白,然后用KEGG和GO分析探究LPJZF干预T2DM的潜在机制。最后,运用分子对接技术评估T2DM潜在靶点与LPJZF活性成分之间的结合亲和力。结果:网络药理学分析共筛选出LPJZF干预T2DM的63个有效成分和135个靶点;蛋白质组学共鉴定出LPJZF干预T2DM的964个差异表达蛋白,以及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、核因子κB和叉头框蛋白O(FoxO)等4条关键通路;分子对接结果显示,T2DM相关蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、表皮生长因子受体(EGFR)、肿瘤蛋白P53(TP53)、热休克蛋白90 kDa αA类成员1(HSP90AA1)和小鼠双微体2(MDM2)与LPJZF中的黄芩素、芒柄花黄素、山柰酚、汉黄芩素、β-谷甾醇和豆甾醇具有良好的亲和力。结论:LPTZF能有效改善胰岛素抵抗,促进胰腺B细胞再生,是治疗T2DM的有效方剂。

纤维支气管镜肺泡灌洗术联合清肺降浊方治疗重症肺炎的效果

目的探讨纤维支气管镜肺泡灌洗术联合清肺降浊方治疗重症肺炎的效果。方法选取2021年1月至2022年12月商丘市立医院收治的72例重症肺炎患者为研究对象,采用随机数字表法将其分为观察组(36例)及对照组(36例),两组均接受常规治疗,对照组在常规治疗基础上结合纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗,观察组在对照组基础上联合清肺降浊方治疗,对比两组疗效。结果观察组体温恢复时间、机械通气时间、肺不张恢复时间、呼吸衰竭好转时间、咳嗽消失时间、住院时间均短于对照组(P<0.05);治疗后两组咳嗽、痰壅、气促评分降低,且观察组治疗后以上评分低于对照组(P<0.05);治疗后两组动态顺应性(Cdyn)升高,吸气阻力(RAW)、呼吸做功(WOB)降低,且观察组治疗后Cdyn高于对照组,RAW、WOB低于对照组(P<0.05);治疗后两组降钙素原、白介素-6、C反应蛋白、白细胞计数降低,且观察组治疗后以上指标均低于对照组(P<0.05),两组均未出现严重不良反应。结论纤维支气管镜肺泡灌洗术联合应用清肺降浊方在重症肺炎中应用较佳,可改善患者中医证候、呼吸动力学,降低机体炎症反应水平,促进患者恢复,值得在临床推广应用。

益肾活血降浊方灌肠联合尿毒清颗粒治疗慢性肾衰竭患者的临床效果

目的探讨益肾活血降浊方灌肠联合尿毒清颗粒治疗慢性肾衰竭患者的临床效果,为临床治疗提供参考。方法选取2022年3月至2024年1月靖边县人民医院收治的180例慢性肾衰竭患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各90例,对照组采用尿毒清颗粒治疗,观察组采用益肾活血降浊方灌肠联合尿毒清颗粒治疗。比较两组患者临床疗效、中医证候积分、肾功能指标[尿酸(UA)、肌酐清除率(Ccr)、β2-微球蛋白(β2-MG)、尿素氮(BUN)]水平、炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)]水平、不良反应发生情况。结果两组患者临床疗效、不良反应总发生率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组患者治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者主证、次证积分及UA、β2-MG、BUN、IL-6、IL-8、TNF-α、CRP水平均降低,且观察组均低于对照组;两组患者Ccr水平均升高,且观察组高于对照组(均P<0.05)。结论益肾活血降浊方灌肠联合尿毒清颗粒治疗慢性肾衰竭患者的临床效果较好,可有效缓解疾病症状,改善肾功能,减轻炎症反应,且安全性较高,值得临床应用。

基于胆碱能系统探讨益肺宣肺降浊方抗血管痴呆的作用研究

目的 探讨益肺宣肺降浊方通过胆碱能系统抗血管痴呆的作用及机制。方法 建立中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)大鼠血管性痴呆模型;给予益肺宣肺降浊方及联合应用胆碱受体拮抗剂山莨菪碱及其激动剂毛果芸香碱。具体分组:假手术组,模型组,益肺宣肺降浊方治疗组,益肺宣肺降浊方联合山莨菪碱组,益肺宣肺降浊方联合毛果芸香碱组,石杉碱组。水迷宫实验检测动物神经行为学;苏木精-伊红(HE)染色检测海马组织病理;透射电镜检测海马组织细胞超微结构;免疫荧光检测海马组织神经元MAP2及突触蛋白Synapsin表达。结果 益肺宣肺降浊方能有效提高血管性痴呆动物的学习和记忆能力,对海马组织病理改变具有显著的缓解作用,对神经元树突生长异常以及海马组织细胞超微结构的改变具有明显的改善作用。山莨菪碱有拮抗而毛果芸香碱有协同益肺宣肺降浊方对血管性痴呆动物的作用。结论 益肺宣肺降浊方可能通过调控胆碱能系统缓解血管性痴呆动物海马组织的病理改变、神经元细胞的超微结构改变、神经元突触生长异常从而改善血管性痴呆的认知功能障碍。

升清降浊方治疗神经源性直立性低血压合并卧位高血压的随机对照研究

目的观察升清降浊方治疗神经源性直立性低血压(neurogenic orthostatic hypotension,nOH)合并卧位高血压(supine hypertension,SH)的临床疗效。方法根据纳入与排除标准选取气虚痰瘀证nOH合并SH患者110例,采用随机数字表法分为试验组(55例)和对照组(55例)。试验组服用中药升清降浊方,1剂/d,100 mL/次,2次/d;对照组服用盐酸米多君,2.5 mg/次,2次/d,若临床观察期间SH加重需药物治疗,予睡前加服氯沙坦钾;两组均予健康教育、生活方式改善及家庭血压、心率监测指导;疗程8周。评价两组临床疗效,观察治疗前后两组中医证候评分、卧立位血压、直立性低血压自评量表(Orthostatic Hypotension Questionnaire,OHQ)评分。结果试验组总有效率为70.91%(39/55),显著优于对照组(41.82%,23/55)(P<0.05)。治疗后两组中医证候评分均较治疗前改善(P<0.05),试验组优于对照组(P<0.05)。两组立位收缩压均有升高(P<0.05),对照组优于试验组(P<0.05);两组立位舒张压均有升高(P<0.05),差异无统计学意义(P>0.05)。试验组卧位收缩压略有下降,舒张压波动不明显,与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组卧位收缩压、舒张压均显著高于治疗前(P<0.05)。两组OHQ评分均较治疗前改善(P<0.05),差异无统计学意义(P>0.05)。临床观察期间两组患者均未出现不良反应。结论升清降浊方治疗气虚痰瘀证nOH合并SH患者安全、有效,可改善患者症状,并可能具有调节SH的潜在作用。

名中医顾宁创制化湿降浊方辨治高尿酸血症经验

高尿酸血症(HUA)是机体嘌呤代谢紊乱引起的代谢异常综合征之一,易造成痛风,也会引起或加重多种心血管疾病。名中医顾宁指出,HUA与中医学“痹症”“湿毒”等病证相似,主要病因病机为不良饮食、生活习惯等,致脾胃运化功能受损,清浊运化功能失司,湿浊内蕴,尿酸代谢失常。从湿浊内蕴论治HUA,即是从尿酸产生的源头进行干预,是中医学治病求本的体现。顾宁提出祛湿化浊是治疗HUA的基本大法,创立“化湿降浊方”,化裁自经典名方四妙散,由土茯苓、泽泻、黄柏、麸炒苍术、玉米须、川牛膝、木瓜等组成。化湿降浊方以祛湿、化浊为主,以利尿、清热为辅,减少尿酸合成,促进尿酸排泄,为HUA的中医药治疗提供了思路与方法。

益肺宣肺降浊方对星形胶质细胞-神经元氧糖剥夺损伤的缓解作用及其可能机制

目的 分析益肺宣肺降浊方对星形胶质细胞-神经元氧糖剥夺(OGD)损伤的缓解作用,并基于胆碱乙酰转移酶(ChAT)、α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)及炎症因子探讨其可能的作用机制。方法 (1)制备对照血清及益肺宣肺降浊方含药血清。(2)分离培养新生大鼠海马星形胶质细胞和神经元。将细胞分为对照组、OGD组、OGD+YFXF组、OGD+YFXF+山莨菪碱组。在对照组中,常规培养原代海马神经元和星形胶质细胞;在OGD组、OGD+YFXF组、OGD+YFXF+山莨菪碱组中,建立星形胶质细胞-神经元OGD模型,并分别使用含5%对照血清的高糖DMEM、含5%益肺宣肺降浊方含药血清的高糖DMEM、含5%益肺宣肺降浊方含药血清及100μg/mL山莨菪碱的高糖DMEM进行培养。(3)干预24 h后,观察各组细胞形态,检测星形胶质细胞和神经元的标志物表达情况,星形胶质细胞活性氧簇含量、ChAT活性、α7-nAChR和ChAT的mRNA和蛋白表达量,以及上清液乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6水平。结果 与对照组相比,OGD组星形胶质细胞及神经元标志物荧光强度减弱,神经元形态异常,星形胶质细胞的活性氧簇含量及上清液LDH、IL-1β、TNFα、IL-6水平增加,星形胶质细胞的ChAT活性降低且α7-nAChR、ChAT的mRNA和蛋白表达量下调(P<0.05)。与OGD组相比,OGD+YFXF组星形胶质细胞及神经元标志物荧光强度增强,神经元形态有所改善,星形胶质细胞的活性氧簇含量及上清液LDH、IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低,星形胶质细胞的ChAT活性增强且α7-nAChR、ChAT的mRNA和蛋白表达量上调(P<0.05)。与OGD+YFXF组相比,OGD+YFXF+山莨菪碱组的星形胶质细胞和神经元的标志物荧光强度减弱,神经元形态异常,星形胶质细胞的活性氧簇含量及上清液LDH、TNF-α水平增加,星形胶质细胞的α7-nAChR mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05)。结论 益肺宣肺降浊方可能通过上调海马星形胶质细胞中α7-nAChR的表达、增强ChAT活性、抑制炎症反应,来缓解星形胶质细胞-神经元OGD损伤,这或许是该方改善缺血再灌注损伤介导的血管性痴呆的作用机制。

益肺宣肺降浊方通过EGFR调节PI3K/Akt-MAPK/Erk通路改善血管性痴呆大鼠的记忆

目的 探讨益肺宣肺降浊方通过表皮生长因子受体(Objective Epidermal growth factor receptor, EGFR)调节PI3K/Akt-MAPK/Erk通路改善对血管性痴呆(VaD)的作用及机制。方法 建立大脑中动脉栓塞法(Middle Cerebral Artery Occlusion, MCAO)大鼠血管性痴呆模型;给予益肺宣肺降浊方联合PTEN、EGFR和MAPK抑制剂,进行行为学实验,并运用Western Blot、免疫荧光、电镜透射等技术检测益肺宣肺降浊方对VaD可能通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路作用机制进行探索。结果 益肺宣肺降浊方呈剂量依赖性改善VaD大鼠的记忆能力及脑海马组织的病理、降低神经元凋亡。上调EGFR激活PI3K/Akt信号通路与MAPK/Erk信号通活性。结论 益肺宣肺降浊方对VaD大鼠的作用可能通过VEGF受体EGFR调节PI3K/Akt信号通路与MAPK/Erk信号通活性,以及PI3K/Akt与raf1-MAPK/Erk的串扰作用,增强Erk1/2磷酸化,进而促进神经细胞存活、神经元形态,最终达到修复记忆能力,治疗血管性痴呆的作用。

基于微生物-肠-脑轴理论探讨温肺降浊方治疗血管性痴呆症的作用机制

血管性痴呆(Vascular Dementia,VaD)是一种以认知和记忆障碍为主要临床表现的痴呆类型,其发病主要因脑血管病变引起。该病为临床常见的中枢神经退行性疾病,是老年性痴呆的第二大病因,其发病率仅次于阿尔茨海默病,在中医学上属于“痴呆”“善忘”等范畴。随着社会人口结构不断老龄化和脑血管疾病的增加,该病的发病率呈指数式上升,严重危害人类的身心健康,也给家庭、社会和国家带来沉重的经济负担。不同于阿尔茨海默病,VaD为唯一可以防治的痴呆,近年来越来越多的研究将VaD作为脑血管疾病的关注重点。随着分子生物学技术的不断发展,微生物-肠-脑轴理论在抑郁症、脑卒中、痴呆等神经系统疾病中的作用受到广泛关注,越来越多的研究发现肠道内环境的紊乱与VaD的发生与发展密不可分,肠道菌群不仅可以通过神经递质、炎症反应等多种途径影响VaD的发生发展,还能够利用肠-脑轴的突触作用对中枢神经系统进行靶点调控,从而参与VaD的发病过程。近年来大量研究证实,中药介导的脑肠交互作用与VaD的发生发展关系密切;而其具体机制可能与中药单药及复方可调节肠道菌群、恢复肠稳态有关。中医扶阳学派弟子胡跃强教授善于运用“温肺降浊”的扶阳法论治VaD,并总结出其经验方“温肺降浊方”指导临床,疗效显著。文章基于此探讨温肺降浊方治疗VaD的作用机制,现介绍如下。

通脉降浊方治疗冠心病有效性及安全性的系统评价

目的旨在系统评价通脉降浊方治疗冠心病的有效性及安全性。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网、Pubmed、EMbase、Cochrane Library数据库,检索时限为数据库建库至2022年9月1日。共纳入16篇文献,合计1338例研究对象。根据Cochrane应用手册使用RoB2软件对纳入文献进行质量评价,应用Revman 5.4软件进行分析。结果通脉降浊方联合西医常规治疗(试验组)相较于西医常规治疗(对照组),试验组可以显著减少心绞痛发作情况[相对危险度(relative ratio,RR)=1.20,95%置信区间(confidence interval,CI):1.14~1.26,P<0.001],显著改善心电图缺血表现(RR=1.25,95%CI:1.13~1.37,P<0.001),提升高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平[均数差(mean difference,MD)=0.15,95%CI:0.11~0.20,P<0.001],降低低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平(MD=–0.40,95%CI:–0.63~–0.16,P=0.001),且具有良好的安全性。结论通脉降浊方联合西药标准化治疗,在减少心绞痛发作情况、改善心电图缺血表现、改善血脂水平方面优于单纯西药标准化治疗,且具有良好的安全性。

健脾补肾降浊方辅治慢性肾衰脾肾气虚型临床研究

目的:观察健脾补肾降浊方辅治慢性肾衰脾肾气虚型的疗效。方法:80例随机分为对照组38例和研究组42例,两组均采取控制饮食、调节血糖、血压、血脂、利尿、平衡机体酸碱度以及水电解质等基础治疗,研究组加用健脾补肾降浊方治疗。结果:研究组总有效率高于对照组(P<0.05)。两组治疗后中医证候积分均较治疗前降低(P<0.05),且研究组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后BUN与Scr均较治疗前降低、Ccr均升高(P<0.05),且研究组治疗后BUN与Scr均低于对照组、Ccr高于对照组(P<0.05)。结论:健脾补肾降浊方辅治慢性肾衰脾肾气虚型疗效较好。