携带芋兰属LATERAL SUPPRESSOR(LS)-EGFP融合基因植物表达载体的构建

LATERAL SUPPRESSOR(LS)是GRAS家族参与植物分生组织发育的转录因子,是控制植物分枝的关键基因。增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)是目前应用广泛的分子生物学报告基因之一,为筛选转基因植株提供了简便有效的方法。为了探讨LS基因在青天葵及其同属植物广布芋兰中的功能,本研究利用降落-重叠PCR(Touchdown-Overlap Extension PCR,TD-OE PCR)方法,分别构建了两种芋兰属植物LS基因和EGFP融合基因。通过酶切和连接的方法,将融合基因构建到植物双元表达载体p RI 101-AN DNA中,成功获得了两个携带芋兰属植物LS-EGFP融合基因的植物表达载体p RI 101-LS-EGFP,并成功转化至农杆菌,下一步拟用于转化拟南芥,为深入研究该基因功能提供基础。