高效降解棉酚菌株的选育及脱毒条件的研究

From mildewed cottonseed cake and stock cultUres of mold and yeast We select more than ten strains of yeastS and molds which can degrade cotton Phenol. At last we got four strains which can degrade cotton phenol highly effeted after mutagenized by physical and chemical factors and induced by cotton Phenol. They belong to Candida tropicalis, Torulopsis candida, Aspergillus flavus and ASPergillus niger. By small and medium size fermenfations, the content of dissociated cottom Phenol all reach safe criterion (the lowest dissociated cotton phenol content is 220mg/ in the defoxicated cottonseed cake), compared with FeSO4 method, defoxicated cottonseed cake looks and taStes well and the content of protein and amino acid are highly enhanced as will.

高效降解棉酚菌种的选育及小试工艺条件的研究

从霉变的棉籽饼和现已收集保藏的部分霉菌和酵母中分离、选育了10多株能降解棉酚的酵母和霉菌,再经理化因子诱变和棉酚诱导驯化,最后获得了4株高效降解棉酚的菌株,它们分别属于假丝酵母、球拟酵母、黄曲霉和黑曲霉等。通过对棉籽饼固态发酵小型试验,脱毒后棉籽饼中游离棉酚的含量均达到安全的标准(最低游离棉酚的含量为220PPm);脱毒后的棉籽饼与硫酸亚铁法相比,外观色泽好、口感好,且蛋白质和氨基酸的含量有明显地提高。

高效降解棉酚菌株的筛选鉴定及毒性试验

为了筛选一株能高效降解棉籽饼中棉酚毒素的菌株,以棉酚为唯一碳源,从棉田土壤中分离筛选对棉酚具有降解作用的菌株,得到具有较高降解活性的菌株M-9,其降解率达到94.74%,对其进行了菌株形态观察和生理生化鉴定并结合其16S rDNA序列,初步确定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。通过对M-9菌株的脱毒效果研究表明,其具有降解棉籽饼中游离棉酚的能力,脱毒后棉籽饼中游离棉酚的含量降至33.18 mg/kg,符合中国国家标准饲料卫生标准规定(GB13078—2001):饲料原料棉籽饼中游离棉酚含量≤1200 mg/kg。并进行毒性饲喂试验,从而确定菌株M-9处理后的棉籽饼粉对小白鼠无毒性。

棉籽饼中棉酚降解菌株的分离及脱毒效果初探

从棉田土壤中分离筛选对棉酚具有降解作用菌株,得到1株具有较高降解活性的菌株,命名为M12。经鉴定,初步确定菌株M12为鲁氏毛霉(Mucor rourianus),进一步脱毒研究表明,菌株M12具有降解棉籽饼中游离棉酚的能力,降解率在80%以上,具有进一步开发的潜力。

游离棉酚降解产物四甲氧基棉酚致小鼠精子畸形效应的生殖毒性研究

目的研究游离棉酚降解产物四甲氧基棉酚的生殖毒性。方法采用小鼠精子畸变实验,将60只小鼠随机分为5组,空白组(40mg/kg,超纯水)、阳性对照组(40mg/kg,环磷酰胺)、四甲氧基棉酚的高(180mg/kg)、中(90mg/kg)和低(45mg/kg)剂量组,每组小鼠灌胃体积(20mL/kg体质量),每天1次,连续给药5d。取小鼠副睾制成精子涂片观察和计算各组小鼠精子畸形率。结果与正常小鼠精子相比,四甲氧基棉酚可导致小鼠精子形成香蕉型、胖头型和双尾型畸形类型。与空白组相比,阳性对照组小鼠精子畸形率为(8.20±0.31)%,四甲氧基棉酚高剂量组小鼠精子畸形率为(4.40±0.51)%、中剂量组小鼠精子畸形率为(3.00±0.33)%、低剂量组小鼠精子畸形率为(1.80±0.44)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论游离棉酚降解产物四甲氧基棉酚可导致小鼠精子畸形,具有生殖毒性。

棉酚降解酶及热带假丝酵母ZD-3对棉籽粕脱毒的对比研究

试验旨在研究对比棉酚降解酶及热带假丝酵母ZD-3对棉籽粕中游离棉酚与营养物质的影响,从而评定棉酚降解酶对棉籽粕脱毒的效果。利用棉酚降解酶及热带假丝酵母ZD-3对棉籽粕分别进行酶解与固态发酵。检测原棉籽粕及处理后棉籽粕中游离棉酚与营养物质的含量及蛋白质分子质量分布。棉籽粕经棉酚降解酶酶解后,游离棉酚的含量与原棉籽粕相比极显著降低,棉籽粕的脱毒率为92.67%,较热带假丝酵母ZD-3发酵后的脱毒率上升了4.46%,经棉酚降解酶酶解后及热带假丝酵母ZD-3发酵后的棉籽粕,两者的营养物质含量差异不显著,均未检测到棉籽粕中大分子蛋白质降解成小分子蛋白质的现象。棉酚降解酶可以很好的代替热带假丝酵母ZD-3应用于棉籽粕的脱毒,同时棉酚降解酶酶解脱毒较热带假丝酵母ZD-3固态发酵能够极大地缩短时间。

棉酚降解酶对棉籽粕酶解脱毒的条件参数优化

【目的】优化棉酚降解酶对棉籽粕酶解脱毒的条件参数。【方法】采用4因子4水平的正交试验设计,以游离棉酚的含量为指标筛选出棉籽粕的最佳酶解条件参数。【结果】棉酚降解酶对棉籽粕酶解脱毒的最佳条件参数为温度35℃、时间1.5h、添加量3%、底物水分35%。【结论】筛选出的酶解脱毒参数具有显著的效果,在最优酶解参数条件下,通过试验验证,棉籽粕中游离棉酚的含量由341.02mg/kg降至37.01mg/kg,游离棉酚脱毒率可达89.15%,可以应用于对棉籽粕游离棉酚的酶解脱毒。

棉籽油中游离棉酚脱毒评价新方法

由于棉籽油中游离棉酚在常温下极易降解(30 d内降解80%以上),现有国标方法很难反映棉籽油的脱毒情况。该文通过自制未脱毒棉籽油样品,考察游离棉酚在棉籽油中的降解情况,确定主要游离棉酚降解产物并鉴定其化学结构,建立棉籽油中主要游离棉酚降解产物的含量测定方法。经LC-FTICRMS质谱仪检测,主要游离棉酚降解产物m/z为573.250 33,推测其分子式为C_(34)H_(37)O_8,鉴定结构为四甲氧基棉酚。对24批市售棉籽油样品进行检测,其中20批棉籽油样品检测到主要游离棉酚降解产物,含量为0.139~0.912μg/m L。通过测定棉籽油中主要游离棉酚降解产物反映游离棉酚的脱毒情况,证明该方法切实可行,可为新疆地区棉籽油的生产和监管提供有效检测方法。

微生物发酵技术在新疆棉籽壳饲料化的应用研究进展

棉籽壳作为一种高蛋白日粮的代替粗饲料,在牲畜饲料中有广泛应用潜力,但棉籽壳中含有抗营养因子——棉酚,影响其饲用价值。利用微生物发酵技术不仅可以提高棉籽壳的利用率,还可以提高饲料的营养价值。文章主要介绍了棉籽壳在新疆的饲料化应用情况、棉酚的危害、微生物发酵在棉籽壳饲料化过程中的优势、棉酚降解菌及菌群对棉籽壳脱毒效果的研究、棉籽壳脱毒微生物发酵工艺优化及饲喂效果以及微生物发酵技术在新疆棉籽壳饲料化中的研究方向和发展趋势,以期为棉籽壳在新疆的饲料化应用提供参考。

棉籽对反刍动物的营养价值和代谢

我国是产棉大国,副产品棉籽是重要的饲料资源,棉籽中含有棉酚,对单胃动物的利用受到限制,但用作反刍动物饲料有很大的潜力。因此,近些年来国内外关于棉籽对反刍动物的营养价值及应用进行了很多研究,现就全棉籽的养分含量、瘤胃消化率、全消化道消化率、棉酚含量、瘤胃微生物对棉酚的降解、体外脱毒、影响血液棉酚质量浓度的因素、棉酚的代谢与奶牛血液指标和健康的关系、对瘤胃微生物蛋白质合成、对奶牛繁殖和对产奶的影响等进行论述。

诱变选育棉籽粕高效脱毒菌株

以橄榄假丝酵母(Candida oleophila)、克雷克酵母(Kloeckera lindneri)、红酵母(Rhodotheceglutinis)为出发菌株,采用物理诱变剂紫外线和化学诱变剂硫酸二乙酯(DES)对其进行单一诱变及复合诱变处理,选育出棉酚降解率较高的菌株,并确定单一诱变和复合诱变的最佳诱变条件.结果表明:出发菌株经紫外线和硫酸二乙酯诱变处理后再进行有利突变株的筛选,通过初筛、复筛,获得6株棉酚降解率较高的突变株(GJ-Z-25、GJ-D-25、GJ-Z-25-D-25、GJ-Z-20-D-20、HJ-D-20、HJ-Z-20-D-20),棉酚降解率分别高达90.69%、91.40%、93.78%、89.64%、90.78%和89.56%,比诱变前分别提高了50.00%、51.20%、55.14%、48.29%、26.33%和24.63%;橄榄假丝酵母的复合诱变效果好于单一诱变,最佳诱变条件是紫外线照射25 s,DES处理25 min;红酵母的DES诱变效果好于复合诱变,最佳诱变条件是DES处理20 min.通过本实验获得了高浓度棉酚耐受菌株,棉酚的降解率极显著提高,从而使棉粕营养价值显著提高.