四川自然发酵香肠中组胺降解菌的筛选鉴定及初步应用

采用产生物胺显色培养基,从20个四川自然发酵香肠样品中共分离得到不产生物胺的菌株256株。以肉制品发酵剂相关标准作为初筛条件得到菌株17株,且对组胺均有不同程度的降解。对组胺降解率较高的5株菌的鉴定结果表明,19号、41号和46号分别为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、混淆魏斯氏菌(Weissella confusa),47号和48号均为屎肠球菌(Enterococcus faecium)。19号、41号和46号菌株之间无明显拮抗作用,具有较好的生长能力和产酸能力,能耐受低温、低pH、60 g/L的食盐及150 mg/kg的亚硝酸盐,且混合菌株比单一菌株能更好地抑制产胺菌的生长。香肠成熟30 d时,接种组的组胺含量(46.56 mg/kg)比未接种组的组胺含量(66.77 mg/kg)降低了30.26%(p<0.05)。研究结果表明,在发酵香肠生产中接种可降解组胺的乳酸菌,能有效降低产品中组胺含量,提高发酵香肠的食用安全性。

鲭鱼中组胺降解酶产生菌的分离筛选和基本酶学性质研究

鲭鱼亚目的海洋鱼类在捕获后易产生组胺,导致鲭鱼中毒.为研究组胺消长与微生物的关系,通过平板分离和摇瓶发酵,以荧光光度法测定酶活力,从鲭鱼(Pneumatophorus japonicus)皮肉、内脏和腮中分离筛选组胺降解菌,并对所产组胺降解酶的酶学性质进行研究和分析.结果表明:自内脏中分离筛选到一株组胺降解酶活力较高的革兰氏阴性杆菌,从生长产酶曲线推测该酶为初级代谢产物.该酶反应的最适温度为35℃,最适pH为7.2.在pH 6.0～8.0和温度20～35℃范围内有较好的稳定性.Mn2+、Ca2+、Na-、Mg2+、K+等金属离子存在时酶活力增加,Zn2+、Al3+、Fe3+、Fe2+、Cu2+等金属离子存在时,酶活力下降,在EDTA存在条件下酶活力完全丧失.对其动力学研究表明,在甘氨酸-NaOH缓冲反应体系中,最大反应速度Vmax=156.25 U.mL-1,米氏常数Km=0.22 mg.mL-1.组胺降解菌国内还未见报道,研究结果对进一步研究水产品组胺生物控制技术具有重要意义.

鱼露中组胺降解菌的分离筛选及耐受性

生物胺(biogenic amines)在某些食品尤其是发酵食品中广泛存在,具有一定的食用安全隐患。为获得用于鱼露等发酵食品的生物胺降解菌,从天然发酵鱼露中采用双层显色培养基法初步筛选出不产生物胺的菌株,再用高效液相色谱(HPLC)法进行复筛,得到一株具有高效组胺降解能力的菌株MZ5。经鉴定该菌株为库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii),该菌株在组胺质量浓度10~200 mg/L、乙醇体积分数0~5%、pH 5~7、NaCl质量浓度0~8 g/dL范围内均表现出较高的组胺降解活性。当初始组胺质量浓度为50 mg/L,pH为7时,组胺降解率高达98.61%。菌株Pichia kudriavzevii对乙醇、pH、盐具有较好的耐受性,可作为发酵制剂,该研究结果为开发发酵食品生物胺降解剂提供理论基础。

发酵鲭鱼中一株组胺降解菌的系统发育分析及特性研究

为筛选出具有优良组胺降解能力的细菌,并探索其在发酵食品中的应用,使用乳酸细菌(MRS)、结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBDA)和2216E琼脂培养基对传统发酵鲭鱼(Scomber japonicus)中的组胺降解菌进行分离纯化,测定其生长、产酶特性及对发酵鲭鱼生物胺的降解作用。结果表明,菌株V-TB-2-5具有较高的降组胺活性,通过16S rRNA基因序列系统发育学分析结合形态特征确定为产氮假单胞菌(Pseudomonas azotoformans)。在营养肉汤培养基中,该菌的生长和产酶条件范围为20~40℃、pH值5~8、NaCl浓度0~3.5%(质量分数w/v),最适生长和产酶条件为30℃、pH值6、1.5%NaCl。酶反应的最适条件为30℃、pH值7。Mn^(2+)、Mg^(2+)和K^(+)等金属离子对酶有激活作用,Fe^(3+)或EDTA则有抑制作用。在传统发酵鲭鱼中,人工强化接种菌株V-TB-2-5与对照组相比组胺含量明显下降,组胺降解率为18.2%~40.7%;同时,接种组中亚精胺含量下降极显著,而精胺则上升。本研究为菌株V-TB-2-5在水产品加工和贮藏过程中组胺生物降解的控制提供了应用依据。

基于高通量测序的鲭鱼加工副产物固态厌氧发酵过程分析

为了实现易产组胺的鲭鱼(Pneumatophorus japonicus)加工副产物综合利用产业化技术开发,对鲭鱼加工副产物进行了不灭菌的乳杆菌固态厌氧发酵,尝试生产饲料用新型活性蛋白源。系统监测了发酵过程中组胺、酸溶蛋白、挥发性盐基氮(Total volatile basic nitrogen,TVB-N)、pH的变化,通过高通量测序技术分析了发酵过程微生物群落的变化,对比分析了发酵前后抗原蛋白、游离氨基酸、脂肪酸成分的变化,以全面评价发酵过程中营养、活性成分和安全性的变迁。结果显示,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HSCC-LP121在提高酸溶蛋白含量、降低组胺积累、减少挥发性盐基氮产生方面综合效果最好。发酵30 d时组胺降低到0.629 g·kg^(−1)。这一数据和高通量测序结果表明,HSCC-LP121具有组胺降解能力,同时可抑制嗜冷杆菌属(Psychrobacter)和假单胞菌属(Pseudomonas)等潜在产组胺微生物的生长。该菌种还可抑制曲霉菌属(Aspergillus)等潜在危害真菌的生长,同时诱使一些生香酵母的生长。

鲭鱼中组胺降解菌的筛选鉴定和发酵条件初探

组胺是影响水产品食用安全和贸易的重要风险因子之一,目前关于组胺相关菌的研究大多集中在组胺产生菌方面。本文从冰鲜鲭鱼中分离筛选到1株高活力组胺降解菌T6,通过形态特征,生理生化检测和16S rRNA基因序列的系统发育学分析,确定该菌株属于嗜冷杆菌属Psychrobacter sp.。采用单因素对发酵条件进行优化。最佳发酵条件是:温度28℃,接种量4%,起始pH 7,种龄16 h,装液量50 mL/250 mL。本文筛选出的组胺降解菌,为利用生物方法控制水产品中组胺含量提供新思路。