应用原生质体融合技术构建高效降解胆固醇的乳酸菌

芽孢杆菌T1 2 - 1 与嗜热链球菌ST及嗜酸乳杆菌C3进行原生质体融合 ,获得两株高效降解胆固醇的乳酸菌融合子S T1 3- 37和C T2 4 - 8,它们可明显降低蛋黄乳、鲜肉糜和鲜鸡肝糜中的胆固醇含量 。

乳酸菌体外和体内降解胆固醇的机理及其应用

乳酸菌作为动物肠道的正常菌群,在维持动物肠道的微生态平衡和调节动物代谢方面发挥重要作用。本文总结了乳酸菌体外和体内对胆固醇的降解机制,并结合影响胆固醇降解效率的因素,阐述了其在动物生产中的应用效果及可能出现的问题,为其进一步研究及应用提供理论指导。

乳酸菌降解胆固醇的作用机理及其在动物中的研究现状

胆固醇是人体必需的营养成分,但随着人们生活水平的不断提高,人体摄入的胆固醇量普遍偏高,而血清中胆固醇过高会引发高血压、冠心病、脑中风等心脑血管疾病,严重威胁着人类的健康。降低人体胆固醇含量的主要手段是减少体外摄入,

降解胆固醇马红球菌F21-1的分离、鉴定及其特性研究

利用以胆固醇为唯一碳源的选择性培养基,从豚鹿粪便样品中分离出1株降解胆固醇良好的菌株。经生理生化鉴定和16S rDNA基因序列分析,该菌株为马红球菌(Rhodococcus equi)。该菌株降解胆固醇的最佳碳源为胆固醇,最佳氮源为蛋白胨、硝酸铵复合氮;最佳培养条件:温度为32℃,初始pH值为8.0,胆固醇质量浓度为1.50 g/L。在该培养条件下培养24 h,胆固醇的降解率可达到71.95%。

从泡菜中筛选降解胆固醇的乳酸菌

采用半选择性培养基MRS从传统食品泡菜中筛选出 1 5株细菌 ,鉴定为植物乳杆菌。在MRSO -Chol培养基中对这些菌株进行体外胆固醇降解效果的研究 ,37℃培养 2 4h ,发现胆固醇降解量分别达到 90 5,75 3和 74 0 μg ml的ST1 0 1 5,ST1 0 0 9和ST1 0 1 0三株菌。采用MRSO培养基对所有实验菌株的胆汁耐受力进行了研究 ,发现不同菌株之间胆汁耐受力差异显著 ,但胆固醇降解量和胆汁耐受力之间没有必然的联系。

乳酸菌Lact.1和Lact.2降解胆固醇的研究

从发酵菠萝、桔子中分离选育到2菌株,经鉴定为乳酸菌.将菌株接种到含有胆固醇MRS-CHOL液体培养基中,在38℃条件下,恒温培养3d后,测定胆固醇的降解率、pH值和菌数的变化.结果表明2菌株都具有降解胆固醇能力,随着培养时间的延长和接种量的增加,降解率都呈现增加趋势;在基质中胆固醇浓度较低时,胆固醇降解率都逐渐增高,而当浓度不断增加时,胆固醇降解率都出现下降趋势.但2菌株之间又存在不同变化幅度.在降解过程中,pH值和菌数也相应发生了变化.

构建高效降解胆固醇的融合乳酸菌的研究

通过平皿计数法确定了嗜热链球菌ST、嗜酸乳杆菌C3和芽孢杆菌T12-1原生质体形成、再生和融合的最佳条件,以及筛选融合子的遗传标记物和选择培养基。在最佳条件下,ST、C3和T12-1的原生质体再生率分别为:10.5%、11.2%和8.6%;ST与T12-1的科间融合率约为4.6ⅹ10-6,C3与T12-1的科间融合率约为3.8ⅹ10-6 。比较了五种常用融合剂的促融效果,认为35% PEG6000促进原生质体融合的效果最好。

降解胆固醇乳酸菌株的体外筛选及其酸乳发酵特性研究

为筛选降解胆固醇、发酵酸乳、定植胃肠道的乳酸菌优良菌株,通过邻苯二甲醛法测定菌株体外降胆固醇能力,感官评价和质构仪测定降解菌株发酵酸乳能力,菌株在酸溶液、胆盐溶液、人工模拟胃液、人工模拟胰液中存活率考察胃肠道耐受性,筛选获得优良菌株,基于16S r DNA序列鉴定优良菌株。结果表明,250株供试菌株中只有8株胆固醇的降解率在40%以上,其中降解率最高的菌株"青A16"达54.64%,其发酵酸乳的感官评分和大多数质构指标值也最高,在4种体外模拟胃肠道溶液中存活率均达到了40%以上,分子生物学鉴定为耐久肠球菌。菌株"青A16"可作为开发功能性酸乳候选发酵菌株。

高效降解胆固醇乳酸菌的选育及其应用效果研究

随着生活水平的提高，胆固醇摄入过量带来的高脂血症、冠心病、动脉硬化等心血管疾病已经严重危害到人体健康。食物胆固醇被认为是继农药残留和激素之后又一个令消费者恐慌的危险因子。如何减少胆固醇摄入量，降低血液胆固醇水平的研究越来越受到关注。目前脱除食品中胆固醇主要有3种方法：物理法、化学法和生物法。

降解胆固醇的芽孢杆菌T12-1的培养条件研究

以胆固醇为惟一碳源和能源 ,从食肉动物雪豹肠道分离出一株胆固醇降解酶活力较高的 T12 - 1菌株 ,初步鉴定为好气性芽孢杆菌。经实验确定 ,其胆固醇降解酶产生的最适宜条件为培养温度 32℃ ,培养基p H6 .5～ 7。用 2 50 m L三角瓶装 6 0 m L培养基 ,振荡培养 10 h,培养基中酵母膏含量为 5g.L-1、胆固醇含量为 1g.L-1、吐温 80含量 1m L.L-1,其胆固醇降解酶活力可达 3.6 1× 10 -3 μU.m L-1。

构建高效降解胆固醇的融合乳酸菌的研究──(Ⅱ)原生质体融合及融合子的筛选

芽孢杆菌T12 -1与嗜热链球菌ST及嗜酸乳杆菌C3 进行原生质体融合 ,获得两株科间融合子S -T13 -3 7和C -T2 4 -8,它们对培养液中的胆固醇降解率分别为 5 4%和 78%。ST、C3 和T12 -1原生质体的再生率分别为 10 .5 %、8.6 %和 11.2 %,ST与T12 -1原生质体科间融合率约为 4.6ⅹ 10 -6;C3 与T12 -1原生质体科间融合率约为 3.8ⅹ 10 -6。

一株酸马奶乳酸菌分子生物学鉴定及降解胆固醇试验研究

从新疆伊犁农牧民传统发酵的酸马奶中分离筛选到呈革兰氏染色阳性,秆状,编号为H-1的菌株。通过对此菌株进行形态观察和普通生理分析,并测定该菌株降解胆固醇的活力,通过16S r DNA序列分析表明,分离菌株H-1与Lactobacillus casei具有100%相似性,说明此菌株即为干酪乳杆菌。使用ClustalX1.8程序和Mega2程序将该菌株与报道的相关乳酸菌进行系统发育分析,揭示了16S r DNA序列分析在菌株鉴定的正确性。

睾丸酮丛毛单胞菌降解胆固醇的培养条件研究

利用睾丸酮丛毛单胞菌(菌株c.test+act5、菌株c.test+tac、菌株c.test)具有消化甾醇这一特性,以胆固醇为底物筛选其降解甾醇的培养条件,使胆固醇降解酶的活力相对提高,从而为高效降解甾醇类物质的工程菌的筛选奠定基础.研究结果:最佳诱导时间14 h,培养基最佳pH7.0、最佳诱导温度30℃、及最佳装液量50 ml(250 ml摇瓶).在此条件下胆固醇降解酶活力:菌株c.test+act5为3.82×10-3U.ml-1、菌株c.test+tac为3.51×10-3U.ml-1、菌株c.test为2.68×10-3U.ml-1.

不同乳酸菌抗氧化作用和胆固醇降解能力的初步研究

为了筛选出具有良好抗氧化作用和胆固醇降解能力的乳酸菌,以商业化菌株Lactobacillus rhamnosus GG为阳性对照,评价了L.kefir BNCC 190565、L.acidophilus ATCC 4356、L.buchneri BNCC 187964、L.casei CICC 23184、L.plantarum subsp.plantarum CICC 20279这5株乳酸菌的基础益生活性、羟自由基清除能力、还原力和DPPH自由基清除率、降解胆固醇能力及α-葡萄糖苷酶抑制能力。结果表明,L.acidophilus ATCC 4356和L.plantarum subsp.plantarum CICC 20279具有最强的消化道耐受力及良好的益生特性;L.acidophilus ATCC 4356、L.plantarum subsp.plantarum CICC 20279和L.casei CICC 23184具有较强的抗氧化能力;6株菌对胆固醇的降解率均在50%以上,表现出了很强的胆固醇降解能力;L.buchneri BNCC 187964的α-葡萄糖苷酶抑制率显著高于L.rhamnosus GG,其余4株菌和L.rhamnosus GG没有显著性差异。对各项指标进行综合比较,发现L.acidophilus ATCC 4356和L.plantarum subsp.plantarum CICC 20279这2株菌有着突出的性能,具有很强的应用潜力。

高效降解胆固醇菌株的筛选及其在食品中的应用

目的:为开发低胆固醇系列食品,从多种富含胆固醇的动物性发酵食品中分离、筛选高效降解胆固醇的菌株。方法:将采集的25种样品,选择培养基Ⅰ连续传代培养,通过比较胆固醇降解率和酶活力,筛选出降解胆固醇能力较高的菌株,并研究其酶学特性。结果:筛选出的红球菌(Rhodococcussp.)R14-2和短杆菌(Brevibac-teriumsp.)R22-4对胆固醇底物溶液的降解率分别为97.5%和94.7%;对鲜肉糜中胆固醇的降解率分别为41.3%和40.5%,并在低温(0～10℃)时仍表现出一定的酶活性;将这两种菌株的粗酶液应用于乳、蛋及香肠制作中,降胆固醇效果明显且未见有不良风味。结论:利用酶法生物降解食品中胆固醇,不仅产物单一,而且对食品风味、营养的影响较小,适于开发低胆固醇系列食品。

降解食品中胆固醇的芽孢杆菌T12-1的筛选与应用研究

以胆固醇为惟一碳源和能源 ,从食肉动物肠道的 19份样品中筛选出有胆固醇降解酶活性的菌株 4 0株 ;通过比较 ,选出了在培养液中生长速度较快和产酸能力较强的 4株菌 ,进而选出胆固醇降解活性较高的菌株 T12 - 1;菌株 T12 - 1发酵上清液应用在蛋黄胆固醇降解中 ,作用显著 ;经动物试验 ,T12 - 1菌株在食品中应用安全、无毒。

具有降解胆固醇能力的益生菌菌株筛选

益生菌是通过多种作用机制来提供功效作用,其中包括提供胃肠道保护屏障,改变肠道内环境p H来提供非致病菌的增殖,从而增强宿主的免疫应答能力,产生抗菌物质与其在受体肠道中进行竞争。乳酸菌对于宿主肠道上皮细胞的黏附性具有菌株特异性而并非宿主特异性,由此可以采用体外模型来筛选所诉求的益生菌。双歧杆菌的黏附过程首先是通过非特异性接触,之后与受体结合,实验过程主要是通过菌株对胞外机制的黏附能力进行筛选具有高黏附特性的Bifidobacterium lactis。采用20株分离自健康人体肠道的Bifidobacterium lactis进行筛选,并进一步从具有功能性的菌株进行了高黏附性筛选、耐酸耐胆盐等筛选,其中筛选出1株各方面均具有良好抗逆性的Bifidobacterium lactis BLa80,对肠道上皮细胞的黏附率达到1.1%,胆固醇降解能力达到34.56%;非外源性保护条件下胃酸p H环境下的存活率达到21.47%,胆盐耐受性达到29.3%。所筛选出的菌株经过中国微生物研究所鉴定为乳双歧杆菌Bifidobacterium lactis,并命名为BLa80。

泡菜中具有胆固醇降解功能益生菌的筛选研究

从泡菜中筛选出6株菌株,对其做生理生化、胆固醇降解、耐胆盐性、耐酸性、抑菌性和抗氧化性实验。经初步判定所筛选菌株D1、D4和D6为链球菌属,D2、D3和D5为明串珠菌属,都具有胆固醇降解性,其中D1菌株降解性最好,其降解率在48 h达到81.57%,D1耐酸能力最强,胆盐耐受性仅次于D2菌株,且对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌具有较强的抑制作用,对DPPH自由基清除率达到33.88%,可将其作为发酵剂,为益生菌功能食品开发提供基础。

具有胆固醇降解能力的人源乳酸菌筛选及其特性研究

研究旨在筛选出具有降胆固醇能力的人源乳酸菌,为开发良好的乳酸菌产品提供依据。对公司自建菌库中的28株人源乳酸菌中进行胆固醇降解率的初步测定,筛选出3株降解能力较高的乳酸菌进行耐酸耐胆盐的特性试验,最终确定一株具有胆固醇降解能力及特性良好的人源乳酸菌。结果表明,28株人源乳酸菌中讲解率较高的6株乳酸菌分别为来自婴儿粪便源的格氏乳杆菌F020、F024和来源于母乳源格氏乳杆菌B1-26、B1-29以及母乳源罗伊氏乳杆菌B1-27、B1-28。对这6株乳酸菌进行体外胆固醇降解试验得到F024对胆固醇的同化量最高达到25.92%,F020的沉淀量最高达到了10.49%;B1-28的胆盐水解酶活性最高。将格氏乳杆菌F020、F024以及罗伊氏乳杆菌B1-28进行耐酸耐胆盐试验,pH 1.5时,3株乳酸菌均不耐受,pH 2.0和pH 3.03 h时,格氏乳杆菌F020的存活率超过100%;在0.3%的胆盐培养基中,格氏乳杆菌F0203 h存活率达到102.94%。本实验最终选出胆固醇降解率高并且特性良好的格氏乳杆菌F020,为进一步开发乳酸菌产品提供良好依据。

凝固型降胆固醇全蛋发酵饮料加工工艺研究

目的:以鲜鸡蛋为主要原料,通过乳酸菌发酵作用加工凝固型降胆固醇发酵全蛋饮料;方法:对嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、两岐双岐杆菌及其复合菌种的降胆固醇能力进行测定,选择嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌作为复合发酵菌种,对发酵基质配方和发酵条件进行优化;结果:确定全蛋液用量32%、葡萄糖用量1.25%、CMC—Na用量0.3%、卡拉胶用量0.2%、培养时间24h为优选条件,在优选条件下胆固醇降解率可达36.03%,且感官质量较好。