大鼠胃肠胰系统中降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

用免疫组织化学ABC法,对降钙素基因相关肽(CGRP)在大鼠胃肠胰系统中的分布进行了研究,结果表明:整个胃肠胰系统都有CGRP免疫反应阳性的神经纤维分布,在胃窦部和胰岛还分布有CGRP免疫反应阳性的内分泌细胞,这些结果说明,胃肠膜系统中的CGRP有两种来源,即来源于神经和内分泌细胞.文内还对CGRP在胃肠胰系统中的可能功能进行了讨论.

小鼠颌下腺降钙素基因相关肽的免疫组织化学定位

本文用免疫组织化学ＡＢＣ法，对小鼠颌下腺中降钙素基因相关肽（ＣａｌｃｉｔｏｎｉｃＧｅｎｅ－ＲｅｌａｔｅｄＰｅｐｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）的分布进行了观察。结果表明：小鼠颌小腔内有降钙素基因相关肽免疫反应神经的分布，它们主要分布于小叶间结缔组织中。此外，颗粒由管细胞也呈降钙素基因相关肽免疫反应阳性。提示降钙素基因相关肽可能参与颌下腺的分泌活动及血液循环等生理调节。

周围神经端端或端侧吻合后降钙素基因相关肽和P物质免疫组织化学的对比研究

目的 探讨周围神经端端或端侧吻合后神经递质降钙素基因相关肽 (CGRP)和 P物质 (SP)水平的变化。 方法 选取雌性 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为 5组 ,每组 4只 ;实验组为 4组 ,正常对照组为 1组。实验组 :切断双侧腓总神经。将左侧腓总神经远侧断端吻合至胫神经侧方 ,右侧行腓总神经端端吻合 ,术后 1、2、4和 2 7周于各时间点分别在神经吻合口、腰段脊髓和背根神经节处取材 ,每次 4只进行 CGRP和 SP的免疫组织化学染色。对照组 :不行神经切断及吻合术 ,1周后检测同上。 结果 实验组术后 1周在腰段脊髓后角和背根神经节中 CGRP和 SP的表达均显著减少 ,术后 4、2 7周 ,CGRP和 SP在腰段脊髓后角的表达逐渐恢复至接近正常水平 ,但在背根神经节中的表达却无显著变化。端端、端侧吻合的两侧 CGRP和 SP变化的趋势一致 ,但在腰段脊髓后角的 4个时间点的样本中 ,端端吻合的表达显著高于端侧吻合。对坐骨神经进行乙酰胆碱酯酶 (Ach E)、SP、CGRP和 PGP9.5染色显示神经纤维均可通过端端与端侧神经吻合口。 结论 再生的神经纤维可以通过端侧吻合口 ,端侧吻合中感觉神经的恢复与端端吻合相似 ,但恢复的程度稍差于端端吻合。

实验性腺胃癌大鼠甲状腺降钙素基因相关肽的免疫组织化学

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，在我国因患胃癌而死亡者居各种恶性肿瘤之首。甲状腺是体内的大内分泌腺，因此它与机体各部存在着密切关系。一般认为降钙素基因相关肽（CGRP）普遍存在于各个组织，参与机体许多重要生理功能的调节，在一些疾病的发病和治疗中也有十分重要的意义。甲状腺内CGRP与早期胃癌的关系至今未见报道。因此本实验通过大鼠腺胃癌模型来观察甲状腺CGRP的免疫组织化学变化，进一步了解胃癌与甲状腺结构与功能之间的关系，为探讨机体自然抗病机制提供形态学依据。

顿抑心肌组织降钙素基因相关肽的免疫组织化学研究

采用大鼠心肌顿抑模型，用免疫组织化学方法观察了顿抑心肌组织中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的改变。结果发现心脏中存在ＣＧＲＰ阳性免疫神经纤维，尤其是心房、冠脉周围、乳头肌以及心室肌中。顿抑心肌中ＣＧＲＰ纤维密度显著减少。

犬心脏表面主要神经丛降钙素基因相关肽和P物质的免疫组织化学研究

目的 探明犬心脏表面神经丛的化学特性。 方法 免疫组织化学ABC法。 结果 在犬心脏表面各神经丛均见降钙素基因相关肽 (CGRP)免疫反应阳性神经元 ,而SP免疫阳性神经元仅在心房背侧神经丛(DAP)、房间隔神经丛 (IAP)和主动脉 肺动脉间神经丛 (A PP)内见到。CGRP IR和SP IR神经元形态、大小相似。心房表面神经丛内的CGRP IR和SP IR神经元都较心室表面神经丛者多。在心脏表面各脂肪垫及心肌间隙等处见到多量CGRP IR、SP IR神经纤维 ,多靠近血管或附于血管壁 ,在一些部位可见这两种肽能神经纤维似与心肌细胞接触。 结论 犬心脏表面神经丛内存在CGRP和SP ;其在心脏内执行的功能可能有联系或相似之处 ,但也有不同 ;两种肽能神经对心房和心室的支配不对称 ,提示CGRP和SP可能直接参与心肌细胞和心脏血管活动的调控。

降钙素基因相关肽转基因预防小鼠自身免疫性糖尿病发病及其抗氧化应激机制(英文)

有证据表明,活性氧(reactive oxygen species,ROS)参与了胰岛β细胞自身免疫损伤,是自身免疫性糖尿病发病的重要原因之一。一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)介导了致炎性细胞因子对胰岛β细胞的损害,引起脂质过氧化反应,进而损伤胰岛细胞。降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在心肌细胞中可抑制ROS生成而具有细胞保护作用。通过CGRP裸质粒肌肉注射体细胞电针强化转基因方法,使骨骼肌持续表达CGRP,观察其对小剂量多次注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)造成的小鼠自身免疫性糖尿病发病的影响,进一步测定胰腺局部活性氧含量以及抗氧化酶的改变,探讨其抗氧化应激机制。结果发现,CGRP裸质粒直接注射入小鼠双后肢胫前肌,继以程控电针刺激导入(体内电穿孔法),可使血浆和骨骼肌组织CGRP表达水平显著增高,且持续4周以 上;注射STZ同时给予CGRP转基因治疗可减轻胰岛β细胞损伤,显著降低自身免疫性糖尿病的发病率及血糖水平;CGRP转基因可显著抑制自身免疫性糖尿病小鼠胰腺局部活性氧和丙二醛的生成,增加过氧化氢酶(CAT)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。结果提示,CGRP裸质粒直接注射、电针辅助导入转基因可获得CGRP持续高水平的表达,能够预防小鼠自身免疫性糖尿病的发病。

P物质与降钙素基因相关肽在骨代谢中的作用

P物质和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)是感觉神经末梢释放的神经肽。神经肽通过一定的方式作用于骨骼及其相关组织,从而对骨代谢、骨折愈合及疼痛进行调节。P物质和CGRP的生物学特征、分布特点与骨代谢、骨折愈合和疼痛的发生和发展密切相关。

降钙素基因相关肽在神经免疫内分泌网络中的作用(综述)

该文就降钙素基因相关肽 (calcitonin gene-related peptide,CGRP)在神经免疫内分泌网络中的作用做一综述。

大鼠脑底动脉降钙素基因相关肽能神经纤维分布的形态学观察

目的 探讨 14只成年鼠和 14只老年鼠脑底主要动脉降钙素基因相关肽能神经纤维的分布特征。方法 应用免疫组织化学ABC法、神经交点计数法。结果 成年鼠脑底各主要动脉壁上均含有呈线状黑色的CGRP能免疫反应阳性神经纤维 ,分布密度以大脑前动脉最高 ,其次是大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉。各动脉间CGRP能神经纤维密度比较具有统计学意义 (P <0 .0 1) ,成年鼠脑底动脉壁CGRP能神经纤维以环行分布为主 ;老年鼠脑底动脉壁CGRP能神经纤维密度以大脑前动脉最高 ,走行方式以网状分布为主 ;老年鼠脑底各主要动脉壁CGRP能神经纤维分布密度低于成年鼠相应脑底动脉。结论 不同脑底动脉CGRP能神经纤维分布特征各异 。

背根神经节内P物质、降钙素基因相关肽免疫阳性神经元与阴茎包皮系带感觉信息的传递

目的:探讨背根神经节(DRG)内P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)免疫阳性神经元与阴茎包皮系带感觉信息传递之间的关系。方法:通过荧光金(FG)逆行标记对大鼠阴茎包皮系带内神经末梢的来源作追踪定位,并结合SP、CGRP免疫荧光标记法,研究大鼠DRG内FG标记阳性神经元中SP、CGRP免疫阳性神经元的形态和分布。结果:FG逆行标记结果发现,大鼠阴茎包皮系带内的神经末梢起源于第6腰髓对应的背根神经节(L6-DRG)和第1骶髓对应的背根神经节(S1-DRG)的神经元。对这些神经元分别作SP、CGRP免疫荧光标记后发现,标记细胞大小不等,分别呈深红色和深绿色,沿神经束成行排列或散在分布。FG/SP、FG/CGRP双标记阳性细胞均为中小型,其数量分别占FG逆行标记阳性细胞总数的1/3和1/2,FG/SP/CGRP三标记阳性细胞占FG逆行标记阳性细胞总数的1/5。结论:大鼠L6-DRG和S1-DRG内的SP、CGRP免疫阳性神经元可能参与阴茎包皮系带感觉信息的传递。

降钙素基因相关肽阳性结构在人和大鼠胃的分布——免疫组化PAP法研究

用免疫组织化学PAP法观察了降钙素基因相关肽阳性结构在人和大鼠胃的分布.主要结果显示:(1)降钙素基因相关肽免疫反应阳性细胞存在于人胃窦和大鼠胃窦、胃体腺上皮;(2)降钙素基因相关肽阳性细胞内免疫反应在大鼠胃窦和胃体腺上皮分别呈强阳性和弱阳性;(3)降钙素基因相关肽免疫反应阳性神经纤维仅存在于大鼠胃,在大鼠胃窦粘膜内,部分降钙素基因相关肽阳性神经纤维与降钙素基因相关肽阳性细胞紧密接触.上述结果首次表明:(1)人胃窦和大鼠胃体腺上皮也存在含降钙素基因相关肽的内分泌细胞;(2)大鼠胃窦腺上皮内降钙素基因相关肽阳性细胞的免疫反应阳性强度明显强于胃体腺上皮内降钙素基因相关肽阳性细胞的免疫反应阳性强度;(3)大鼠胃窦粘膜中降钙素基因相关肽阳性神经纤维与降钙素基因相关肽阳性内分泌细胞间存在着形态上的紧密联系.文内讨论了胃中降钙素基因相关肽可能参与胃肠激素释放调节的功能.

成人和大鼠阴茎包皮及包皮系带内降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢的分布及来源

目的探讨人和大鼠阴茎包皮和包皮系带内降钙素基因相关肽(CGRP)免疫阳性神经末梢的分布和起源。方法采用免疫组织化学法观察成人阴茎包皮和包皮系带内CGRP免疫阳性神经末梢的分布,通过荧光金(FG)逆行标记和CGRP免疫荧光标记相结合法研究大鼠包皮系带内CGRP免疫阳性神经末梢的起源。结果成人阴茎包皮及包皮系带内均有CGRP免疫阳性神经末梢存在,主要位于表皮基底层和棘细胞层内,呈树枝状或念珠状分布,大多成束走行。阴茎系带处CGRP免疫阳性神经末梢的分布密度明显大于阴茎包皮处。大鼠的阴茎包皮和包皮系带内也有类似的CGRP免疫阳性神经末梢分布,结合FG逆行标记法研究发现,神经末梢起源于第6腰髓对应的背根神经节(L6-DRG)和第1骶髓对应的背根神经节(S1-DRG)的神经元。CGRP免疫荧光标记细胞大多为中小型,呈深绿色,沿神经束成行排列或散在分布。FG/CGRP双标阳性细胞均为中小型,其数量占FG逆标阳性细胞总数的二分之一。结论人和大鼠阴茎包皮及包皮系带内存在着大量的CGRP免疫阳性神经末梢;大鼠实验表明,这些末梢来源于L6-DRG和S1-DRG,提示CGRP可能参与阴茎包皮及包皮系带感觉信息的传递。

成人阴茎包皮及包皮系带内降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢分布密度差异与感觉信息的传递

目的:观察降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢在成人阴茎包皮和包皮系带内的形态分布特点,比较阳性神经末梢在阴茎包皮和包皮系带内分布密度的差异。方法:实验于2004-09／2005-05在浙江大学医学院解剖实验室完成,选取新鲜成年男性尸体(年龄22-40岁,家属同意捐献)阴茎标本22例,应用免疫组织化学方法观察阴茎包皮及包皮系带内降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢的图像吸光度(A)值。结果:正常成人阴茎包皮及包皮系带内均有棕色的降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢存在,这些神经末梢主要位于表皮基底层和棘细胞层内,呈树枝状或念珠状分布,大多成束走行。阴茎系带处降钙素基因相关肽免疫阳性神经末梢的分布密度明显大于阴茎包皮处(2．80±0.35, 1.30±0．42,t=-2．23．P<0．01)。结论:包皮系带内含有浓密的降钙素基因相关肽降免疫阳性神经末梢, 且包皮系带是阴茎部位感觉极敏锐的区域,提示钙素基因相关肽参与了．阴茎包皮及包皮系带感觉信息的传递。

降钙素基因相关肽和内皮素样免疫反应物在野百合碱诱导肺动脉高压形成中的变化及意义

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素样免疫反应物(ir-ET)在野百合碱诱导肺动脉高压形成中的变化及意义。方法:雄性Wistar大鼠20只,随机分为肺动脉高压模型组(以下简称模型组)和对照组,每组10只。给予野百合碱(60mg/kg)复制肺动脉高压大鼠模型,对照组按3ml/kg体重注射生理盐水,然后给予常规饲养,4周后达到实验终点,测定右室收缩压(RVSP)和静脉血浆及心、肺组织匀浆中的CGRP和ir-ET的含量,观察电镜下心肌组织的改变。结果:模型组RVSP(5.95±0.59)kPa、对照组(2.49±0.29)kPa,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组血浆中ir-ET增加,心、肺匀浆中ir-ET减少,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),而模型组血浆及心、肺组织匀浆中CGRP均减少,模型组和对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CGRP能降低肺动脉高压,ir-ET使肺动脉压升高,CGRP和ir-ET与特发性肺动脉高压的形成有关。

辣椒素对大鼠三叉神经降钙素基因相关肽免疫反应性神经元的影响

目的:研究辣椒素对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)免疫反应性神经元的影响,探讨辣椒素治疗三叉神经的镇痛机制。方法:把辣椒素配成浓度为30mmoL/L溶液备用,20只Wister大鼠按辣椒素用量分成4组(A组20μL,B组30μL,C组50μL和D组100μL),大鼠左侧面区为对照侧,右侧面为实验侧,分别皮下注射处理大鼠三叉神经眶下支,24h取材,切片,免疫组化染色,镜检,计算机图像分析。结果:经方差分析,对照侧,A,B,C,D组实验侧CGRP平均吸光度均值分别为2.526,2.499,2.199,1.812,1.549,组间比较差异有显著性意义(F=170.645,P<0.01)。并且随着用药量的增加其差值也更大。结论:辣椒素对大鼠三叉神经节CGRP免疫反应性神经元有明显的影响,CGRP参与口面部的痛与镇痛。

降钙素基因相关肽免疫阳性神经纤维对骨愈合影响的研究

目的观察降钙素基因相关肽 (CGRP)免疫阳性神经纤维在骨愈合过程中的分布特点及规律，以期揭示 CGRP与骨形成的相互关系及可能的作用机制。方法利用大鼠胫骨上段骨缺损愈合模型，取正常对照组胫骨和不同愈合时期骨痂作HE和 CGRP免疫荧光染色，镜下观察结果并计数各不同时期阳性神经纤维的数目。结果在骨愈合过程中,CGRP免疫阳性神经纤维较多地分布于骨膜、纤维肉芽组织以及新生骨组织中，而且大多定位于骨膜和骨痂中的血管周围或附近。 CGRP免疫阳性神经纤维于修复早期即开始明显增殖，至中期达到高峰，到后期则又逐渐减少。结论CGRP免疫阳性神经纤维可以参与骨愈合过程，而且作用的方式与局部的血液循环调节有关。

降钙素基因相关肽肽段的抗原性和免疫原性

用固相合成法合成了有关降钙素基因相关肽ＣＧＲＰ五个肽段。它们的氨基酸顺序分别为：ＣＧＲＰ－１（２４－３７）；ＣＧＲＰ－２（１４－３７）；ＣＧＲＰ－３（９－２３）；ＣＧＲＰ－４（１－２３）和ＣＧＲＰ－５（１－１３）。用酶标方法测定了它们的抗原性，发现ＣＧＲＰ－２和ＣＧＲＰ－１能够很好地与抗ＣＧＲＰ抗血清结合。将ＣＧＲＰ－１；ＣＧＲＰ－３和ＣＧＲＰ－５分别免疫兔子，获得的抗血清分别与ＣＧＲＰ进行反应，发现只有抗ＣＧＲＰ－１的抗血清能够与ＣＧＲＰ很好地结合。因此，可以推测ＣＧＲＰ的羧端部分是其免疫活性部位。

降钙素基因相关肽样免疫反应在人脊髓内的分布

本文应用ABC免疫组织化学方法,研究了6例正常人脊髓内降钙素基因相关肽(CGRP)的定位分布。结果表明,CGRP样免疫反应纤维和终末广泛分布在脊髓全长各个节段的后角。免疫反应的强度和免疫反应纤维的密度,可依次归纳为。骶>腰>颈>胸。但颈膨大的免疫反应强度和免疫反应纤维的密度,却明显高于其他颈段。在脊髓的横切面上,免疫反应产物位于后角的各个板层(第Ⅰ~Ⅵ层和Lissauer束)以及中央管周围灰质,其中以胶状质密度最高。在脊髓前角,未见明显的阳性反应细胞体和免疫反应纤维。本文并对CGRP在胶状质内分布可能具有的功能意义进行了讨论。

大鼠肺内降钙素基因相关肽和5-羟色胺免疫反应细胞的加龄变化

目的 :探讨大鼠肺内降钙素基因相关肽 (calcitoningene relatedpeptiole ,CGRP)和 5 羟色胺 (5 hydroxytryptamine ,5 HT)免疫反应细胞的个体发生及分布 ,揭示肺神经内分泌细胞的功能及其内分泌机制的形态学基础 .方法 :应用免疫组织化学方法、激光扫描共聚焦技术及计算机图像分析 .结果 :CGRP和 5 HT阳性细胞最早见于胚 16d肺组织中 ,随胎龄增大其数量增多且分布广泛 ,胚 2 0d达高峰 ,生后阳性细胞数量减少 [神经内分泌 (NE) / 1× 10 3上皮细胞 (BE) :3 82± 13vs 94± 17;3 87± 4 7vs88± 18;P <0 .0 1,以出生后 1mo为例 ].共聚焦显微镜结果也证实随胎龄增加 ,CGRP和 5 HT阳性细胞数量增加且细胞荧光强度增强 ,而生后强度减弱 (P <0 .0 1) .相邻切片法观察可见多数表达CGRP的阳性细胞也含有 5 HT免疫反应物 .结论 :肺内CGRP和 5 HT阳性细胞的随龄变化显示其在肺的发育、分化、成熟的变化过程中具有重要作用 ,出生前后其数量变化明显的现象 ,可能与此阶段肺功能的急剧改变有关 .CGRP和 5 HT的共存表明两者在功能上具有相关性 .