菌落PCR技术快速鉴别丝状真菌的实验研究

目的探讨菌落PCR在检测病原性丝状真菌方面的应用价值。方法初步建立用于丝状真菌的菌落PCR检测技术，用19种丝状真菌标准株进行验证，所有菌落PCR扩增产物进行测序，并选取8种菌株的菌落PCR产物和酶切结果与常规PCR进行比较，检测其准确性和可靠性。结果19株菌中有16株（84．2％）菌落PCR成功扩增内转录间隔（ITS）区，ITS区基因序列分析鉴定菌种正确，与NCBI数据库中相同菌种的相似度为96％～100％；与常规PCR进行比较的8株菌中，除构巢曲霉菌落PCR扩增结果为阴性外，其他菌种菌落PCR产物及酶切条带与常规PCR基本一致。结论与常规PCR相比，菌落PCR检测丝状真菌操作简单，省时省力，鉴定菌种具有较高的准确性和可靠性，可以用于丝状真菌的快速鉴定。