期刊文献+
共找到406篇文章
< 1 2 21 >
每页显示 20 50 100
限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测KRAS基因第12位稀有突变
1
作者 周翠兰 陈婕 +2 位作者 许云思 付乙人 彭翠英 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第1期26-30,共5页
目的研究限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测KRAS基因第12位密码子稀有突变的可行性。方法将采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测方法作为实验组,限制性内切酶酶切联合蓝白斑筛选检测方法作为对照组。对照组将... 目的研究限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测KRAS基因第12位密码子稀有突变的可行性。方法将采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选检测方法作为实验组,限制性内切酶酶切联合蓝白斑筛选检测方法作为对照组。对照组将KRAS基因第12位密码子突变型(MUT)/野生型(WT)(MUT/WT 12)质粒按0∶1、1∶300、1∶1000、1∶3000的比例混合,限制性内切酶酶切PCR产物,酶切后产物进行蓝白斑筛选。实验组将MUT/WT 12质粒按0∶1、1∶3000、1∶10000、1∶30000的比例混合,在对照组方法的基础上酶切产物去磷酸化后再蓝白斑筛选。比较两组蓝白斑克隆数。限制性内切酶酶切鉴定实验组MUT/WT 12为1∶30000的阳性克隆,一代测序阳性克隆验证插入片段的序列。采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选验证26例肺癌病例游离DNA的KRAS基因第12位稀有突变。结果对照组1∶3000的培养皿上白色克隆17个,蓝色克隆2329个,白色/蓝色克隆为1/137;而实验组1∶30000的培养皿上白色克隆23个,蓝色克隆394个,白色/蓝色克隆为1/17,1∶30000实验组白色/蓝色克隆比例明显高于1∶3000对照组。实验组1∶30000培养血上5个阳性克隆酶切鉴定出3个阳性,其插入片段为KRAS第12位突变片段。限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选26例肺癌病例可检测出2例为KRAS基因第12位密码子突变。结论采用限制性内切酶酶切后去磷酸化联合蓝白斑筛选可检测出1∶30000 KRAS基因稀有突变。 展开更多
关键词 限制性内切KRAS基因 蓝白斑技术 去磷酸化 稀有突变
下载PDF
鱼类基因组结构研究——Ⅰ.染色体的限制性内切酶显带 被引量:11
2
作者 任修海 余其兴 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1991年第1期17-22,共6页
本文报道了1种新的鱼类染色体研究方法——限制性内切酶显带技术。我们应用限制性内切酶Bsp631等分别对黄鳝和长春鳊的染色体进行显带处理,结果表明,Bsp631能使这两种鱼的染色体发生稳定的带纹分化:适度的处理产生多重的G-带状带型,而... 本文报道了1种新的鱼类染色体研究方法——限制性内切酶显带技术。我们应用限制性内切酶Bsp631等分别对黄鳝和长春鳊的染色体进行显带处理,结果表明,Bsp631能使这两种鱼的染色体发生稳定的带纹分化:适度的处理产生多重的G-带状带型,而过度的处理则产生特殊的限制性内切酶抗性带型。根据显带结果分析,我们对鱼类染色体限制性内切酶显带的可行性和实用价值进行了讨论。 展开更多
关键词 限制性内切 染色体带 基因
下载PDF
利用同序异尾限制性内切酶快速克隆多基因片段的新方法 被引量:10
3
作者 杜广营 朱乃硕 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期584-588,共5页
介绍一种可以快速进行多基因片段克隆的新方法——同序异尾限制性内切酶(isoschizomer-heterotailrestrictionendonuclease,IHRE)一步克隆法,该方法可以一步完成多达6个DNA片段的连接,具有简单快速、节省试剂、成功率高、不引入非目的... 介绍一种可以快速进行多基因片段克隆的新方法——同序异尾限制性内切酶(isoschizomer-heterotailrestrictionendonuclease,IHRE)一步克隆法,该方法可以一步完成多达6个DNA片段的连接,具有简单快速、节省试剂、成功率高、不引入非目的基因序列等很多优点.应用该方法已经成功完成对人肠激酶轻链多基因克隆、HSV多表位DNA疫苗的构建等. 展开更多
关键词 分子生物学 同序异尾限制性内切(IHRE) 克隆 多片段基因
下载PDF
优化的热启动PCR-限制性酶切法检测冠心病患者载脂蛋白E基因型 被引量:2
4
作者 彭澍 龚五星 +3 位作者 彭健 王骏 石理 林岫芳 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2000年第2期33-36,共4页
改进传统的载脂蛋白E(Apo E)基因多态性检测方法,建立热启动聚合酶链反应 (PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)检测分析方法。方法:应用热启动PCR-限制性内切酶酶 切-聚丙烯酸胺凝胶电泳(PAGE)-固定银... 改进传统的载脂蛋白E(Apo E)基因多态性检测方法,建立热启动聚合酶链反应 (PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)检测分析方法。方法:应用热启动PCR-限制性内切酶酶 切-聚丙烯酸胺凝胶电泳(PAGE)-固定银染法测定158例冠心病(CHD)患者和116例正常对照者 的 Apo E基因型。结果:检测结果清晰,非特异扩增极少。共检测出 5种 Apo E基因型,分别为 E3/ 3、E3/2、E4/3、E4/2及 E4/4。 CHD组 Apo E4/3基因型和4等位基因频率均高于对照组(P< 0.05)。结论:Apo E基因多态性与CHD发生密切相关,4等位基因似是CHD重要的遗传易患因 素。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 基因多态性 冠心病 限制性 PCR
下载PDF
限制性内切酶MluⅠ基因的合成、克隆和初步表达 被引量:1
5
作者 覃鸿妮 钱莉春 +1 位作者 沈晓燕 梅啸 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第10期46-53,共8页
在已知基因序列但缺乏DNA模版的情况下,人工设计合成多条引物,采用重叠PCR技术体外人工合成899bp的MluⅠ基因和1 312bp的M.MluⅠ基因.并将合成的MluⅠ基因连接到表达载体pet30a上,重组表达载体构成pet30a-MluⅠ,将M.MluⅠ基因连接到表... 在已知基因序列但缺乏DNA模版的情况下,人工设计合成多条引物,采用重叠PCR技术体外人工合成899bp的MluⅠ基因和1 312bp的M.MluⅠ基因.并将合成的MluⅠ基因连接到表达载体pet30a上,重组表达载体构成pet30a-MluⅠ,将M.MluⅠ基因连接到表达载体PUC19上,重组表达载体构成PUC19-M.MluⅠ.测序结果显示,载体构建成功后利用体外重组转化技术,将pet30a-MluⅠ和PUC19-M.MluⅠ转入T7expression E.coli表达菌株中.重组工程菌经IPTG诱导,用SDS-PAGE鉴定,发现限制性内切酶MluⅠ成功表达.该酶的成功表达不仅为后续研究提供了材料,而且为实验室制备限制性内切酶在方法上开辟了新的途径,为更多新发现的内切酶基因的成功克隆提供了参考. 展开更多
关键词 限制性内切 MluⅠ基因的合成 基因克隆 基因表达
下载PDF
等位基因特异性-PCR联合限制性内切酶消化法检测JAK2V617F突变 被引量:1
6
作者 申徐良 陈方平 +4 位作者 魏武 张梅香 史文芝 秦小琪 徐洪亮 《长治医学院学报》 2008年第1期6-8,共3页
目的:建立敏感特异的JAK2V617F点突变的临床检测方法。方法:基因组DNA从HEL细胞或正常志愿者外周血中提取。采用等位基因特异性-PCR(Allele specific-PCR,AS-PCR)和限制性内切酶消化的方法检测基因组中JAK2V617F突变。结果:本AS-PCR法可... 目的:建立敏感特异的JAK2V617F点突变的临床检测方法。方法:基因组DNA从HEL细胞或正常志愿者外周血中提取。采用等位基因特异性-PCR(Allele specific-PCR,AS-PCR)和限制性内切酶消化的方法检测基因组中JAK2V617F突变。结果:本AS-PCR法可对JAK2基因扩增出364bp的内参照条带,当存在JAK2V617F突变时,又可以扩增出203bp的突变条带。只有野生型内参照条带364bp可被BsaXⅠ消化切割。结论:AS-PCR法和限制性内切酶法是检测JAK2V617F突变的敏感特异的检测方法,可以成功应用于临床检测。 展开更多
关键词 等位基因特异性-PCR JAK2V617F突变 限制性内切BsaXⅠ
下载PDF
PCR和限制性内切酶法快速检测C57BL/6Job小鼠基因型 被引量:2
7
作者 徐培渝 Jerlin Walker 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2000年第3期143-145,共3页
目的 :探讨快速检测C57BL/6Job小鼠基因型方法。C57BL/6Job小鼠是一种ob基因突变种 ,ob基因的点突变导致小鼠遗传性肥胖。该品系广泛用于肥胖及有关疾病研究。方法与结果 :本文用PCR及限制性内切酶法快速 ,准确地检测出C57BL/6J小鼠同... 目的 :探讨快速检测C57BL/6Job小鼠基因型方法。C57BL/6Job小鼠是一种ob基因突变种 ,ob基因的点突变导致小鼠遗传性肥胖。该品系广泛用于肥胖及有关疾病研究。方法与结果 :本文用PCR及限制性内切酶法快速 ,准确地检测出C57BL/6J小鼠同窝仔鼠的三种基因型 :野生型 (+/+) ,杂合体型 (ob/+)和突变型 (ob/ob)。结论 :该法只需很少的生物材料 ,即一小段小鼠尾巴 ,适用任何年龄的小鼠 ,对于该品系小鼠的育种、肥胖机理和肥胖预防的研究很有实用意义。 展开更多
关键词 肥胖鼠基因 PCR 限制性内切
下载PDF
RT-nestedPCR和限制性酶切分析用于HV的检测和基因分型
8
作者 韦三华 白雪帆 +2 位作者 陈红梅 潘蕾 李光玉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期448-450,共3页
为建立检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中汉坦病毒 (HV)基因的RT nestedPCR方法 ,并进一步进行限制性酶切分型 ,设计并合成互补于HVS基因片段的引物 ,对 78例HFRS患者血清进行RT nestedPCR检测 ,并对PCR产物进行酶切分析。结果显示 ... 为建立检测肾综合征出血热 (HFRS)患者血清中汉坦病毒 (HV)基因的RT nestedPCR方法 ,并进一步进行限制性酶切分型 ,设计并合成互补于HVS基因片段的引物 ,对 78例HFRS患者血清进行RT nestedPCR检测 ,并对PCR产物进行酶切分析。结果显示 ,阳性率分别为 76 % (≤ 7天 )、6 7% (8~ 14天 )、43% (15~2 1天 )和 2 9% (>2 1天 )。 48例检测阳性患者PCR产物酶切分型 ,47例为Ⅰ型 ,1例为Ⅱ型。提示RT nestedPCR用于早期HFRS患者的HV基因检测 ,具有直接、敏感、特异等优点 。 展开更多
关键词 肾综合征性出血热 聚合链反应 限制性分析 基因分型
下载PDF
沈阳地区肺炎支原体分离株P1蛋白基因限制性酶切图谱分型研究
9
作者 王桂珍 董占双 +1 位作者 刘中顺 李保强 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期103-104,共2页
目的 :根据肺炎支原体 (MP)P1蛋白基因限制性酶切图谱分类MP临床分离株 ,调查沈阳地区肺炎支原体流行情况。方法 :多聚酶链反应扩增MPFH标准株和MP临床分离株的P1基因片段 ,扩增产物用限制性内切酶HeaIII消化 ,1.5 %琼脂糖凝胶电泳分析... 目的 :根据肺炎支原体 (MP)P1蛋白基因限制性酶切图谱分类MP临床分离株 ,调查沈阳地区肺炎支原体流行情况。方法 :多聚酶链反应扩增MPFH标准株和MP临床分离株的P1基因片段 ,扩增产物用限制性内切酶HeaIII消化 ,1.5 %琼脂糖凝胶电泳分析。结果 :肺炎支原体临床分离株和FH标准株酶切图谱相同。结论 :沈阳地区肺炎支原体分离株属于Ⅱ型。 展开更多
关键词 肺炎支原体 P1基因 限制性内切图谱 分型
下载PDF
甲基化特异性PCR联合结合重亚硫酸盐限制性内切酶法在胃癌抑癌基因甲基化检测中的应用
10
作者 胡世莲 程昭栋 +3 位作者 孙玉蓓 徐维平 沈干 孔祥勇 《中国临床保健杂志》 CAS 2010年第2期113-116,F0003,共5页
目的探讨甲基化特异性PCR(MSP)方法检测胃癌组织中抑癌基因甲基化的准确性,联合应用MSP方法与结合重亚硫酸盐限制性内切酶法(COBRA)检测抑癌基因甲基化状态的意义。方法采用MSP检测胃癌组织抑癌基因Runx3启动子区甲基化的状态,随后再采... 目的探讨甲基化特异性PCR(MSP)方法检测胃癌组织中抑癌基因甲基化的准确性,联合应用MSP方法与结合重亚硫酸盐限制性内切酶法(COBRA)检测抑癌基因甲基化状态的意义。方法采用MSP检测胃癌组织抑癌基因Runx3启动子区甲基化的状态,随后再采用COBRA检测胃癌组织标本的甲基化状态。分析两种方法检测结果的关系。结果经MSP方法检测54例肿瘤组织中共有30例标本发生Runx3基因启动子区异常甲基化,甲基化阳性率为55.6%。经COBRA方法检测54例肿瘤组织中有27例出现酶切条带即存在甲基化,甲基化阳性率为50.0%。经COBRA方法检测,在MSP方法检测的30例阳性标本中有3例未出现酶切条带即为假阳性。在MSP方法检测Runx3基因甲基化阴性的24例标本中,经COBRA方法检测,Runx3基因甲基化阴性的标本亦为24例。两种检测方法检测结果的阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论甲基化特异性PCR方法在检测胃癌抑癌基因甲基化状态的研究中具有较高的灵敏度,COBRA方法可以检测出MSP方法中的假阳性标本,联合应用两种方法检测胃癌组织中抑癌基因的甲基化状态会使实验结果更可靠、准确。 展开更多
关键词 胃肿瘤 DNA甲基化 聚合链反应 基因 肿瘤抑制 限制性内切图谱法
下载PDF
鸡传染性支气管炎病毒N基因片段的RT-PCR扩增及限制性内切酶分析
11
作者 孙涛 王欣 陆苹 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第4期13-16,共4页
根据鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)的已报道基因序列设计了 1对可扩增 N基因片段的引物 ,并得到了预期的 438bp扩增产物 ;将目的条带纯化并回收后 ,克隆到 PMD18- T质粒载体中 ,对插入片段进行序列测定 ,并与已发表的 IBV N基因序列进行... 根据鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)的已报道基因序列设计了 1对可扩增 N基因片段的引物 ,并得到了预期的 438bp扩增产物 ;将目的条带纯化并回收后 ,克隆到 PMD18- T质粒载体中 ,对插入片段进行序列测定 ,并与已发表的 IBV N基因序列进行了比较 ,证实扩增和克隆的产物是正确的 ;根据扩增的 N基因的序列 ,选择了 Bst X 酶对 IBV进行分析 ,发现 M41和澳大利亚 T株 Bst X 酶切图谱存在明显的差异 ,从而建立了一种新的鉴定 IBV病毒的方法。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 N基因 RT-PCR 限制性内切
下载PDF
PCR和限制性内切酶在uPA-SCID小鼠基因型鉴定中的应用
12
作者 徐春华 陈丽香 +5 位作者 任晓楠 杨玉琴 彭秀华 蔡家麟 周晓辉 周文江 《实验动物与比较医学》 CAS 2015年第3期218-221,共4页
目的 建立一种简便、快捷、准确的基因型鉴定方法用于uPA-SCID小鼠的基因型鉴定.方法 应用PCR技术与限制性内切酶相结合的方法检测uPA-SCID小鼠的基因型.结果 uPASCID小鼠的uPA基因型鉴定结果显示:uPA基因野生型在153 bp有条带,纯合子... 目的 建立一种简便、快捷、准确的基因型鉴定方法用于uPA-SCID小鼠的基因型鉴定.方法 应用PCR技术与限制性内切酶相结合的方法检测uPA-SCID小鼠的基因型.结果 uPASCID小鼠的uPA基因型鉴定结果显示:uPA基因野生型在153 bp有条带,纯合子在337 bp有条带,杂合子在337bp、153bp有条带.uPA-SCID小鼠的SCID基因型鉴定结果显示:uPA-SCID小鼠SCID基因突变体在38 bp、26 bp有条带,杂合子在64 bp、38 bp、26 bp有条带,野生型在64 bp有条带.结论 建立的基因型鉴定方法简便易行、可靠,通过该方法可以确定uPA-SCID小鼠的基因型,筛选出需要的纯合子uPA-SCID小鼠. 展开更多
关键词 uPA-SCID小鼠 基因型鉴定 聚合链反应(PCR) 限制性内切
下载PDF
PCR-限制性内切酶图样分析在流感病毒基因分析中的应用
13
作者 郭元吉 《国外医学(病毒学分册)》 1997年第1期8-14,共7页
PCR-限制性内切酶图样分析为当前流感病毒基因分析中较简便的一种方法。它可对大量的流感病毒进行初步的基因分析;了解每个时期在人群中流行的流感病毒优势株;病毒株基因大体演变过程;为流感病毒疫菌株挑选提供科学的依据;也为... PCR-限制性内切酶图样分析为当前流感病毒基因分析中较简便的一种方法。它可对大量的流感病毒进行初步的基因分析;了解每个时期在人群中流行的流感病毒优势株;病毒株基因大体演变过程;为流感病毒疫菌株挑选提供科学的依据;也为流感病毒基因重配株的基因分析和研究提供了简便和可靠的方法。 展开更多
关键词 流感病毒 基因分析 聚合链反应 限制性内切
下载PDF
大肠杆菌耐利福定突变基因的克隆及限制性酶切谱分析 被引量:1
14
作者 段传可 王浴生 +1 位作者 强文安 李良宏 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期163-168,共6页
采用利福定(rifandine,RFD)浓度梯度平皿筛选得4株耐RFD大肠杆菌(RFD的MIC为500μg/ml),连续传两代其耐药性保持稳定;对4株耐RFD大肠杆菌,采用酚—氯仿法,酚—透析法和蛋白酶K— 玻棒缠绕... 采用利福定(rifandine,RFD)浓度梯度平皿筛选得4株耐RFD大肠杆菌(RFD的MIC为500μg/ml),连续传两代其耐药性保持稳定;对4株耐RFD大肠杆菌,采用酚—氯仿法,酚—透析法和蛋白酶K— 玻棒缠绕法提取其总DNA和采用煮沸法、 碱法提取质粒,经琼脂糖凝胶电泳分析,结果均未见质粒DNA带。 提示所试菌株的耐药系突变耐药,由染色体介导。对耐RFD 大肠杆菌2280,用蛋白酶K—玻棒缠绕法提取其染色体DNA,并选Bg1Ⅱ完全酶切,获许多大小不等的DNA片段,然后与碱法提取的BamHI 酶切的载体质粒pBR322(AMpr、TCr失活,4.skb)用T4-DNA连接酶连接,重组体再向感受态大肠杆菌HB101转化,最后在含RFD50μg/ml,AMP60μg/ml的选择性LB琼脂平板上筛选获得了携有耐RFD突变基因重组*质粒pBD802的菌落。检测RFD的MIC为512μg/ml,琼脂糖凝胶电泳显示其耐RFDDNA片段的大小约16kb。选EcoRⅠ、BamHⅠ、HpaⅠ、EcoRⅤ、SalⅠ、HindⅢ、BalⅡ、PstⅠ8种限制性内切酶对pBD802进行完全酶切,分析了其限制性酶切电泳图谱特征? 展开更多
关键词 利福定 限制性 谱分析 基因克隆
下载PDF
基于COI基因限制性内切酶谱差异对几种杨树蛀干害虫幼虫的辅助鉴别 被引量:2
15
作者 马建 李成德 +1 位作者 邓立文 杜文胜 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期83-87,共5页
以黑龙江省杨树上的4种主要蛀干害虫:杨干象、青杨楔天牛、青杨脊虎天牛和光肩星天牛幼虫为研究对象,使用PCR方法体外扩增并得到了4种幼虫mtDNA中的细胞色素C氧化酶I(COI)基因片段,并进行了序列分析。基于扩增得到的这4种害虫COI基因的... 以黑龙江省杨树上的4种主要蛀干害虫:杨干象、青杨楔天牛、青杨脊虎天牛和光肩星天牛幼虫为研究对象,使用PCR方法体外扩增并得到了4种幼虫mtDNA中的细胞色素C氧化酶I(COI)基因片段,并进行了序列分析。基于扩增得到的这4种害虫COI基因的限制性内切酶酶谱的比较,可筛选出特异性的内切酶,并通过酶切方法对这4种害虫各自的COI基因进行了特异性鉴别、区分。在此类危险性害虫的检验检疫工作中,通过形态学及危害状进行初步判断的基础上,利用该方法进一步进行辅助鉴别,可大大提高杨树蛀干害虫幼虫检疫、鉴定的准确性。 展开更多
关键词 杨树蛀干害虫 MTDNA COI基因 限制性内切 鉴别
下载PDF
福建三种家鼠寄生蚤基因组DNA限制性内切酶酶切初步分析 被引量:2
16
作者 陈景龙 王敦清 《地方病通报》 1995年第3期8-11,共4页
从实验室饲养的3种家鼠寄生蚤,印鼠客蚤(Xenopsyllacheopis)、缓慢细蚤(Leptopsyllasegnis)和不等单蚤(Monopsyllusanisus)制备出基因组DNA,用8种识别不同位点的限制... 从实验室饲养的3种家鼠寄生蚤,印鼠客蚤(Xenopsyllacheopis)、缓慢细蚤(Leptopsyllasegnis)和不等单蚤(Monopsyllusanisus)制备出基因组DNA,用8种识别不同位点的限制性内切酶EcoRI,HindⅢ,PastI,SalI,BamHI,HpaI,PvuⅡ,BglI对蚤基因组DNA进行单酶完全酶切分析。印鼠客蚤基因组DNA经EcoRI酶解电泳后,见6条带,分别为3.22kb,2.93kb,2.20kb,1.57kb,1.53kb,1.48kb,缓慢细蚤与不等单蚤仅见一条,分别为5.79kb和7.01kb。经BamHI酶切,印鼠客蚤DNA见1条2.54kb的带,缓慢细蚤与不等单蚤分别有2条,各为7.35kb,0.59kb和12.29kb,0。62kb。另外,印鼠客蚤经HpaI酶切后,还有2条分子量很相近的DNA带型,分别为1.56kb,1.54kb。此外,3种蚤在其他内切酶酶切产物中未显肉眼可见的电泳带型。酶切结果显示缓慢细蚤与不等单蚤很相似,这2种蚤具有较大的同源性,说明其亲缘关系较近。印鼠客蚤酶切产物与另外2种蚤差别很大,提示它在蚤的进化过种中较早分化出来,故与? 展开更多
关键词 蚤类 基因组DNA 限制性内切 电泳
下载PDF
鸡痘病毒282E_4弱毒株TK基因限制性酶切图谱分析 被引量:4
17
作者 孙明 刘东海 +1 位作者 金宁一 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1994年第1期36-40,共5页
以限制性内切酶BamHI、Xbal、Clal、H1ndⅢ、Ncal对含有鸡痘病毒(FPV)282E4弱毒株3.7kbHindⅢTK基因片段的重组质粒pSL1进行单酶和它们之间双酶酶切。结果表明:3.7kbHindⅢT... 以限制性内切酶BamHI、Xbal、Clal、H1ndⅢ、Ncal对含有鸡痘病毒(FPV)282E4弱毒株3.7kbHindⅢTK基因片段的重组质粒pSL1进行单酶和它们之间双酶酶切。结果表明:3.7kbHindⅢTK基因片段上有2个Clal切点,2个Xbal切点,1个Ncal切点,没有BamHI切点。随后,用澳大利亚FPV2.2kbHindⅢ+ClalTK基因作探针,对各种酶切片段进行Southern印迹杂交,进一步确定TK基因位于2.2kbHindⅢ+Clal片段中。杂交结果与限制性酶切图谱分析结果相一致。该基因的限制性酶切图谱与澳大利亚FPV疫苗株的基本相同。 展开更多
关键词 鸡痘病毒 TK基因 限制性 图谱
下载PDF
大肠杆菌耐利福定突变基因的克隆及限制性酶切谱分析
18
作者 段传可 李良宏 +1 位作者 强文安 王浴生 《四川生理科学杂志》 1992年第Z1期10-10,共1页
本文四株耐利福定(Rifandine,RFD)大肠杆菌(MIC为500ug/ml)均采用RFD浓度梯度平皿从相应敏感菌株筛选获得,连续传种二代其耐药性保持稳定;对四株耐RFD大肠杆菌,采用酚一氯仿法。
关键词 突变基因 限制性 利福定 玻棒 重组体 感受态 平皿 完全 谱分析 缠绕法
下载PDF
中国大陆不同地域隔离群湖北钉螺基因组DNA的限制酶切长度差异 被引量:16
19
作者 周晓农 孙乐平 +7 位作者 徐秋 洪青标 吴中兴 冯笑川 陈淑贞 吴宜琴 吴观陵 陆安生 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1994年第4期196-199,258,共5页
为证实中国大陆湖北钉螺不同地理株的存在,制备了各地钉螺的基因组DNA,经限制性内切酶Bam HI和Pst I酶解后,置0.8%琼脂糖凝胶电泳,比较分析不同地域隔离群钉螺基因组DNA重复序列DNA的限制酶切长度差异.安徽、四川、云南、湖南、湖北、... 为证实中国大陆湖北钉螺不同地理株的存在,制备了各地钉螺的基因组DNA,经限制性内切酶Bam HI和Pst I酶解后,置0.8%琼脂糖凝胶电泳,比较分析不同地域隔离群钉螺基因组DNA重复序列DNA的限制酶切长度差异.安徽、四川、云南、湖南、湖北、江苏、上海、福建、江西等9地隔离群钉螺的DNA酶切带型.主带基本一致;次带差异明显.以四川普格、云南巍山、江苏东台之间差异较大.湖北省的汉川、洪湖、荆州、石首、咸宁的钉螺酶切图谱基本一致.提示不同隔离群钉螺存在一定的同源和亲缘关系.在基因水平上的差异程度与隔离群之间距离和自然环境关系密切.在一定区域内的钉螺DNA相对稳定. 展开更多
关键词 湖北钉螺 基因组DNA 限制性内切 长度差异
下载PDF
限制性内切酶介导的串珠镰刀菌插入突变和致病性突变体的分离 被引量:5
20
作者 赵培宝 周庆新 +1 位作者 郭芳先 李多川 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期545-548,共4页
For studying on pathogenicity mechanism of Fusarium moniliforme,REMI was used to transform protoplasts of FT1 strain with the vector pUCATPH,which contained hygromycin B-resistant gene.More than 300 transformants had ... For studying on pathogenicity mechanism of Fusarium moniliforme,REMI was used to transform protoplasts of FT1 strain with the vector pUCATPH,which contained hygromycin B-resistant gene.More than 300 transformants had been obtained,most of them were quite stable after five rounds of successive culture.25 mutants of morphology and 2 weak pathogenicity mutants were gained by REMI.PCR amplification showed that the hygromycin B-resistant gene had integrated into genomes of the two pathogenicity mutants.The optimum conditions of preparing protoplasts were: the mycelia growing in PDB medium for 14 h,lywallzyme was used to digest the mycelia at 100 r/min,30℃ for 4 h,and 0.7 mol/L NaCl was used as the osmotic stabilizer. 展开更多
关键词 插入突变 限制性内切 突变体 串珠镰刀菌 分离 致病性 生物基因 遗传转化
下载PDF
上一页 1 2 21 下一页 到第
使用帮助 返回顶部