干血斑用于HIV-1新发感染检测(限制性抗原亲和力法)研究

目的探讨干血斑样本用于1型艾滋病病毒(HIV-1)新发感染检测(限制性抗原亲和力法)的可行性与最佳检测条件。方法用制备的三套系列稀释干血斑-血浆配对样本和来自临床的71对人群干血斑-血浆配对样本,使用国产HIV-1新发感染酶免检测试剂盒(限制性抗原亲和力法),同时对血浆样本与干血斑样本进行检测并分析等效性。其中滤纸片干血斑(DBS)样本(6mm斑)洗脱分别在500μL、600μL、800μL和1 000μL样本稀释液4℃过夜洗脱。结果三套系列稀释干血斑-血浆配对样本检测结果显示,500μL、600μL、800μL和1 000μL样本稀释液洗脱后的DBS样本与血浆样本的Pearson相关系数分别依次为0.955(R^2=0.912)、0.944(R^2=0.892)、0.948(R^2=0.899)、0.933(R^2=0.870);来自临床的71对人群干血斑-血浆配对样本检测结果显示,500μL、600μL、800μL和1 000μL样本稀释液洗脱后的DBS样本与血浆样本的Pearson相关系数分别依次为0.968(R^2=0.936)、0.965(R^2=0.932)、0.959(R^2=0.919)、0.879(R^2=0.773);其中以500μL样本稀释液4℃过夜洗脱后的DBS检测结果与血浆等效性最佳,71对临床配对样本的检测一致性为98.59%(70/71)。结论 DBS样本可用于HIV-1新发感染检测(限制性抗原亲和力法),且与血浆样本具有良好的等效性。

限制性抗原亲和力酶联免疫法和集合核酸法检测用于云南省哨点监测男男性行为人群HIV-1新发感染的研究

目的比较限制性抗原亲和力酶联免疫法(LAg-Avidity EIA)和集合核酸法评估MSM的HIV-1新发感染率的可行性。方法对2016-2017年云南省13个州(市)MSM哨点监测采用滚雪球方法采集样本进行HIV-1抗体检测,确证阳性样本进行LAg-Avidity EIA检测,HIV-1抗体阴性样本进行集合核酸法检测,分别采用LAg-Avidity EIA新发感染算法和集合核酸法检测新发感染算法计算HIV-1新发感染率,并进行结果的比较。结果研究样本共计5363份,其中HIV-1抗体阳性样本407份(含既往阳性177份),HIV-1抗体阴性样本4956份,完成LAg-Avidity EIA检测211份(91.7%),判为新近感染69份;完成集合核酸法检测4469份,判定为HIV-1感染窗口期8份。LAg-Avidity EIA估算的2016年和2017年HIV-1新发感染率分别为3.36%和4.84%,集合核酸法估算的HIV-1新发感染率分别为3.27%和3.02%,2种方法估算的HIV-1新发感染率差异无统计学意义。结论LAg-Avidity EIA和集合核酸法估算得到2016-2017年云南省哨点MSM HIV-1新发感染率一致性较好,2种方法用于HIV-1新发感染率的连续监测会有较好的稳定性。

限制性抗原亲和力酶免法用于判定男男性行为人群HIV-1血清阳转病例新发感染的检测分析

目的利用限制性抗原亲和力酶免法对男男性行为人群(MSM)HIV阳转病例进行新发感染的估判,并对其他生物学指标进行关联性分析。方法对浙江省2019年MSM阳转率观察队列中发现的15例阳转病例进行流行病学调查,根据暴露史和确证阳性时间计算检测阳转间隔时间。使用限制性抗原亲和力酶免法(LAg-Avidity EIA)、免疫印迹法、CD4^+T淋巴细胞计数和病毒载量对相应样本进行检测,分析各检测结果与新发感染估判的关联,用McNermar检验一致性。结果15例病例的年龄为(31.5±8.0)岁,范围为24~57岁;HIV阳转间隔时间M(P25,P75)为134(89,180)d,最短为40 d,最长为366 d。LAg-Avidity EIA检测为新发感染的7例,长期感染的8例,与检测阳转间隔时间符合率为86.67%,kappa值为0.73。免疫印迹法条带p31、p51、p66、gp120中缺至少2个条带的样本为新发感染者的比例高于长期感染者(P=0.029)。LAg检测判定的新发感染和长期感染两组的CD4^+T淋巴细胞结果(P=0.533)和病毒载量(P=0.467)差异无统计学意义。结论限制性抗原亲和力酶免法结合暴露史可有效用于MSM HIV阳性病例的HIV-1新发感染的估判,免疫印迹带型、CD4^+T淋巴细胞计数和病毒载量可作为估判新发感染的辅助指标。

限制性抗原亲和力酶免法用于MSM哨点HIV-1新发感染检测研究

目的获得新一代人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）新发感染检测方法-限制性抗原亲和力酶免法（LAg—avidityEIA，简称LAg）在现场男男性行为者（MSM）哨点人群中新发感染检测应用结果和与现有BED捕获酶免法（BEDCEIA，简称BED）比较的结果。方法用LAg检测2011年14个省（市、自治区）MSM哨点样本，McNermar方法检验LAg与BED新发感染判定结果的一致性，根据发病率公式计算LAg的HIV-1发病率，与已有的BED的HIV-t发病率比较。结果795份纳入新发感染检测的样本，LAg判定新发感染261人（32．83％，261／795），BED判定新发感染323人（40．63％，323／795）。两种方法判定结果一致率87．17％，Kappa值为0．72，McNermar检验两种方法判定结果一致性差异有统计学意义（P〈0．01）。校正后LAg检测HIV-1发病率为3．94％（95％CI：3．32％～4．56％）、BED检测HIV-1发病率为3．49％（95％CI：2．99％～3．99Voo）；不用FRR校正，LAg和BED获得的HIV-1发病率分别为：4．08％（95％CI：3．52％～4．63％）和3．91％（95％CI：3．38％～4．43％），两种方法计算的校正和未校正HIV-1发病率差异无统计学意义，未校正的HIV-1发病率均高于校正的HIV-1发病率，但LAg校正前后HIV-1发病率变化小于BED。结论对于MSM哨点样本，LAg判定新发感染比例低于BED，用国际公布LAg的校正系数计算我国MSM哨点人群HIV-1发病率与我国人群BED校正系数计算我国MSM哨点人群HIV-1发病率结果基本一致。

限制性抗原亲和力与BED捕获酶免法用于HIV-1新发感染检测的比较研究

目的比较限制性抗原亲和力酶免法(简称LAg)与BED捕获酶免法(简称BED)用于人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)新发感染检测的结果,评价2种方法的适用性。方法应用LAg和BED 2种方法同时检测HIV抗体阳性急性感染期、发病期、常规报告病例样品,用Mc Nermar检验2种方法新发感染检出率和一致性。结果 24份HIV抗体阳性急性感染期病例样品,LAg判定新发感染23份(95.83%),BED判定新发感染24份(100.00%)。328份常规报告病例样品,LAg判定长期感染237份(72.26%),BED判定长期感染224份(68.30%)。71份发病期病例样品,LAg判定长期感染49份(69.01%),BED判定长期感染46份(64.79%)。Mc Nermar检验2种方法对常规报告病例、发病期病例样品及不同的CD4+T细胞计数判定新发感染结果一致性差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 LAg新发感染检出率及错判率低于BED,受CD4+T细胞计数影响较BED小,更加真实地反映新发感染情况。

采用限制性抗原亲和力酶联免疫法估算男男性行为人群HIV-1新发感染率的研究

目的采用限制性抗原亲和力酶联免疫法(LAg-Avidity EIA)估算我国重点地区男男性行为人群(MSM)的HIV-1新发感染率,分析估算结果的偏差及影响因素,为提高估算结果准确性提供参考依据。方法采用群组随机化社区干预对照研究设计,根据人口规模及MSM中HIV感染者数选择20个城市作为研究现场;基于MSM中HIV-1感染率(7%),估算样本量共700例(各城市HIV-1新发感染者35人)。通过MSM手机社交软件,建立检测预约和问卷填写系统,于2019年4-11月开展基线横断面调查并对符合新发感染检测条件的样本进行LAg-Avidity EIA检测;将试验所得参数代入WHO指南中估算公式,得到MSM的HIV-1新发感染率,根据实际情况对结果进行校正。同时梳理样本收集及检测流程,分析影响新发感染率的因素。结果研究对象完成HIV-1初筛10650例中,阳性反应799例,样本缺失198例。实际送检621例,排除误报样本后,完成LAg-Avidity EIA检测520例,其中判定为HIV-1新发感染155例。20个城市MSM的HIV-1新发感染率为4.06%(95%CI:3.27%~4.85%);校正样本缺失后,HIV-1新发感染率为5.53%(95%CI:4.45%~6.60%);同时校正缺失及误报情况后,HIV-1新发感染率为5.66%(95%CI:4.67%~6.65%)。20个城市MSM的HIV-1新发感染率实际值为4.06%~5.66%。结论样本缺失及误报可能导致HIV-1新发感染率的估算偏差。确保样本均来源于调查人群并对样本收集及检测各环节进行严格质控,可减小HIV-1新发感染率的估算偏差。

运用限制性抗原亲和力酶联免疫法估计云南省德宏州婚检与孕产妇人群HIV新近感染率

目的了解云南省德宏傣族景颇族自治州(简称德宏州)2009—2017年婚检与孕产妇人群艾滋病病毒(HIV)新发感染情况。方法婚检人群血浆样本210 486份和孕产妇血浆样本220 703份进行HIV检测,婚检和孕产妇人群HIV检测阳性分别为1 409例和1 475例。对德宏州2009—2017年血浆样本符合新发感染检测条件的388例婚检人群和336例孕产妇人群HIV阳性样本进行限制性抗原亲和力酶联免疫法检测以确定HIV新近感染,估计婚检人群和孕产妇HIV新近感染率。结果 2009—2017年婚检人群各年度HIV新近感染率分别为0.01%、0.04%、0.02%、0.05%、0.05%、0.08%、0.01%、0.03%和0.01%,总体相对稳定,差异无统计学意义(χ~2=13.805,P>0.05)。2009—2017年各年度孕产妇人群HIV新近感染率分别为0.02%、0.11%、0.07%、0.04%、0.04%、0.08%、0.02%、0.04%和0.04%,总体相对稳定,差异有统计学意义(χ~2=15.608,P<0.05)。结论德宏州2009—2017年婚检与孕产妇人群HIV新近感染率均保持较稳定的水平。

北京市通州区2021―2022年新报告HIV-1感染者新发感染状况及流行病学特征分析

目的了解北京市通州区2021―2022年新报告Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)感染者新发感染状况及人群分布特征。方法采用限制性抗原亲和力法,对通州区2021—2022年艾滋病确证实验室经免疫印迹法确证为HIV-1抗体阳性的样本进行新发感染检测。采用χ^(2)检验分析2021―2022年通州区新报告HIV-1感染者新发感染人口学特征,采用二元logistic回归分析评价免疫印迹带型与化学发光COI(cut off index)值在预测HIV-1新发感染中的价值。结果北京市通州区2021―2022年新报告HIV-1感染者308例,新发感染127例,新发感染比例为41.23%。308例通州区新报告HIV-1感染者中,<30岁(新发感染比例为50.89%)、未婚/离异/丧偶(新发感染比例为44.58%)、大专及以上(新发感染比例为46.20%)、无性病史者(新发感染比例为44.75%)的新发感染比例较高,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为7.414、5.563、6.057、3.865,P均<0.05)。不同性别、传播途径、户籍新报告HIV-1病例新发感染比例差异无统计学意义。免疫印迹带型中,p31条带缺失[记作p31(-)](OR=4.361,95%CI:1.529~12.439)、gp41条带缺失[记作gp41(-)](OR=14.542,95%CI:4.285~49.359)易被判定为新发感染,化学发光检测COI值<150的样本被判定为新发感染的可能性是COI值≥150样本的4.072倍。结论2021―2022年通州区新报告HIV-1感染者的新发感染比例均处于高位水平。进一步加强宣传干预措施对区域性疫情防控有重要意义。免疫印迹带型p31(-)、gp41(-),化学发光检测COI值<150在预测HIV-1新发感染中有指示作用。

HIV-1新发感染2种检测方法在MSM哨点人群中的对比

目的限制性抗原亲和力方法(简称LAg)与BED捕获酶联免疫试验(简称BED)在四川省男男性行为者(Men who have sex with men,简称MSM)人群中新发感染检测结果的比较,为该方法在四川省的推广应用和可能存在的问题提供参考。方法收集四川省2015年10个MSM哨点的新发感染检测样本274份,分别用LAg和BED进行检测,2检验分析两种方法新发感染结果判定的一致性,根据Mc Dougal法的中点公式分别计算并比较2种方法的HIV-1新发感染率。结果 274份纳入新发感染检测的样本,LAg判定为新发感染81人(29.56%,81/274),BED判定为新发感染111(40.51%,111/274)。2种方法判定结果的调整一致率为86.72%,2检验分析发现2种方法判定结果一致性差异有统计学意义(P<0.05),BED检出率较高。LAg的HIV-1新发感染率为7.14%(95%CI:5.58%-8.69%),BED的HIV-1新发感染率为7.54%(95%CI:6.13%-8.94%)。结论对于四川省2015年274例MSM哨点样本,LAg判定新发感染比例低于BED,用Mc Dougal法的中点公式计算2种方法的HIV-1新发感染率结果基本一致。HIV-1新发感染率的观察不易采信绝对数值,应以观察变化趋势为宜。

抗逆转录病毒治疗对LAg-Avidity方法的影响

目的研究抗逆转录病毒治疗对限制性抗原亲和力方法(Limiting-antigen avidity enzyme immunoassay,Lag-avidity EIA,简称LAg方法)的影响。方法 2017-10/2018-03收集凉山州布拖县木尔乡、九都乡和特木里镇434例接受抗逆转录病毒治疗病人血样,用LAg方法检测,分析CD4^+T淋巴细胞数、病毒载量数及抗逆转录病毒治疗时间对LAg方法误判的影响,率的比较采用卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 425例纳入分析的样本中,LAg方法误判为新近感染11例,误判比例3.59%(11/425),卡方分析发现随着CD4^+T淋巴细胞绝对计数值的增加,误判比例有所上升,上升趋势有统计学意义(χ^2=5.373,P=0.020);随着病毒载量值的增加,误判比例有所下降,下降趋势有统计学意义(χ^2=6.309,P=0.012);不同的治疗时间,误判比例有所不同,趋势变化无统计学意义(χ^2=0.162,P=0.688)。结论抗逆转录病毒治疗影响LAg-Avidity方法的误判比例,在横断面调查中应该把已开始抗病毒治疗的病人剔除;抗逆转录病毒治疗后,病毒载量值越低、CD4^+T淋巴细胞数越高的样本,越容易被LAg-Avidity方法误判为新近感染;LAg-Avidity方法对抗病毒治疗样本的误判比例不会随着治疗时间的延长而增加。

江苏省男男性行为人群HIV新发感染及影响因素分析

目的分析江苏省MSM的HIV新发感染及影响因素。方法根据2019年全国艾滋病哨点监测方案,2019年4-7月在江苏省13个城市招募MSM,进行问卷调查及实验室检测,应用限制性抗原亲和力酶联免疫法(LAg-Avidity EIA)检测HIV新发感染者,根据中国CDC推荐的基于亲和力方法的计算公式及参数计算新发感染率;采用多因素logistic回归模型分析HIV新发感染的影响因素。结果研究对象MSM 4469人,HIV新发感染率为4.5%(95%CI:3.4%~5.5%)。多因素logistic分析结果显示,相比于≥40岁年龄组、招募途径来自MSM活动场所、艾滋病知识知晓、最近6个月未发生无保护肛交、无梅毒现症感染,18~24岁年龄组(aOR=2.083,95%CI:1.087~3.990)、招募途径来自VCT门诊(aOR=2.125,95%CI:1.175~3.843)、艾滋病知识不知晓(aOR=2.456,95%CI:1.109~5.437)、最近6个月发生无保护性肛交(aOR=3.553,95%CI:2.143~5.889)、梅毒现症感染(aOR=2.414,95%CI:1.033~5.462)的HIV新发感染风险较高。结论江苏省MSM人群HIV新发感染率较高。MSM的艾滋病预防控制,需加强健康教育、推广使用安全套和促进HIV/梅毒筛查工作。

2009—2017年云南省德宏傣族景颇族自治州静脉注射吸毒者和暗娼HIV新发感染率

目的了解2009—2017年云南省德宏傣族景颇族自治州(德宏州)静脉注射吸毒人群(IDU)和暗娼HIV新发感染情况。方法以"德宏州HIV指纹数据库系统"为数据库,纳入2009—2017年德宏州5个县市戒毒所监测点每年新入的IDU,以及暗娼工作场所监测点的暗娼为研究对象,分别为10480和18126名,收集其吸毒相关行为、提供性服务相关行为、社会学和人口学信息等。排除IDU和暗娼HIV抗体阳性者中既往阳性、CD4+T淋巴细胞计数≤200个/μl、艾滋病患者及接受抗病毒治疗者后,符合LAg-AvidityEIA检测的IDU为841例,暗娼为157例,计算IDUHIV校正新发感染率、暗娼HIV未校正新发感染率。结果IDU中共有3444例HIV感染者,缅甸籍884例(25.7%),年龄为(30.4±7.7)岁;中国籍2560例(74.3%),年龄为(36.6±7.3)岁。暗娼中共有228例HIV感染者,缅甸籍109例(47.8%),年龄为(27.1±6.3)岁;中国籍119例(52.2%),年龄为(29.9±11.1)岁。2009—2010、2011—2012、2013—2014、2015—2017年缅甸籍IDUHIV校正新发感染率分别为4.20%(95%CI:-0.55%~8.95%)、7.75%(95%CI:2.95%~12.55%)、11.79%(95%CI:5.38%~18.20%)、10.30%(95%CI:5.67%~14.94%),中国籍分别为3.11%(95%CI:1.59%~4.64%)、0.03%(95%CI:-0.03%~0.08%)、1.55%(95%CI:0.54%~2.57%)、0.58%(95%CI:-0.06%~1.04%);2009—2011、2012—2014、2015—2017年缅甸籍暗娼HIV校正新发感染率分别为0.22%(95%CI:-0.21%~0.64%)、1.24%(95%CI:0.15%~2.32%)、0.55%(95%CI:0.01%~1.08%),中国籍分别为0.62%(95%CI:0.25%~0.98%)、0.11%(95%CI:-0.04%~0.26%)、0.22%(95%CI:0~0.44%)。结论中国籍IDU和暗娼HIV新发感染率呈下降趋势,缅甸籍呈上升趋势。