50种石斛种质资源的遗传多样性及DNA指纹图谱构建

【目的】分析国内外引种石斛种质资源遗传多样性,揭示不同种质间的亲缘关系,为促进石斛种质的有效利用及保护提供参考。【方法】利用ISSR分子标记技术对杯鞘石斛、金钗石斛、檀香石斛等50种石斛进行遗传多样性和亲缘关系研究分析,并构建DNA指纹图谱。【结果】9条多态性高、重复性好的引物共扩增出112个等位基因,其中,多态性位点102个,多态性比率为93.09%。检测的位点数为9~14,平均为12.44;50种石斛属植物的遗传相似系数为0.15~0.95。聚类分析显示,在遗传相关系数0.70处,可将石斛材料分为12个大组。PCR扩增显示,引物UBC808可将50种石斛完全区分开,基于其扩增的14个清晰的多态性条带构建50种石斛的DNA指纹图谱。【结论】50种石斛种间具有丰富的遗传多样性。

中药材厚朴的随机扩增多态性DNA指纹图谱研究

目的 :鉴别中药材厚朴及其伪品、混淆品。方法 :采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品。结果 :此种分子生物学鉴别方法可以获得清晰可靠的DNA指纹图谱 ,根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可准确区分出厚朴、凹叶厚朴和其伪品、混淆品。结论 :RAPD方法可以准确、快速、简便地鉴定中药材厚朴及其伪、混品 ,尤其在正确引种方面具有很高的价值。

用小卫星探针33.6对中华绒螯蟹遗传多态性的DNA指纹图谱研究

运用DIG标记的人源小卫星探针 33 6与用HaeⅢ消化的中华绒螯蟹 (Eriocheirsinensis)基因组DNA杂交 ,进行了中华绒螯蟹种群遗传多态性的非放射性DNA指纹图谱研究。实验表明 :用人源小卫星探针 33 6在中华绒螯蟹DNA指纹图谱中可检测到 1 0个以上位点的遗传变异 ,这些位点均表现丰富的多态性 ;人源小卫星探针 33 6产生的中华绒螯蟹DNA指纹图谱具有个体特异性 ,但未表现出中华绒螯蟹种或种群特异的分子遗传标记 ,长江蟹、辽河蟹与人工繁育长江蟹的群体内相似指数分别为 0 2 92、 0 375和0 30 6;长江蟹与辽河蟹、长江蟹与人工繁育长江蟹、辽河蟹与人工繁育长江蟹群体间相似指数分别为 0 1 78、0 2 66和 0 1 79。

小鼠DNA的限制性片段长度多态性分析

用人类肌红蛋白基因内含子中３３ｂｐ的小卫星ＤＮＡ重复序列为探针，经ｐＢＲ３２２的ＥｃｏＲＩ正向测序引物和α３２ＰｄＣＴＰ在ＴａｑＤＮＡ聚合酶作用下做合成标记，与６种小鼠的ＤＮＡ限制性片段杂交。结果显示，每个品系平均出现可分辨带纹在１３条以上，不同品系小鼠间的杂交带纹表现出高度的多态性。多态性带纹主要分布在６～２３ｋｂ区段；同一近交系的不同个体间的带纹特点及分布完全一致；Ｃ５７与ＡＫＲ及二者与其他鼠间的亲缘关系更远；随机两种品系鼠间的平均相关机率为４１×１０－８。因此，认为此方法可用于不同品系近交系小鼠的亲缘关系鉴别和遗传监测。

中国奠基群奥利亚罗非鱼遗传多态性的DNA指纹图谱

运用 33 6和 33 15两种人源小卫星探针对中国奠基群奥利亚罗非鱼群体进行遗传多态性的DNA指纹图谱研究。结果表明 ,在奥利亚罗非鱼群体中两种探针都能产生个体特异性的DNA指纹图谱 ;两种探针平均检测出 6 2 5条条带 ,其中多态性条带占 5 8 5 % ,个体平均条带数为 7 813 ;奥利亚罗非鱼种群内相似系数为 0 740 ,遗传变异系数为 0 2 6 0 ,证明奥利亚罗非鱼群体的遗传纯度极高 ,遗传多态性很低 ,但仍存在一定的遗传变异 ;DNA指纹图谱中 33 6产生的 7 2kb条带和 33 15产生的 9 4kb条带为奥利亚罗非鱼群体内各个体所共有 ,并且表现出一致的单态性和较强的杂交信号 ,反映了奥利亚罗非鱼在该位点小卫星的群体特征 。

癌细胞mtDNA限制性片段长度多态性分析

目的探讨人癌细胞ｍｔＤＮＡ与正常细胞ｍｔＤＮＡ一级结构的差异。方法采用一步法制备包括肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－Ａ、ＰＬＡ－８０１Ｄ、Ａ５４９、Ａ５３１，肝细胞癌ＳＭＭＣ－７７２１，膀胱上皮癌ＥＪ共６个癌细胞系ｍｔＤＮＡ；用ＰｖｕⅡ、ＸｈｏⅠ、ＰｓｔⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＢｓｔＥⅡ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｐａⅠ、Ｂｃ１Ⅰ、ＥｃｏＲⅤ、ＳｃａⅠ和ＸｂａⅠ共１１种限制性内切酶对所得ｍｔＤＮＡ进行ＲＦＬＰ分析；并用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法分析了癌细胞ｍｔＤＮＡ非编码区结构变化。结果６个癌细胞系其ｍｔＤＮＡ基因编码区的３２个酶切位点均无变异，而有３个癌细胞系在其ｍｔＤＮＡ非编码区第１６２７６位核苷酸处出现了ＥｃｏＲⅤ新的酶切位点。结论提示癌细胞ｍｔＤＮＡ基因编码区一级结构相当稳定，而主要的核苷酸变异可能位于其ｍｔＤＮＡ非编码区。

中国普通野生稻线粒体DNA的限制性片段长度多态性

用BamHI／H454、BamHI／pQT2-7-1、EcoRI／B376和EcoRI／pQT12四种酶／探针组合对85份普通野生稻、亚洲栽培稻和橹稻进行了线粒体DNA的限制性片段长度多态性的分析．共检测到16条多态性带，15种表型，组合成14种线粒体DNA变异类型．其中抽稻和粳稻的线粒体DNA已分化，培稻偏粳型，大部分普通野生稻属（或偏）拉型，但江西的东乡普通野生稻类型比较独特．中国普遍野生稻的线粒体DNA与地理分布相关，湖南的江永、茶陵和江西的东乡等不同的群体以地理位置相聚，随地理梯度遗传分化由少到多．

家畜线粒体DNA限制性片段长度多态性的研究与应用

在阐述线粒体DNA的特点及其限制性片段长度多态性的基础上,介绍了线粒体DAN多态性的研究现状及在家畜育种中的应用,并指出线粒体DNA限制性片段多态分析在家畜品种资源研究中的意义。

用M13噬菌体作探针进行人的DNA限制性片段长度多态性分析

用M13噬菌体作为探针,可以检测人和动物基因组DNA中高度可变的小卫星区域,其有效顺序是该噬菌体基因Ⅲ中的两组15bp的串联重复。本文介绍的是采用随机引物与PCR过程相结合的方法标记M13噬菌体,得到高比活性的探针,与经HinfⅠ消化的人DNA杂交,产生具有高度多态性的DNA图谱,并与33.15探针杂交的DNA图谱进行了比较,证明M13噬菌体是进行DNA多态性分析的一种非常有用的探针。

延吉市土壤中分离的棘阿米巴CJY/S3线粒体DNA限制性片段长度多态性

[目的]观察棘阿米巴土壤分离株CJY/S3的线粒体DNA限制性片段长度多态性.[方法]从棘阿米巴CJY/S3提取线粒体DNA,用EcoRI进行酶切,与广东地区土壤分离株CG/S1进行比较观察限制性片段长度多态性.[结果]延吉市土壤分离株CJY/S3与广东地区土壤分离株CG/S1具有相同的片段模式.[结论]延吉市棘阿米巴土壤分离株CJY/S3与CG/S1具有密切的亲缘关系,而线粒体DNA限制性片段长度多态性分析是棘阿米巴分类简便且有效的方法.

随机DNA探针与限制性片段长度多态性的研究进展

本文综述了随机ＤＮＡ探针的克隆分析及其在限制性片段长度多态性研究中的应用进展，包括高多态性序列与ＤＮＡ指纹图的研究和单拷贝片段的多态性研究成果。并提供了研究ＤＮＡ多样性的数学模式。

琼脂糖凝胶电泳的条件优化——质粒DNA重组片段的限制性内切酶谱鉴定

随着质粒构建,转染,扩增等基因表达相关的分子生物学技术在科研中的广泛开展,DNA的琼脂糖凝胶电泳技术由于其操作简单、快速、灵敏等优点,已成为分离和鉴定生物大分子（核酸）的重要手段和常用方法。影响DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素很多,包括DNA分子大小和构象,琼脂糖浓度,所加电压,电泳缓冲液的离子浓度,

限制性片段长度多态性分析

不同个体在DNA结构上存在着差异,在不编码蛋白质的区域及没有重要调节功能的区域,DNA结构的个体差异更为明显。基因组中一个特定的基因座位(DNA序列)若存在两种或两种以上的状态(等位基因),而且其中任何一个等位基因在人群中的频率不低于1％,这一现象被称为多态性。DNA多态性本质上是染色体DNA中核苷酸数目或排列顺序的个体差异,这些差异多数为中性突变,不引起表型改变。DNA多态性可应用不同的方法进行检测,如DNA序列分析、PCR片段长度多态性(PCR-FLP),单链DNA构型多态性等。

医学分子遗传学讲座 第五讲 限制性片段长度多态性

每个个体在遗传上是不同的,而不同的本质不是在基因产物上,而是在DNA水平上的差异。这些差异大多数都是由于不编码蛋白质的区域和没有重要调节功能的区域发生了中立突变,这些中立突变所构成的DNA变异称为DNA多态性。DNA多态性本质是由于进化过程中的各种原因引起染色体DNA中核苷酸排列顺序发生了改变。

同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征研究

目的探讨同一品种不同产地宁夏枸杞DNA指纹图谱特征。方法采用RAPD技术对全国四大商品区的枸杞道地品种宁夏枸杞的主栽品种宁杞1号的叶片和宁夏商品区的制品枸杞子进行了DNA指纹图谱特征研究。结果四大商品区的宁夏枸杞叶片DNA指纹图谱一致,而制品枸杞子的DNA指纹图谱与叶片的有较大差异。结论DNA指纹图谱用于鉴定同种枸杞的叶片结果可靠。

限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism，RFLP）技术的优点

限制性片段长度多态性（RFLP）技术是最早开发成功、建立在Southern杂交技术上的DNA分子遗传标记技术。RFLP技术的优点：

华南西瓜主要品种DNA指纹图谱构建研究(摘要)

构建华南西瓜主要品种DNA指纹图谱,可应用在品种纯度及真伪鉴定、遗传多样性分析、区试和审定品种的真实性和一致性监控,辅助DUS测试,新品种权纠纷案件的司法鉴定等,同时对彻底弄清华南西瓜种质资源的亲缘关系和类群划分、杂优模式范围等有重要意义。供试材料为华南西瓜主要品种(品系)共18个,分别为‘T2(♀)’、‘乙选(♂)’、‘早佳8424(F1)’、‘改良乙选(♂)’、‘新早佳(F1)’、‘夏龙(♀)’。

水稻品种DNA指纹图谱构建

近年来，DNA指纹鉴定技术飞速发展，无论是理论还是技术方面都取得了巨大的成就。该技术是从DNA水平上检测物种的多态性，它与传统的形态学、细胞学以及蛋白质同工酶检测相比，有着不易受环境影响、可靠准确、经济快速等优势。

贵州传统小曲酵母菌分子指纹图谱分析

采用26S rRNA基因D1/D2区域序列分析方法将59株分离自贵州5个不同地区传统小曲的酵母菌鉴定为6个酵母菌种:1株阿萨丝孢酵母(Trichosporon asahii)、32株扣囊覆膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)、8株Saccharomycopsis malanga、4株伯顿丝孢毕赤酵母(Hyphopichia burtonii)、6株异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)和8株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。本研究展示了6个酵母菌种的WL培养基菌落特征和5.8S rRNA基因ITS区限制性片段长度多态性酶切图谱特征,为这6个菌种的快速鉴定提供依据。在菌种鉴定的基础上,本研究进一步采用串联重复-tRNA指纹图谱法分析酵母菌的种内差异,共展示了17个基因型,H.burtonii、W.anomalus与S.fibuligera分别鉴定出4、3种和8种基因型,其中S.fibuligera基因型10、11、12、15、16与17之间的遗传关系较近,而其余菌种内部基因型之间的遗传关系相对较远。

改良DNA指纹图谱的新技术

DNA指纹技术发明者Alec Jeffreys研究小组开发了一种DNA分类的新方法。由此排除了旧方法的许多局限性。旧方法利用衔接重复小卫星或可变量衔接重复子(VNTR)位点(其重复拷贝数显示高度等位变异),由此,当用限制性酶切时产生可变量DNA片段长度。随着PCR的出现,现已可对极短小的衔接重复小卫星进行扩增,从而提高了该技术的灵敏度。采用PCR法还可以从降解的DNA样本获得指纹的图谱。