花生DNA分子标记的研究 Ⅲ不同限制酶组合AFLP分析效果比较

采用了28对EcoR I/Mse I AFLP选择性扩增引物、64对Pst I/Taq I AFLP选择性扩增引物,对 作图亲本24-3、B4及其杂种F1进行了分析,统计了两种限制酶组合的扩增总带数、多态性带数及多 态性率。秩和检验结果说明,两种限制酶组合AFLP每对引物扩增出的总带数无显著差异,而多态性条 带数目以及多态性率均有极显著的差异。证明尝试不同的限制酶组合可望揭示出花生品系材料间更 为丰富的遗传变异性。

AFLP分子标记技术的改进

对AFLP技术的限制性内切酶组合进行了改进。以两个低频酶组合代替传统的高频酶与低频酶组合进行分子标记筛选，结果表明，采用低频酶组合（EcoRⅠ＋PstⅠ）产生的条带比传统酶切组合（EcoRⅠ＋MseⅠ和PstⅠ＋MseⅠ）要少且分布不均匀，多集中在150～800bp之间，条带信号强度要大，多态性明显得到提高，分子标记筛选成功率也得到了提高，而且其成本更低的特点有利于AFLP技术在我国的进一步推广普及。