除莠霉素A结构类似物M3、M4的分离鉴定及对肿瘤细胞的活性

吸水链霉菌NND-52发酵液的上清液经乙酸乙酯萃取,硅胶柱粗分离,经制备型高效液相色谱仪分离纯化,得除莠霉素A(herbimycinA)、黄色M3纯品和浅黄色M4粗品,粗品结晶后获得M4的白色针状结晶;通过基本理化性质和光谱分析,确定M3、M4分别为除莠霉素C(herbimycinC)、双氢除莠霉素A;噻唑蓝(MTT)法检测除莠霉素A、除莠霉素C及双氢除莠霉素A对Vero、B16-F10细胞增殖的影响,对肿瘤细胞活性强度顺序为:除莠霉素C>除莠霉素A>双氢除莠霉素A。除莠霉素C可能是一种更具潜力的抗肿瘤抗生素。

四硫化四砷STI571和除莠霉素诱导K562细胞凋亡的研究(英文)

目的 目前慢性粒细胞性白血病 (CML)的化疗效果仍不理想 ,为寻找对CML敏感的药物 ,该研究探讨四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素对CML细胞株K5 6 2的作用。方法 通过MTS方法检测三种药物在不同浓度 (0 .0 1 ,0 .1 ,1 .0 ,2 .0 ,5 .0 ,1 0 .0 μmol/L)下对K5 6 2细胞活力的影响。采用瑞氏染色、荧光染色和琼脂糖凝胶电泳观察药物处理后细胞形态学的变化和细胞凋亡的发生。用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 用 5 .0 μmol/L的四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素培养 3天 ,K5 6 2细胞活力明显下降 ,其吸光值分别为 0 .32± 0 .0 4 ,0 .4 9± 0 .0 1 ,0 .6 9± 0 .0 2 ,其中四硫化四砷和STI5 71对细胞的抑制作用强于除莠霉素 (P <0 .0 1 ) ,前两者间无明显差异 (P >0 .0 5 )。 1 .0 ,5 .0 ,1 0 .0 μmol/L的四硫化四砷对K5 6 2细胞的抑制作用呈时间依赖关系 (P <0 .0 1 )。小于 1 .0μmol/L的四硫化四砷对K5 6 2细胞活力无明显影响。四硫化四砷培养 2 4至 4 8小时后 ,K5 6 2细胞出现染色质浓缩、核碎片及凋亡小体等典型的凋亡形态学改变。用 5 .0 μmol/L的四硫化四砷、STI5 71和除莠霉素培养 72小时后 ,K5 6 2细胞的凋亡率分别为 6 8.8%、5 6 .7%和 35 .5 % ,2 .0与 3.0 μmol/L的四硫化四砷诱导K5 6 2细胞凋?

利用链霉菌固体发酵农业废弃物产生除莠霉素A的研究

[目的]研究链霉菌JXJ-115利用农业废弃物进行固体发酵产生除莠霉素A的发酵条件。[方法]利用农业废弃物作为培养基主要成分,对链霉菌JXJ-115进行固体发酵,评估其产生除莠霉素A的能力。[结果]链霉菌JXJ-115能利用各种农业废弃物通过固体发酵产生除莠霉素A,其中甘蔗渣是最有效的基质,其次是棉花杆、玉米秸秆、稻草、小麦秸秆。优化后产生除莠霉素A的最佳培养基组成是：甘蔗渣50.00 g,可溶性淀粉5.00 g,大豆粉5.00 g,（NH4）2SO40.25 g,K2HPO40.25 g,CaCO30.50 g,NaCl 0.25 g,MgSO4.7H2O 0.50 g,pH值6.0。接种后的培养基含水量68%～69%,30℃培养8 d,第3天检测到除莠霉素A,第8天达到最大值0.82 mg/g。[结论]该研究为我国可再生资源的综合利用开辟了新的途径。

除莠霉素A对稗草磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的影响

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（ＰＥＰＣ）是Ｃ４植物的光合关键酶，１００ｍｇ／Ｌ除莠霉素Ａ对ＰＥＰＣ活性有完全的抑制作用，而对Ｃ３植物的光合关键酶１，５－二磷酸核酮糖羧化酶（ＲｕｂｉｓＣＯ）的活性却没有影响。

溴化乙锭对吸水链霉菌产生除莠霉素的影响

从南京土壤中分离到一株吸水链霉菌，命名为ＮＡＰ－０５，该菌株能产生除莠霉素，并且在菌体细胞内存在另一种初步鉴定为聚醚类抗生素的物质。该菌还能分泌淀粉酶。用嵌入染料如溴化乙锭（ＥＢ）等处理该菌株，发现ＥＢ处理株大部分仍保持产抗能力，而用吖啶橙（ＡＯ）处理亲株后，大部分的处理株失去除莠霉素产生能力。用原生质体再生方法处理ＮＡＰ－０５，发现多数再生株的产抗能力下降，提示ＮＡＰ－０５菌株的除莠霉素生物合成调节可能受到染色体外因子的影响。

用选择性指示菌筛选除莠霉素A高产菌株

以吸水链霉菌NND 5 2菌株为原始菌株 ,利用紫外诱变和LiCl复合处理 ,采用琼脂柱移菌法进行初筛。用清酒酵母作为特异性指示菌 ,经复筛获得一株除莠霉素A高产菌株 ,产量为 980 0 9μg·mL-1 ,比原始菌株提高了 2 2 6倍。

链霉菌YJ-81中活性成分的分离、鉴定及除草活性

YJ-81是从黑龙江地区岩蕨植物根际土壤分离到的具有除草活性的链霉菌,为了明确其活性化合物的分子结构及除草活性,利用硅胶柱层析、凝胶柱层析和半制备高效液相色谱对菌株YJ-81的发酵液采用除草活性跟踪法进行了活性化合物的分离纯化,并运用核磁共振波谱技术确定活性化合物1为除莠霉素A。杂草和农作物种子萌发试验结果表明,质量浓度100 mg/L的除莠霉素A可完全抑制狗尾草和稗草的种子萌发,对反枝苋、马齿苋、藜等杂草以及玉米、西瓜、水稻和番茄种子的萌发也有一定程度的抑制。盆栽试验结果表明,100 mg/L的除莠霉素A可显著抑制反枝苋、马齿苋、藜的生长,同时对狗尾草、稗草和番茄也有不同程度的抑制作用,但对玉米、水稻和西瓜的生长无影响,特别是对玉米安全,即使喷施1000 mg/L时也不会对玉米的叶片产生药害症状,玉米的地上部分鲜重和叶片叶绿素含量与未喷施药物的对照相比无显著性差异。以上结果表明,除莠霉素A对玉米具有很高的安全性,可作为玉米田间的苗后选择性除草剂进行开发。

链霉菌NND－52菌株及其次生代谢物的鉴定

对从土壤中分离的ＮＮＤ－５２菌株的形态、培养特征、生理生化特征及其拮抗性进行综合分析，确定该菌株属于吸水链霉菌。该菌表现了对水稻纹枯菌、小麦赤霉菌等植物病原菌的抑制活性。发酵上清液对稗草、马唐等杂草显示除草活性。上清液中活性成分经提纯结晶并经紫外吸收光谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱检测及元素分析，证实其结构为除莠霉素Ａ（ｈｅｒｂｉｍｙｃｉｎＡ）。ＮＮＤ－５２菌株的菌丝体干粉添加于饲料中喂鸡，表现出抗鸡球虫并使鸡增重的效果。