陵水暗罗活性成分研究

从陵水暗罗（ｐｏｌｙａｌｔｈｉａｎｅｍｏｒａｌｉｓＡ．ｅｔＤＣ）根的乙醇提取物中分离得到五个化合物。经光谱（ＵＶ，ＩＲ，１Ｈ－ＮＭＲ，１３Ｃ－ＮＭＲ，ＤＥＰＴ和ＭＳ）解析和化学反应，分别鉴定为暗罗素（ｚｉｎｃｐｏｌｙａｎｅｍｉｎｅ，ＰＮ１），２－巯基吡啶－Ｎ－氧化物铜盐（ＰＮ２），β－谷甾醇（ＰＮ３），β－谷甾醇－β－Ｄ－吡喃葡萄糖甙（ＰＮ４）和２－巯基吡啶－Ｎ－氧化物－２－Ｓ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖甙（ＰＮ５），其中ＰＮ５为新化合物，ＰＮ２为新天然产物。ＰＮ１和ＰＮ２有较强抗疟、防霉杀菌作用。ＰＮ５的抗疟、防霉试验尚在进行中。

陵水暗罗枝、叶中的化学成分

目的:对陵水暗罗Polyalthia nemoralis枝、叶中的化学成分进行分离和鉴定,并筛选细胞毒活性。方法:以硅胶、大孔吸附树脂和Sephadex LH-20色谱柱进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。采用MMT法筛选细胞毒活性。结果:从乙醇提取物中分离鉴定了14个化合物,即丁香酸(1),3-甲氧基-4-羟基肉桂酸(2),香草酸(3),4-羟基苯甲酸(4),毛里求斯排草素(5),番荔枝宁(6),(+)-oblongine(7),(+)-N-甲基网叶番荔枝碱(8),赤藓醇(9),D-甘露醇(10),乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(11),(+)木兰花碱(12),千金藤宁碱(13),(2S,4R)-4-羟基-2-哌啶羧酸(14)。结论:14个化合物均为首次从本属植物中分离得到;MTT法测得化合物6和13对多种肿瘤细胞有生长抑制作用。

陵水暗罗枝、叶中的阿朴菲生物碱

目的：对陵水暗罗Polyalthia nemoralis枝、叶中的阿朴菲生物碱进行分离和鉴定，并测细胞毒活性。方法：采用硅胶和凝胶柱色谱方法进行分离纯化，利用波谱数据和理化常数鉴定化合物的结构；MrlT法测试细胞毒活性。结果：从乙醇提取物中分离鉴定了5个阿朴菲生物碱，分别为bidebilineA（1），annobraine（2），lanuginosine（3），鹅掌楸碱（1iriodenine，4），oxostephanosine（5）。结论：化合物2，5为首次从该属中分到，1，3，4为首次从该植物中分离得到；化合物3—5对多种癌细胞生长有抑制作用。

中药陵水暗罗提取物暗罗素逆转卵巢癌细胞顺铂耐药研究

目的:探讨陵水暗罗提取物暗罗素(ZPT)对耐药卵巢癌细胞株顺铂(DDP)敏感性的影响。方法:MTS法检测暗罗素和顺铂对卵巢癌细胞株A2780和耐药株A2780/DDP的增殖抑制效应。Western Blot法检测A2780和A2780/DDP细胞株p65蛋白表达水平,荧光素酶法检测A2780和A2780/DDP细胞株NF-κB活性。结果:暗罗素可以显著抑制人卵巢癌细胞株A2780和耐药株A2780/DDP的增殖活性[A2780和A2780/DDP的半数抑制浓度(IC50)值分别为1.498μmol/L和1.516μmol/L];联合组(0.5μmol/L暗罗素+5μmol/L顺铂)相对于顺铂单药组,显著下调A2780/DDP的增殖活性(80.80%vs 35.63%,P<0.01)。荧光素酶法检测A2780和A2780/DDP细胞株的NF-κB活性显示,A2780/DDP组NF-κB活性是A2780组的1.92倍(P<0.01);Western Blot法检测p65蛋白表达水平,提示A2780/DDP组p65蛋白表达显著高于A2780组。相对于对照组,0.5μmol/L暗罗素可以显著下调NF-κB活性(100%vs 39.69%,P<0.01)。Western Blot法检查0.5μmol/L暗罗素对A2780/DDP抗凋亡蛋白Bcl-2的影响,发现暗罗素可以显著抑制Bcl-2蛋白表达。结论:陵水暗罗提取物暗罗素可以增加顺铂耐药细胞株A2780/DDP对顺铂的敏感性,暗罗素下调NF-κB-Bcl-2途径活性可能是其逆转顺铂耐药机制。

陵水暗罗枝、叶中的巯基吡啶类化合物及其细胞毒活性研究

目的：对陵水暗罗Polyalthia nemoralis枝、叶中的巯基吡啶类化合物进行分离、鉴定，并进行体外细胞毒活性筛选。方法：以硅胶、大孔吸附树脂和SephadexLH-20色谱柱进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。采用MTT法对所得到的化合物进行5种人肿瘤细胞系的生物活性检测。结果：分离鉴定了8个化合物，分别为：暗罗素（1），2-巯基-N-氧化吡啶镍盐（2），2-巯基-N-氧化吡啶铜盐（3），2-甲磺酰基吡啶（4），2，2＇-二吡啶基二硫醚（5），2-吡啶基硫醇-N-氧化物（6），2-巯基吡啶-N-氧化物-2-β-D-吡喃葡萄糖苷（7），以及吡啶-N-氧化物（8）。结论：化合物2，4—6，8是新天然产物。体外活性筛选结果表明化合物1～3，6具有较强的细胞毒活性，化合物5具有较弱的细胞毒活性。

陵水暗罗根超临界CO_2萃取物的GC-MS分析及其体外生物活性评价

目的:提取、鉴定陵水暗罗根提取物中挥发性成分,并评价其体外生物活性。方法:采用超临界CO2萃取法提取陵水暗罗根中的挥发性化学成分,气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析其化学成分组成;以0(空白对照)、5、10、20、30、40、50μg(生药)/ml提取物培养人肝癌Huh-7细胞24 h后,采用MTT法测定其对细胞的抑制作用,计算相对细胞活力和半数抑制浓度(IC50);分别采用纸片琼脂扩散法和肉汤稀释法测定其对金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和粪肠球菌等菌株的体外抗菌活性。结果:从陵水暗罗根超临界CO2萃取物中分离鉴定了40个化合物,主要成分为(Z,Z,Z)-9,12,15-octa-decatrien-1-ol、甘油、肉桂醛、棕榈酸和丁香酚等;与空白对照组比较,陵水暗罗根提取物在5μg(生药)/ml以上质量浓度时对细胞生长有显著抑制作用(P<0.05),且随着质量浓度的增加抑制作用增强,IC_(50)值为5.2μg(生药)/ml;两种抑菌试验均未检测出其具有抑菌活性。结论:超临界CO_2萃取法和GC-MS法能有效提取和鉴定陵水暗罗根超临界CO_2萃取物的挥发性成分;提取物表现出抑制细胞活力的作用,但无抗菌活性。

陵水暗罗提取物暗罗素抗人肾癌细胞效应研究

目的:研究陵水暗罗提取物暗罗素(ZPT)抑制肾癌细胞株的效应。方法:MTS法检测ZPT联合ZnCl_(2)对肾癌细胞786-O和769-P的增殖抑制效应,并计算两株细胞ZPT的IC_(50),同时检测ZPT联合ZnCl_(2)对两株肾癌细胞增殖抑制的浓度效应和时间效应;克隆形成实验检测ZPT联合ZnCl_(2)对两株细胞克隆形成的影响,流式细胞仪检测ZPT联合ZnCl_(2)对两株细胞凋亡的影响。结果:ZPT联合50μmol/L ZnCl_(2)可以抑制肾癌细胞株786-O和769-P的增殖活性,其效应呈剂量依赖性和时间依赖性,联合50μmol/L ZnCl_(2)处理72 h后,IC_(50)值分别为501.8 nmol/L和694.7 nmol/L。固定ZnCl_(2)浓度为50μmol/L,随着ZPT浓度增加,两株细胞的成活率逐渐下降,ZPT剂量为3 200nmol/L时,786-O和769-P细胞存活率分别为20.23%和24.75%。500 nmol/L和700 nmol/L ZPT联合50μmol/L ZnCl_(2)处理786-O和769-P细胞随处理时间增加细胞增殖抑制效应增强,处理时间为72 h后786-O和769-P细胞存活率分别为43.55%和38.16%。克隆形成实验显示500 nmol/L和700 nmol/L ZPT联合50μmol/L ZnCl_(2)处理786-O和769-P细胞10 d后,两株细胞的克隆形成率分别为对照组(DMSO)的40.24%和45.24%。流式细胞仪检测细胞凋亡水平显示:500 nmol/L ZPT联合50μmol/L ZnCl_(2)处理786-O 12 h后凋亡明显增加(DMSO vs ZPT+ZnCl_(2)组:1.67%vs 36.04%)。结论:暗罗素联合锌离子可以抑制肾癌细胞株增殖,其效应呈剂量和时间依赖性;同时抑制两株细胞的克隆形成率,增加肾癌细胞的凋亡。