隆线溞[Daphnia(Ctenodaphnia)carinata]卵鞍的超微结构

在不利的环境条件下,枝角类中有一部分种类可以形成卵鞍(ephippium),内含休眠卵。本文应用扫描电镜和透射电镜对隆线溞的卵鞍进行了超微结构的研究。研究表明:卵鞍外面大部分略呈浅的蜂窝状,内面则排布着多数卵石状小突起。卵鞍分为内外两层,两层的超微结构截然不同;各层又可分为三小层。

低PH、铝和钙离子对隆线溞(Daphnia carinata King)生存、生长及繁殖的影响

本文用急性和慢性生物测试方法,研究了低PH、铝和钙离子对隆线溞(D.carinata)的毒性影响,结果表明,隆线溞的存活率随PH(4.2-7.4)的上升而提高,24h和48h的PHLC50分别为4.67±0.04和4.97±0.15,低PH(5.0-5.6)和铝有明显的协同作用,能使水蚤的存活率、生长率和产存总数下降。钙离子对低PH的毒性有一定的缓解作用。

镉诱导隆线溞(Daphnia carinata)生殖转化基因差减cDNA文库的构建与分析

采用抑制性差减杂交方法进行了镉诱导下隆线溞生殖转化基因的抑制性差减cDNA文库的构建研究。结果显示,其差异表达基因被富集了210倍左右,PCR鉴定发现95%的克隆均含有200—800bp的插入片段;测序获得的252个有效EST中,与细胞分裂相关的有4个,与细胞结构和功能相关的有52个,与细胞代谢相关的有34个,与信号传导相关的有16个,与细胞防御相关的有10个,与基因和蛋白质表达相关的有76个,未知功能的EST有22个,在GenBank中找不到任何同源序列的EST有38个。结果表明,构建的差异表达cDNA文库具有很强的差减效率,可较好地反映镉诱导下隆线溞差异表达的生殖转化基因信息。

微颗粒紫菜粉投喂量对隆线溞(Daphnia carinata)种群增长的影响

为了探索微颗粒紫菜粉在枝角类中培养的效果，采用Banta液、微颗粒紫菜粉（0．12mg／mL、0．16mg／mL和O．20mg／mL）、紫菜粉酶解液（1．2％、1．6％和2．0％）3种食物投喂隆线潘（Daphniacarinata），并通过隆线潘的种群密度变化，比较不同食物及投喂量下的培养效果。结果表明：以紫菜粉酶解液组培养效果最好，尤以1．6％酶解液组，种群密度最高，达5．73ind／mL，且高峰维持时间较长；投喂微颗粒紫菜粉的培养效果不及酶解液组，以O．16my,／mL组培养效果最好，最高密度为2．87ind／mL；Banta液培养组的潘群密度较稳定，种群最高密度为3．33ind／mL，但培养的潘体较小。实验还显示，培养液的pH值以8．0～8．2时培养效果较佳。

隆线溞(Daphnia carinata king)的呼吸代谢测定

本文用Winkler法测定隆线溞(Caphnia carinata king)不同龄期个体的耗氧量及二幼龄个体在不同温度下的耗氧量。测得幼龄与成龄两阶段,其耗氧量分别以4.88×10^(-2)与1.695×10^(-1)的速率随体重增加而增大,耗氧率则分别随体重的增加而逐渐降低;在常温下,隆线溞耗氧量Y与温度X呈Y=3.69×10^(-3)×1.07~x的指数函数关系,由此得到,17℃—19℃是隆线搔生长速率快而耗氧量较小的最适人工培养温度。

隆线溞营养成分分析及高温胁迫对抗氧化酶活性的影响

为了分析隆线溞(Daphnia carinata)作为饵料生物的价值和其在不同温度下抗氧化损伤能力的情况,测定了重庆荣昌境内隆线溞的氨基酸和脂肪酸含量;同时研究了温度对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)3种酶活性的影响。结果显示:17种氨基酸含量占干重29.82%,9种必需氨基酸占18.91%,组氨酸含量最高(7.83%),蛋氨酸含量最低,未能检测到色氨酸;主要脂肪酸为C20∶5ω3(EPA)、C16∶0、C16∶1和C18∶1,必需脂肪酸高达38.88%,不饱和脂肪酸高达70.54%,ω-3高不饱和脂肪酸(ω-3 HUFA)高达27.41%,同时含有C20∶4ω6(AA)和C22∶6ω3(DHA)。温度20～35℃对隆线溞抗氧化酶活性影响显著(P<0.05),25℃以上的高温使SOD与CAT酶活显著下降,35℃的高温胁迫导致二者抗氧化能力急剧减弱。

利用隆线溞趋光行为评价铬的生物毒性

报道了以隆线单克隆Dc42为生物监测器,利用其趋光行为变化评价铬生物毒性的方法.结果表明,隆线趋光行为抑制率能较好地反映水中铬的污染程度.在重铬酸钾标准毒物溶液中,趋光指数与Cr6+的浓度呈极显著负相关(R2=08089,P<0001),Cr6+浓度的检测下限为0056mg·L-1,远低于LC50和EC50,平均精度达到546%,说明趋光指数法用于监测化学物质生物毒性灵敏度高、精确可靠.

Cr^(6+)的隆线溞趋光指数与LC_(50)急性毒性的比较

采用隆线 (D .carinata)为试验生物 ,研究Cr6+ 对隆线趋光指数的影响 ,并与LC50 急性毒性结果进行了比较 .结果表明 ,水的趋光指数 (Ip)与铬浓度存在着显著的相关关系 (y =0 391- 0 5 14x ,R2 =0 81) ,3h的Ip 监测下限为 0 0 5 6mg·L-1,分别是LC50 ( 2 4h)及LC50 ( 48h)的 2 3 6 0 %和 39 0 0 % ,仅相当于LC50 ( 96h) .因此 ,利用水趋光指数 ,可能为评价水体的健康状况提供一种快速。

隆线溞雄性生殖系统的组织学研究

隆线潘雄性生殖系统由一对精巢、一对输精管和一个雄性生殖孔组成.精巢呈腊肠形,管壁由结缔组织膜和生殖上皮构成.输精管呈细直管状,末端膨大,管壁以结缔组织膜为主.雄体的生殖细胞发生经历精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和成熟精子五个时期.成熟精子呈棒状.精子群的发生具有同步化趋势.雄体的性成熟一般经历四个龄期.隆线溞雄性生殖系统在结构与功能上表现出相对的原始性和适应性,两者相互结合,使以隆线溞为代表的枝角类更能适应复杂多变的生活环境.

隆线溞孤雌溞生殖系统的组织学

隆线孤雌的生殖系统由一对卵巢、一对输卵管和一对雌性生殖孔组成。卵巢长管状 ,管壁由结缔组织膜和单层上皮细胞构成 ,末端渐细为一短小的输卵管 ,输卵管末端为雌性生殖孔。卵子的发生是由生发区细胞向卵巢内增殖分化 ,不同成熟度的生殖细胞在管腔内排列成生殖带。根据卵母细胞细胞核的大小及卵黄的累积情况等 ,将卵子的发生划分为三个时期 :卵原细胞、卵母细胞和成熟卵子 ,其中卵母细胞的发生又可细分为三个时期 :前期、中期和后期。后期的卵母细胞含较多的卵黄颗粒 ,最后成为成熟卵子 ,排入孵育囊内形成夏卵。隆线孤雌的卵巢发育要经历五个幼龄期 ,不同的龄期 ,卵巢的形态结构不同。至第五幼龄 ,卵巢已基本发育成熟 。

利用隆线溞趋光行为检测水体中五氯酚钠和镉的研究

采用自主选育的隆线溞单克隆体作为试验生物,研究了五氯酚钠(PCPNa)和镉对隆线溞趋光指数的影响,并与急性毒性试验方法进行了比较.结果表明,在试验浓度范围内,水溞的趋光指数分别随五氯酚钠和镉浓度的升高而降低,呈极显著线性关系,说明隆线溞趋光指数的变化可以指示水体中这2种毒物的生物有效浓度.PCPNa使隆线溞趋光指数(3h)发生显著改变的下限浓度为0.18mg·L-1,远低于LC50(96h)(0.59mg·L-1),上限浓度大于3.20mg·L-1,也远高于LC50(24h)(0.73mg·L-1),表明隆线溞趋光指数法比急性毒性试验法的灵敏度高,检测范围大,耗时短.在试验溶液范围内,五氯酚钠和镉之间不存在明确的相互作用关系.

隆线溞生殖细胞成熟分裂过程中染色体的组型观察

取隆线溞[Daphnia(Ctenodaphnia)carinata]孤雌溞的生殖腺细胞进行染色体数量和核型分析,得到隆线溞染色体数目为n=10,2n=20,其核型公式为2n=20=6M+4SM。隆线溞染色体的数目与栉溞亚属[Daphnia(Ctenodaphnia)]中大多数种类一致,进一步验证了隆线溞的分类地位。在此基础上,取隆线溞孤雌溞的卵子(简称夏卵)、两性雌溞的卵子(简称冬卵)及雄溞的生殖腺,利用节肢动物染色体压片的方法,比较观察3种生殖状态的溞体在生殖细胞成熟分裂过程中染色体的组型变化。结果表明:隆线溞孤雌溞的卵子不需交配直接排入孵育囊,只经历1次成熟分裂,然后胚胎开始卵裂。两性雌溞的卵子则在与雄溞交配后排入孵育囊,卵子经历2次正常的成熟分裂,第一次为减数分裂,第二次为有丝分裂,姐妹染色单体分开,形成单倍体的配子,配子与精子结合形成受精卵,然后开始卵裂。隆线溞雄溞生殖细胞同样经历了2次正常的成熟分裂,第一次为减数分裂,第二次为有丝分裂,形成单倍体的精子。隆线溞这种既具有低等生物的孤雌生殖方式,又有高等动物的有性生殖方式,可能是其在长期进化过程中对环境的适应性表现,也可能是动物由低等向高等进化的一个中间过程。本研究通过对隆线溞孤雌溞、两性雌溞及雄溞生殖细胞发生过程中染色体的组型变化观察,初步阐明了隆线溞生殖发育的变化规律,旨在为实现枝角类生殖发育的人为调控奠定基础。

城市综合污水处理厂污泥对Daphnia magna的急性毒性与毒物特征

以城市综合污水处理厂污泥的浸提液对 Daphnia magna的 2 4h急性毒性为指标 ,研究了污泥放置时间与其毒性的关系。结果表明 ,污泥对 Daphnia magna的急性毒性随放置时间的增加逐渐增大 ,但在放置两个月后毒性趋于稳定。对放置 3 d和 84d的污泥 ,利用 TIE(毒性鉴别评价 )方法对其浸提液进行了毒物特性鉴别 ,结果表明 ,放置 3 d的污泥 ,浸提液毒性主要由酸性条件下易挥发的物质引起 ;放置 84d的污泥浸提液中的毒物主要为金属离子和易与酸碱反应的物质。

隆线溞精子发生及成熟精子的超微结构

用透射电镜和扫描电镜观察隆线精子的发生过程及成熟精子的超微结构。隆线精子发生经历精原细胞、精母细胞、精子细胞和成熟精子四个时期。精原细胞核染色质凝集成团,细胞质内有线粒体、粗面内质网分布。精母细胞核染色质分散,不均匀地分布于核中,细胞质内粗面内质网聚集。在精子细胞分化形成精子的早期,细胞纵向拉伸,核物质开始浓缩;中期精子细胞呈明显的长条形,精子细胞逐渐移入精巢管腔中央,外围包裹一厚层精子鞘;后期精子细胞已进入管腔中,核物质呈高度浓缩状,细胞质层较少,精子细胞间通过外围精子鞘相互粘连成片。成熟精子分散在精巢管腔中央,外形呈棒状,一端稍钝,一端稍尖,无鞭毛、棘突等附属物;核内染色质解聚,均匀分布在核中,具双层核膜,细胞质层很少,精子鞘为单层,无法确认顶体端。隆线雄性生殖细胞的结构及其发生过程均较高等甲壳动物简单和原始,但在功能上表现出相对的适应性。

隆线溞孤雌卵胚胎发育的形态学研究

采用组织学方法较为系统地研究了隆线溞(Daphnia carinata)孤雌卵(夏卵)胚胎发育的全过程.隆线溞夏卵为中黄卵,室温24℃下,整个胚胎发育过程需45h左右.根据隆线溞胚胎内部结构特征及外部形态学变化,将其胚胎发育分为卵裂期、囊胚期、原肠期、前无节幼体期、后无节幼体期、复眼色素期和准备孵化期7个时期.卵排至孵育囊约40min后开始表面卵裂.卵裂至256细胞时,胚胎发育进入囊胚阶段,在卵表形成一薄层细胞层,囊胚腔则全被卵黄颗粒所充塞.囊胚后期,囊胚层细胞分裂加快,相互挤压向囊胚腔中移入形成原肠胚.随后,胚胎外部形态开始出现变化.首先在胚胎前端出现头部的三对附肢原基(两对触角原基及一对大颚原基),胚胎发育进入前无节幼体期;随后胸节分化,胚胎发育进入后无节幼体期,并形成胸肢、壳瓣和肠道等结构.复眼在复眼色素期的基础上,逐渐发育形成完整的复眼结构,同时其他各组织器官也不断发育完善.至准备孵化期的胚胎结构与幼体已基本相同.以上研究结果可为深入研究枝角类胚胎发育的机理积累基础生物学资料.

砷与氟对隆线溞的急性毒性及安全浓度分析

为评价砷与氟对水生生物的生态毒性效应,参照国际标准化组织(ISO)标准测试方法,以隆线溞(Daphniacarinata)为试验生物,分别研究了砷与氟单独及共存时的急性毒性效应。结果表明,在污染物单独存在时,砷对隆线溞24 h、48 h、72 h、96 h LC50分别为3.50 mg/L、3.16 mg/L、2.22 mg/L、1.43 mg/L,氟对隆线溞24 h、48 h、72 h、96 h的LC50分别为253.94 mg/L、144.42 mg/L、96.12 mg/L、70.68 mg/L;计算出砷与氟对隆线溞安全质量浓度分别为0.01 mg/L、0.71 mg/L,所得安全浓度远低于我国部分水域砷与氟浓度值;砷与氟以毒性1∶1混合共存时,24 h、48 h、72 h和96 h对隆线溞的联合毒性效应均表现为拮抗作用;与大型溞(Daphnia magna)相比,隆线溞对砷和氟毒性较敏感,是较理想的环境污染监测生物。

三苯基锡和三丁基锡对大型蚤(Daphnia magna)的毒性作用研究

本研究测定了三苯基锡(TPT)和三丁基锡(TBT)对大型蚤(Daphnia magna)的急性毒性及慢性毒性,同时研究了环境因素(腐殖酸、硬度、酸度)对TPT和TBT的24h-EC_(50)的影响 结果表明,TPT和TBT对大型蚤的24h-EC_(50)分别为13.33μgSn·1^(-1)和3.91μgSn·1^(-1).慢性实验结果表明,TPT对大型蚤的生长繁殖有一定的抑制作用,各种环境因素对TPT和TBT的24h-EC_(50)有很大影响.

温度和食物浓度对大型溞Daphnia magna种群动态和两性生殖的影响

在4个温度（15、20、25、30℃）和3个食物浓度（1×10^4,1×10^5,5×10^5cells ml-1）下研究了大型溞（Daphnia magna）淮河种群的动态和两性生殖,结果表明：（1）在实验初期,大型溞种群密度不断增加,达到最大值后种群密度呈现缓慢下降或趋于稳定的趋势。除15℃下最大瞬时增长率（1.36 d^-1）出现在中食物浓度组外,20℃（1.51 d^-1）、25℃（1.39 d^-1）、30℃（0.69 d^-1）下的最大瞬时增长率均出现在高食物浓度组。（2）相同温度下,食物浓度与大型溞最大种群密度间存在显著正相关（p〈0.01）。（3）相同食物浓度下,随温度升高,大型溞首次产幼溞时间（5～21d）和到达最大种群密度的时间（15～29d）缩短,首次抱卵时的体长（1.75～2.67 mm）减少。（4）在较低的温度和中食物浓度组下,大型溞产生了较多的休眠卵或卵鞍（15℃：（16.7±2.5）ind.和20℃：（18.3±3.8）ind.）;30℃下没有出现休眠卵或卵鞍。除15℃、中食物浓度组外,其它实验组均产生雄体。实验25d后,雄体密度与种群密度呈显著的相关性（30℃：p〈0.05;15～25℃：p〈0.01）。（5）本研究结果暗示大型溞休眠卵的形成受温度、食物浓度和种群密度的共同影响,且较低的温度是大型溞休眠卵形成的主要诱因。

铜的形态分布与Daphnia magna急性毒性关系

本文利用化学平衡模式MINTEQA2研究不同酸度、碱度和有机配体存在下铜的形态分布特点,通过Daphnia magna毒性试验获得形态变化时的毒性变化规律.结果显示:无论是总量(无机形态总量),还是游离态浓度,都不能反映出铜的毒性大小.为此我们提出用活性态浓度来表征铜的毒性大小,较好地解释了不同体系中铜的毒性变化规律.

双酚A和壬基酚对隆线溞和微型裸腹溞的毒性

我们以隆线溞和微型裸腹溞为实验动物,进行了两种酚类内分泌干扰物双酚A(BPA)和壬基酚(NP)的毒性效应研究。急性实验测定出双酚A对隆线溞的24h和48h半数致死浓度(LC50)为:12.02mg/L和11.64mg/L,对微型裸腹溞24h和48h半数致死浓度LC50为:13.70mg/L和9.63mg/L。而壬基酚对隆线溞的24h和48h半数致死浓度(LC50)分别为:0.221mg/L和0.159mg/L,对微型裸腹溞的24h和48h半数致死浓度(LC50)分别为:0.334mg/L和0.126mg/L。实验表明微型裸腹溞对双酚A和壬基酚的敏感度高于隆线溞,能够很好的指示水环境的污染。慢性毒性实验发现双酚A对微型裸腹溞后代的雌雄比例有明显的影响,影响类似于hormesis现象。而壬基酚对隆线溞的慢性毒性研究发现,隆线溞的生活史、后代成活率均受到暴露的壬基酚浓度升高的不利影响庑┭芯勘砻?低浓度双酚A长期暴露的潜在毒性与高浓度壬基酚的急性毒性在这两种内分泌干扰物污染环境的研究中有重要意义。