随机回转模拟失重对成骨细胞MACF1表达和β-catenin信号通路的影响

目的研究随机回转(RPM)模拟失重条件对微管微丝交联因子1(MACF1)表达及β-catenin信号通路的影响,为失重性骨丢失机制研究提供实验依据。方法 RPM条件培养成骨细胞,PCR检测MACF1mRNA表达变化,Western blot检测MACF1以及不同磷酸化位点β-catenin蛋白表达变化,荧光素酶报告基因检测细胞β-catenin荧光素酶活性变化。结果 RPM模拟失重条件下,成骨细胞MACF1表达下降,β-catenin mRNA和不同位点磷酸化蛋白表达量发生改变;MACF1 shRNA抑制了成骨细胞中β-catenin表达,影响了β-catenin蛋白稳定性及活性。结论 RPM模拟失重抑制了MACF1表达和β-catenin表达及活性;MACF1 shRNA影响了β-catenin表达及活性。MACF1可能是一种力敏感分子,通过调控β-catenin参与成骨细胞对力学信号的感知和响应。

随机回转条件动物细胞培养装置研制

目的设计一种细胞培养装置,使其适合在随机回转(random positioning machine,RPM)条件下进行动物细胞培养。方法根据在RPM条件下进行动物细胞培养的相关要求,提出总体设计方案,包括培养盒、培养小室及密封装置三个模块的设计方案;采用此装置培养MC3T3-E1成骨样细胞,从细胞形态、面积和活性3方面评价其培养效果。结果研制的细胞培养装置操作简单,密封效果好;与传统细胞培养瓶相比,采用此装置培养细胞培养基用量少,且细胞铺展面积和活性增加。结论研制出一种可用于RPM模拟失重生物效应研究的动物细胞培养装置,为进一步的研究RPM对动物细胞的影响奠定基础;该装置还可用于地面其它密闭系统细胞培养实验。