随机扩增DNA多态性技术在粘质沙雷菌分型研究中的应用

目的 应用随机扩增DNA多态性 (RAPD)技术对医院感染的粘质沙雷菌进行基因分型。方法 对心外科ICU病房 5例术后发热患者血液中分离出的粘质沙雷菌 ,用VITEK细菌全自动分析仪进行系统生化鉴定 ,K B纸片扩散法进行药敏试验 ,用 2条不同的随机引物进行RAPD基因分型。结果 5株粘质沙雷菌药敏谱全部一致 ,2条随机引物中一条引物未能分型 ,另一条引物可分为 2个基因型。其中 ,4株菌扩增出相同带谱 ,为同基因型 ;1株菌有独特的带谱为另一种基因型。结论 本次调查的 5株粘质沙雷菌有 2种RAPD基因型 ,其中 4株为相同基因型 。

随机扩增DNA多态性技术在A组链球菌分型上的应用

目的 了解A组乙型溶血性链球菌的基因分型状况。方法 采用随机扩增多态性DNA技术 (RandomamplifiedpolymorphicDNA ,RAPD) ,对 1988～ 1994年度 ,从广东城市和农村 ,1993～ 1994年度 ,从湖北、吉林 9～ 11岁学龄儿童分离的 179株GAS进行RAPD分析。结果 ①同一T型的菌株有特征性条带 ,但有些亚型带型间差异较大 ;②不同T型间可有相同的带型 ;③分型率比T分型高 ,达到96 6 % ;④有主导RAPD型菌株流行的情况存在。结论 RAPD方法对GAS分型及流行病学中有一定的应用价值 ,可以区别同一血清型不同地区来源的GAS。

随机扩增多态性DNA技术分型大肠埃希菌

目的：对大肠埃希菌(E．coli)进行随机扩增多态性DNA(RAPD)法基因分型并应用于医院感染的判断。方法：以优化的随机引物、反应体系和扩增条件对临床分离的161株E．coli进行RAPD法基因分型并按指纹图上DNA条带数及片段大小绘制基因分型图谱。同时对E．coli的医院内感染进行了观察与分析。结果：161株临床分离E．coli共得RAPD型120种；E．coli的医院内感染确实存在。结论：RAPD法可将E．coli分型120种并有效应用于E．coli医院内感染的判断。

产ESBLs的肺炎克雷伯菌在老年患者中的随机多态DNA分型研究

目的 了解我院老年患者中产 ESBLs的肺炎克雷伯菌的耐药特点。方法 对 2 4 5名住院的 60岁以上患者感染性标本分离培养后 ,用全自动微生物鉴定及药敏系统 (VITE- AMS)进行鉴定和药敏 ,然后对产 ESBL s株进行 RAPD分型。结果 分离出 88株肺炎克雷伯菌 (35.5% ) ,其中产 ESBLs的 2 0株 (2 2 .7% ) ,用 RAPD技术可分为 1 1型。结论 产 ESBLs的肺炎克雷伯菌是引起老年患者感染的病原菌之一 ,对其型别的检测有利于流行病学的调查和控制 ESBLs的传播和流行 ,使老年患者的院内感染性疾病得以控制。

克罗诺杆菌的随机多态性扩增DNA(RAPD)基因分型研究

研究了克罗诺杆菌标准菌株和样品中分离菌株的分子特征,为克罗诺杆菌的种间鉴别和分子溯源提供一种有效手段。采用随机引物扩增多态性DNA分析对38株菌株进行基因分型。筛选出1条随机引物,每一菌株可扩增出1～7条DNA片段,片段在400-3500bp,可将8株标准菌株的种间区分开来。以相似性50%为标准,38株克罗诺杆菌按照其遗传差异可以分为8个基因型类群。所建立的RAPD技术可用于克罗诺杆菌的种间鉴别和分子溯源研究。

重症监护室内鲍曼不动杆菌随机扩增DNA多态性分型研究

目的 建立鲍曼不动杆菌随机扩增 DNA多态性 (RAPD)分型技术 ,以用于临床菌种鉴定及流行病学调查。方法 收集 6个月内从 ICU内分离出的 14株鲍曼不动杆菌 ,提取 DNA后进行 RAPD分型 ;同时进行生物学分型和抗生素敏感性实验。结果 14株菌株被分为 5种 RAPD型 ,其中有 5株属于同一种类型 (A型 ) ,有 6株属于另外同一种类型 (B型 ) ,其他 3株分别属于另 3种不同类型 (C、D、E型 ) ;而生物学分型只有两种类型 (生物型1、9) ;抗生素敏感性实验表明 14株菌株均为仅对亚胺培南 /西司他丁 (泰能 )、头孢哌酮 /舒巴坦 (舒普深 )等少数几种抗生素敏感的多重耐药菌株。结论 ICU内存在鲍曼不动杆菌暴发流行 ,RAPD分型技术分型率高、分辨力强、简便快速 。

随机引物扩增DNA多态性技术在分析金黄色葡萄球菌和肺炎杆菌多态性中的应用

金黄色葡萄球菌和肺炎杆菌是医院内感染的主要条件致病菌 ,常常引起院内感染及暴发流行。本实验以一条含 10bp的随机引物将 5 2株肺炎杆菌和 2 8株金黄色葡萄球菌的DNA进行随机引物扩增DNA多态性 (RAPD)扩增 ,进行多态性分析 ,得到不同的带谱 ,在肺炎杆菌中存在很强的多态性 ,出现了 41种带型 ,通过肺炎杆菌间相似系数计算 ,绘制出表达菌株亲缘关系的系统树 ,图中可见各菌间的相似系数 ,5 2株菌分成 7个型 ;金黄色葡萄球菌出现了三条特征带。本实验说明RAPD技术能够追溯传染源 。

不同地域阴道毛滴虫分离株的随机扩增多态DNA技术分析

目的 分析比较阴道毛滴虫 7个分离株基因组DNA的遗传多态性。 方法 应用随机扩增多态DNA技术对阴道毛滴虫北京 1株、北京 2株、承德株、唐山株、九江 1株、九江 2株与九江 3株基因组扩增 ,并对扩增产物进行聚类分析。 结果 7虫株两两间的遗传相似指数为 77.4%～ 94.7% ,遗传关系密切。其中 :北京 1株和唐山株为 89.2 % ,九江 1株和九江 2株为 92 .1% ,北京 2株和九江 3株为 94.7% ,亲缘关系较近。而九江 1株和承德株间遗传相似指数为77.4% ,同源性相对较低。 结论 7株阴道毛滴虫遗传关系密切 ,但在基因水平上存在种内差异性 ;

铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA基因分型研究

目的 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型方法监测铜绿假单胞菌 (PA)医院感染。方法 以优化的反应体系和扩增条件对临床分离的 4 9株PA进行RAPD基因分型 ,通过指纹图比较与分析 ,确证医院感染类别与爆发。结果 4 9株PA共得RAPD 2 9型 ,分型率 10 0 % ;以周为时限 ,PA医院感染爆发流行共 3起 ;9例个体连续感染的PA有 7例为内源性医院感染 ,2例为外源性医院感染。结论 RAPD可对PA进行分子流行病学调查。

随机扩增多态性DNA对新生儿病房产气肠杆菌基因分型

目的:建立产气肠杆菌随机扩增多态性DNA(RAPD)分析技术,用于新生儿病房产气肠杆菌流行病学调查。方法:对从新生儿病房两次集中分离出的产气肠杆菌进行抗生素最低抑菌浓度试验(MIC)和RAPD分析,结合患儿的临床及流行病学资料进行分析。结果:药敏谱分型与RAPD分型不完全一致。16株产气肠杆菌的RAPD分型分为9型。RAPD分型为Ⅰ、Ⅲ、Ⅷ型的10株产气肠杆菌是流行相关菌株,均为医院内获得,分别导致3次各不相关的水平传播。结论:药敏谱分型不能很好地区分菌株的株间差异。RAPD分型准确、操作简便,在48h内可确定流行株,是研究产气肠杆菌分子流行病学的有力工具。

铜绿假单胞菌随机扩增DNA多态性基因分型研究

利用微量液体稀释法进行药敏检测和RAPD技术进行基因分型,调查了铜绿假单胞菌在临床各科中的流行情况,以期建立稳定的临床检测系统,在控制院内感染的流行病研究中发挥更大的作用.结果表明耐药谱分6型,Ⅰ型占44.5%,Ⅱ型占18.5%,Ⅲ型占7.4%,Ⅳ型占7.4%,Ⅴ型占11.1%,Ⅵ型(不定型)占11.1%;RAPD分9型,A型占51.9%,B型占7.4%,C型占7.4%,D型占7.4%,E型占7.4%,F型占3.7%,G型占3.7%,H型占7.4%,I型占3.7%.说明基因型A型、耐药谱Ⅰ型的铜绿假单胞菌是此次ICU医院感染暴发流行的菌株,其他型别为非流行相关菌株.比较结果还说明RAPD基因分型的灵敏性、特异性及可靠性优于耐药谱分型,在医院感染流行病学调查中具有较大的应用价值.

大肠艾希菌的随机扩增多态性DNA基因分型及应用

目的对大肠艾希菌(E.coli)进行随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型并应用于医院感染的判断。方法以优化的随机引物、反应体系和扩增条件对临床分离的161株E﹒coli进行RAPD基因分型并按指纹图上DNA条带数及片段大小绘制基因分型图谱,同时对E.coli的医院内感染及个体感染的连续性进行了观察与分析。结果161株临床分离E.coli共得RAPD120型;E.coli的医院内感染确实存在。结论RAPD可将E.coli分为120型并有效应用于E.coli医院内感染的判断。

多重耐药铜绿假单胞菌随机扩增多态性DNA的分型及应用

目的应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对多重耐药铜绿假单胞菌(MRPA)进行基因多态性研究。方法对临床分离的32株MRPA进行随机引物PCR扩增,扩增产物进行电泳和聚类分析。结果32株MRPA通过RAPD分型可分为19个基因型。耐药表型相同,基因型可相同;但绝大多数则不同。结论通过RAPD分析,了解MAPA基因型特性,明确其耐药表型与基因型的关系,并为该菌的感染控制提供分子流行病学依据。

铜绿假单胞菌随机扩增DNA多态性基因分型研究

目的:调查铜绿假单胞菌在临床各科中的流行情况,以期建立稳定的临床检测系统,在控制院内感染的流行病研究中发挥更大的作用。方法:用微量液体稀释法进行药敏检测,用RAPD技术进行基因分型。结果:耐药谱分6型,Ⅰ型占44·5%,Ⅱ型占18·5%,Ⅲ型占7·4%,Ⅳ型占7·4%,Ⅴ型占11·1%,Ⅵ型(不定型)占1·1%;RAPD分9型,A型占51·9%,B型占7·4%,C型占7·4%,D型占7·4%,E型占7·4%,F型占3·7%,G型占3·7%,H型占7·4%,I型占3·7%。结论:基因型A型、耐药谱Ⅰ型的铜绿假单胞菌是此次ICU医院感染暴发流行的菌株,其它型别为非流行相关菌株。RAPD基因分型的灵敏性、特异性及可靠性优于耐药谱分型,在医院感染流行病学调查中具有较大的应用价值。铜绿假单胞菌对哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋肟耐药率高;对喹诺酮类抗生素较敏感;对氨基糖甙类抗生素有一定的耐药性;亚胺培南的耐药率最低。

随机引物多态性DNA及其在微生物分型中的应用

用于微生物分型的现代技术包括表型和基因型方法。随机扩增多态性DNA（RandomAmplifictedPolymorphicDNA简称RAPD）是在PCR技术基础上发展起来的一种新的基因分型法。主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段，进而通过凝胶电泳分析其指纹图特征借以显示不同菌株间存在细微差别。这种方法简单、快速，现已在许多微生物分型中得到运用。

多聚酶链式反应随机引物扩增的DNA多态指模技术在幽门螺杆菌菌株鉴别中的应用

本文利用多聚酶链式反应随机引物扩增的DNA(RAPD)多态指模技术研究其在HP菌株鉴别的应用。对47例株HP进行RAPD多态指模分析。结果发现:①40株由不同病人分离的HP菌株有不同的DNA指模;②同一菌株多次培养后其DNA指模无改变;③HP根除疗法后3个月4例、6个月1例(分离的HP菌株分与治疗前相同,提示可能是HP复发;④HP根除疗法后6个月及24个月各1例)与治疗前分离的菌株DNA指模不同,提示可能是HP再感染。结果提示RAPD多态指模技术对HP菌株的鉴别有价值。

随机扩增DNA多态性及其在微生物分型中的应用

用于微生物分型的现代技术包括表型和基因型方法。随机扩增多态性DNA(RAPD)是在聚合酶链反应(PCR)技术基础上发展起来的一种新的基因分型法。主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DBA片段,进而通过凝胶电泳分析其指纹图特征,借以显示不同菌株间存在细微差别。这种方法简单、快速,现已在许多微生物分型中得到运用。

随机扩增多态DNA(RAPD)技术及其在动物分子生物学研究中的应用

随机扩增多态DNA(RAPD)技术是1990年由Williams等和Welsh等两个研究小组同时发展起来的(RandomlyAmplified Polymorphic DNA,简称RAPD),随机扩增多态DNA(RAPD)技术在分子生物学应用研究中与RFLP一致,但具有一些比RFLP更优越的地方(王斌,1994)。RAPD技术出现后就迅速地发展起来。在动物的遗传变异研究中,已取得了一些有意义的结果(杨绍清,1996)。与其它生物技术结合可广泛用于品种和品系的鉴定及其遗传纯度的测定,品种、品系遗传关系的研究,基因的分离定位,基因图谱的构建,制备新的特异性探针等。

随机扩增多态DNA技术在食用菌研究中的应用

RAPD(Bandom Amplified Polymorphic DNA)，即随机扩增多态DNA，是1990年由威兰斯(Willams)和韦尔什(Welsh)两个研究小组几乎同时建立和发展起来的一种新型遗传标记技术。由于其具有独特的检测DNA多态性的方式及快速、简捷、高效等优点，因而在短短的时间内RAPD技术已渗透到有关基因研究的各个领域。本文简单介绍RAPD技术在食用菌研究中的应用。

用随机扩增多态DNA(RAPD)区分青海血蜱与日本血蜱

目的用随机扩增多态DNA(RAPD)技术确定青海血蜱与日本血蜱的分类地位。方法分别提取青海血蜱与日本血蜱的DNA,确定聚合酶链反应(PCR)总体积、反应条件。选取8条不同的随机排列碱基顺序的多聚核苷酸单链为引物,进行RAPDPCR扩增反应。将扩增产物制备成DNA图谱,比较青海血蜱与日本血蜱基因组DNA多态性,从DNA水平鉴定这2种蜱。结果2种蜱仅有少部分DNA条带相同,大部分条带不同。结论RAPD技术可准确地鉴别青海血蜱与日本血蜱这2种形态特征十分相似的蜱种。