重组乙型肝炎疫苗接种剂量与免疫相关因子及隐匿性乙肝感染的关系探究

目的:探究重组乙型肝炎疫苗接种剂量与免疫相关因子及隐匿性乙肝感染的关系。方法:选取2017年9月-2019年1月的80例重组乙型肝炎疫苗接种者为研究对象,将其根据接种剂量的不同分为A组(10 g,2针组)、B组(10 g,3针组)、C组(20 g,2针组)及D组(20 g,3针组),每组20例。比较四组的抗HBs阳转率、有效保护率及平均几何滴度、相关细胞因子(IL-10、IFN-γ及IL-12)及隐匿性乙肝感染率。结果:C组及D组的抗HBs阳转率、有效保护率及平均几何滴度、相关细胞因子(IL-10、IFN-γ及IL-12)均高于A组及B组,差异均有统计学意义(P<0.05);而C组与D组、A组与B组的上述指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。四组的隐匿性乙肝感染率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:20 g重组乙型肝炎疫苗接种效果较好,对免疫相关因子的调控作用更好,但对隐匿性乙肝感染无明显影响。

核酸联检反应性鉴别非反应性献血者中隐匿性乙肝感染状况分析

研究联检反应性鉴别非反应性献血者(Non⁃discriminating reactive donation,NDRD)中隐匿性乙肝感染(Occult hepatitis⁃B virus infection,OBI)情况,对既往在绍兴地区献血的NDRD进行追踪,首先使用化学发光试验检测HBsAg,使用核酸检测技术检测HBV DNA,首次追踪检测增加化学发光试验检测HBsAb,同时选取HBsAg阴性且HBV DNA也阴性合格献血者标本76份和确认为OBI的献血者标本52份作为对照检测HBsAb,经追踪检测HBsAg阴性且HBV DNA阳性的献血者判定为OBI,对不同人群血清中HBsAb阳性比例进行统计分析,对不同性别、不同年龄、不同学历、不同血清HBsAb浓度及不同追踪检测次数确定为OBI的情况进行统计分析。本次研究共追踪检测66人,其中经确认为OBI的12人,NDRD中OBI的比例18.18%,不同性别、不同学历的献血者确认为OBI的比例差异无统计学意义(P>0.05),不同年龄组的献血者确认为OBI的比例差异有统计学意义(P<0.05),HBsAg阴性且HBV DNA阴性合格献血者、NDRD和确认为OBI的献血者中HBsAb阳性的比例差异无统计学意义(P>0.05),NDRD中不同血清HBsAb浓度的献血者确认为OBI的比例差异有统计学意义(P<0.05),不同追踪检测次数组OBI检出比例有统计学差异(P<0.05)。NDRD中OBI的比例较高,年龄越大的NDRD确定为OBI比例越高,血清HBsAb浓度大于300IU/L的NDRD中未发现OBI,HBsAb浓度大于300IU/L可以用作NDRD归队和保留的指标,追踪检测5次及以上的NDRD确认为OBI的比例明显增高,为增加NDRD中OBI的检出率,可以增加核酸检测次数至5次及以上。

隐匿性乙肝病毒感染献血者HBV分子生物学特性及追踪研究

目的了解献血者隐匿性乙肝病毒感染情况及输血传播风险。方法对2020年至2023年山东省两地市献血者血液标本采用两种酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂和1种核酸试剂进行检测,对其中乙肝表面抗原(HBsAg)无反应性、HBV DNA反应性标本进行乙肝五项检测,电话调查献血者乙肝疫苗接种史及家庭成员感染HBV情况,并询问其参与随访的意愿,对配合随访的献血者采血检测HBV DNA和乙肝五项,观察HBV血清学和分子生物学特性的变化。结果786000例献血者中,共检出285例HBsAg无反应性、HBV DNA反应性标本。285例标本中,HBsAg-/HBcAb+标本有237例,占83.16%(237/285)。36例配合随访的献血者中,32例献血者初步判定为OBI,2例献血者为HBsAg检测窗口期,2例献血者为NAT初次检测假反应性。结论乙肝疫苗接种有效降低了乙肝感染率,HBV DNA检测可缩短HBsAg检测“窗口期”,并有效检出OBI,降低输血感染风险,保障临床用血安全。

深圳市18～25岁抗-HBc阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染的血清学和分子生物学特性分析

目的了解深圳市18～25岁抗-HBc阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染情况,分析血清学和分子生物性特征。方法对HBs Ag（-）、NAT检测无反应性的18～25岁合格献血者血浆进行乙肝两对半检测和抗-HBs定量检测,对抗-HBc阳性标本进行病毒核酸提取和BCP/PC区及S区巢式PCR扩增,对扩增结果阳性产物纯化后进行基因测序及序列分析,同时进行QPCR定量检测。结果在889名18～25岁HBs Ag（-）、NAT检测无反应性的合格献血者中,抗-HBc（＋）共231名,占总人数25.98%（231/889）,其中18～21岁组70名,占该组19.72%（70/355）,22～25岁组161名,占该组30.15%（160/534）;抗-HBs（＋）共568名,占总人数63.89%（568/889）,其中18～21岁组218名,占该组61.41%（218/355）,22～25岁组350名,占该组65.54%（350/534）;对197例抗-HBc（＋）标本利用巢式PCR对HBV S区及BCP/PC区扩增,2例S区阳性,占1.02%（2/197）,5例BCP区阳性,占2.54%（5/197）,且均属于22～25岁组。对S区阳性PCR产物测序,发现2例均为B型,DNA序列与野生型相比,1例在532号位点由T变异为G,即T532G,氨基酸序列未发生变异。另1例氨基酸序列发生E44U变异。结论经HBs Ag及NAT检测合格的抗-HBc（＋）献血者,其血液中仍有一定几率含有HBV DNA,需进一步提高核酸检测方法的灵敏度。

核心抗体阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染分子生物学特性及追踪结果的研究

目的了解我国核心抗体阳性合格献血者隐匿性乙肝病毒感染(OBI)情况,分析血清学和分子生物性特征。方法对HBs Ag(-)、NAT检测无反应性的合格献血者血浆,进行乙肝两对半检测和anti-HBs定量检测,对核心抗体阳性标本进行病毒核酸提取,和BCP/PC区及S区巢式PCR扩增,对扩增结果阳性产物纯化后进行基因测序及序列分析,同时进行QPCR定量检测。对HBV DNA阳性的献血者进行追踪检测和分析。结果在1 033名合格献血者中,抗-HBc(+)占47.4%,阳性率随年龄的增长而增加(P<0.001),30岁以下年龄组为32.6%而到50岁以上年龄组为为69.8%。777/1033为抗-HBs(+),占75.2%。在抗-HBc(+)人群中共检出14例HBV DNA(+),其中7例抗-HBs滴度在100 IU/L以上,在抗-HBc(+)合格献血者中OBI阳性率为2.86%。8/14例OBI为B型,1例为C型。7/14能追踪的标本中,1例发现抗-HBe血清转换为阳性。所有追踪标本的病毒均变成检不出。5例BCP/PC区序列发生突变,3例S区氨基酸变异。结论经HBs Ag及NAT检测合格的抗-HBc(+)献血者,其血液中仍有一定几率含有HBV DNA,存在经输血传播病毒的威胁,提示在乙肝高流行地区需进一步提高核酸检测方法的灵敏度,必要时可增加抗-HBc的检测。

不同核酸检测方法对献血者隐匿性乙肝病毒感染的分析

目的分析不同核酸检测方法对献血者隐匿性乙肝病毒感染的检测能力。方法方便抽取2015年1月—2016年10月期间到献血站进行无偿献血的8 000名人员,对其分别选择Procleix Ultrio以及nested-PCR两种自动核算检测系统对其血浆标本予以HBN核酸检测,同时序列分析核酸阳性标本。结果通过研究后可知,40名献血者HBs Ag检测结果为阳性,比例经计算后为0.50%,420名献血者抗-HBc结果为阳性,比例经计算后为5.25%,25例献血者经过Procleix Ultrio以及nested-PCR能力相当,表现为阳性结果。结论献血人员中隐匿性乙肝病毒感染比例较高,而核酸检测方法的差异性致使检测能力有所不同。

不同核酸检测方法对献血者隐匿性乙肝病毒感染的研究

目的了解无偿献血者中隐匿性乙肝病毒感染情况,并比较不同核酸检测方法对隐匿性乙肝病毒感染检测能力的差异。方法分别采用nested-PCR和Procleix Ultrio全自动核酸检测系统对无偿献血者血浆标本进行HBV核酸检测,对核酸阳性标本进行HBV DNA序列分析。结果在总计9 209例次标本的检测中,共有9 159例为HBsAg(-);HBsAg(-)标本中nested-PCR方法检出18例HBV DNA阳性(0.19%,18/9 159),而Procleix Ultrio检出7例(0.076%,7/9 159),两者间差异有统计学意义(P<0.05);测序结果显示隐匿性HBV感染者中C基因型所占的比例(64.7%,11/17)明显高于HBsAg阳性的HBV感染者(23.1%,6/23,P<0.01)。结论闽南地区无偿献血者中存在较高比例的隐匿性乙肝病毒感染;不同核酸检测方法对献血者隐匿性乙肝病毒感染的检测能力存在差异。

上饶市隐匿性乙肝病毒感染状况的研究

目的:探讨上饶市隐匿性乙肝病毒感染(OBI)状况,并分析其血清学指标与基因特征。方法:收集2021年6月—2022年8月上饶市居民体检血液标本72 584例,对所有血液样本进行乙肝表面抗原(HBsAg)检测,对HBsAg阴性的标本进行乙肝病毒(HBV)DNA检测。对OBI样本检测其乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、乙型肝炎E抗体(HBeAb)、乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)水平,以及谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平。同时对OBI样本进行HBV基因分型与S区氨基酸做突变检测。结果:72 584例血液标本中HBsAg阴性且HBV DNA阳性检出率为0.11%(81/72 584),OBI检出率为0.10%(74/72 584)。74例OBI患者中单独HBcAb阳性占比最高(37.84%),不同血清学特征OBI患者间ALT和AST水平差异均无统计学意义(P>0.05)。74例OBI患者实时荧光PCR检测中,74例OBI样本中有19例呈阳性,检出率为25.68%。19例HBV DNA阳性患者中有15例样本扩增出S区序列,其中HBV基因分型B型13例,C型2例,且均发生S区氨基酸发生突变,其中14例HBsAg抗原决定簇基因及周边主要亲水区域(MHR)检测出氨基酸突变。结论:上饶市居民中OBI感染率较高,其中HBcAb阳性占比最高,HBV基因分型以B型居多,S区及MHR氨基酸突变可能与OBI感染的发生密切相关。

浙江省农村自然人群隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)情况及进化特征分析

目的了解浙江省德清县农村一般人群隐匿性及实际乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染情况及病毒株S基因的分子特征。方法采用多级抽样方法进行横断面调查,在取得调查对象知情同意的基础上采集调查表信息并采血。采用Epidata 3.2软件录入调查表信息,双录入并核对;采用SPSS 18.0软件进行数据分析;对所有样品进行乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)ELISA检测及病毒载量real-time PCR测定,并对HBsAg检测阳性或病毒载量测定阳性的标本进行后续HBV S基因PCR扩增和测序;采用MEGA 5.0软件对测得序列进行进化分析。结果共调查对象1 720例,调查人群中HBsAg阳性者共162例,隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)者共4例,实际HBV感染率为9.65%(166/1 720),OBI感染率为2.57‰(4/1 558)。显性和隐匿性病毒株病毒载量中位数及四分位数范围分别为866(425,12 500)IU/mL和314(216,677.5)IU/mL,前者显著高于后者。HBsAg阳性血清样本扩增得到71株显性病毒株S基因序列,HBsAg阴性血清样本扩增得到4株OBI病毒株S基因序列。OBI病毒株均为C基因型,adrq+血清型。显性HBV病毒株54株为B基因型,其中有2例标本为adw3血清型,其余52例均为adw2血清型;余17株为C基因型,adrq+血清型。OBI病毒株中C基因型的比例显著高于显性HBV病毒株中C基因型的比例。B基因型显性病毒株发生I104F、L109V、I110L、S113T、T126I、P127T、Q129R、M133L、F134L、P135A、T140A、K141I、T143M/S、V159A、Y161F、A166G和R169P突变,C基因型显性病毒株发生I126S、I126T及F158S突变。OBI病毒株发生Q129R、I126T、M133T及F161Y突变。结论浙江省德清县一般人群存在一定比例的OBI感染,OBI感染病毒载量较低,OBI病毒株存在氨基酸突变,C基因型为其可能的优势基因型,需重视OBI预防问题。

HBsAb阳性隐匿性乙型肝炎病毒感染者HBV PreS-S区基因突变研究

目的分析血清HBsAb阳性的隐匿性乙型肝炎病毒感染者HBV PreS-S区基因变异,初步探讨该特殊感染模式的发生机制。方法使用巢式聚合酶链反应(Nested PCR),对陕西省血液中心保存的38份HBsAb阳性隐匿性乙肝病毒感染(OBI)血清样本进行HBVPreS-S基因片段扩增并测序,确定基因型和血清型,并与对应基因型HBsAg阳性野毒株序列进行比对。结果 38份HBsAb阳性OBI血清样本中,11份成功扩增出目的基因,其中8份测序成功。C基因型5份,其中1份为血清型adw,4份为血清型adr;B基因型3份,全部为血清型adw。OBI毒株PreS-S区,PreS-S免疫反应区以及亲水区(MHR)氨基酸变异率均显著高于对应野毒株,差异有统计学意义(2.6%vs 0.8%,X^2=40.23,3.2%vs0.3%,X^2=52.13;3.6%vs 0.6%,X^2=10.25,均P<0.01),"α"抗原决定簇检测到I126T,Q129R,M133T,F134I,D1.44E,G145K突变。C基因型PreS-S区氨基酸变异率高于B基因型,差异有统计学意义(3.5%vs 1.2%,X^2=15.98,P<0.01);而其MHR,"α"抗原决定簇以及PreS-S免疫反应区氨基酸突变率虽均高于B基因型,但差异均无统计学意义(分别是4.7%vs 1.7%,X^2=2.96;3.6%vs 2.9%,X^2=0.25;4.1%vs 2.3%,X^2=3.59,均P>0.05)。结论 OBI毒株PreS-S区,尤其是PreS-S免疫反应区氨基酸发生较多变异,可能改变了病毒的免疫原性,造成免疫逃逸,从而导致HBsAbP阳性OBI发生。

隐匿性乙肝献血者中TGF-β1的表达分析

目的探讨TGF-β1在隐匿性乙型肝炎病毒感染发病机制中的意义和作用。方法采用酶联免疫法(ELISA)分别测定健康对照组40例、HBV组38例以及OBI组78例的血清TGF-β1值,并分析其与ALT、乙肝血清学标志物之间的相关性。结果 OBI组血清TGF-β1水平较健康对照组升高(F=4.311,P<0.05),而HBV组较健康对照组无统计学差异(F=2.242,P>0.05);OBI组血清中TGF-β1水平在ALT≤20 U/L和20 U/L<ALT≤40 U/L 2组间无统计学差异(t=2.266,P>0.05);OBI组血清中TGF-β1与乙肝血清学标志物之间无相关性。结论血清中TGF-β1表达水平与OBI持续感染存在一定联系,其含量变化与肝脏炎症程度、乙肝血清学标志物无相关性。

隐匿性HBV感染献血者随访复查及归队可能性探讨

目的了解隐匿性HBV感染献血者的转归情况及回归献血的可能性。方法对部分隐匿性HBV感染献血者进行随访,复检HBsAg、HBV DNA及抗-HBs和抗-HBc等。结果共有51名OBI献血者完成随访复检,平均年龄为41.68±7.71岁;其中34名出现HBV DNA转阴(66.7%),平均年龄(34.88±9.05)岁;17名献血者随访时持续HBV DNA阳性,平均年龄(44.88±4.81)岁,P<0.05。男性OBI献血者出现HBV DNA转阴的比例(64.3%)与女性(77.8%)的差异无统计学意义;随访前体内是否抗-HBs阳性与随访时是否HBV DNA转阴没有必然联系。所有随访的献血者HBsAg持续阴性、ALT正常且无不适症状。结论 OBI献血者在随访的病程中存在较高比例的转阴率,是否可以归队献血需要经过严格的复检。

苏州地区抗-HBc阳性合格青年献血人群隐匿性HBV感染的血清学及分子生物学特性分析

目的探讨苏州地区乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性合格的青年献血人群隐匿性HBV感染的生物学及血清学特性。方法选取2013年10月至2016年6月乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阴性、核酸检测(NAT)有反应性的青年献血者120例作为研究对象,进行乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)定量检测和乙型肝炎两对半检测,对抗-HBc阳性标本进行病毒核酸提取和基本核心启动子区(BCP区)/前C区(PC区)及S区巢式PCR扩增,对扩增结果阳性标本进行基因测序及序列分析。结果 120例献血者中,抗-HBc(+)31例,其中22~25岁组25例,18~21岁组6例,差异有统计学意义(P<0.05);抗-HBs(+)89例,其中22~25岁组16例,18~21岁组73例。利用巢式PCR扩增法对抗-HBc(+)标本进行PCR扩增,其中1例BCP区阳性,2例S区阳性,均属于22~25岁组。S区阳性标本的分型和测序结果显示:2例均为B型HBV,与野生型DNA序列相比,其中1例存在氨基酸序列E44U变异,1例存在T532G变异。结论对于HBsAg检测合格的抗-HBc(+)青年献血者,并不能保证其血液中一定不含有HBV DNA。为降低HBV经输血传播的风险,仍然需要进一步提高乙肝高流行地区核酸检测方法的灵敏度。

隐匿性乙型肝炎病毒感染的机制及其对血液安全的影响

血清HBsAg阴性者肝组织或血清中仍可检出HBV DNA,此现象称为隐匿性HBV感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)。OBI对保障输血安全、临床诊断和HBV流行病学监控带来很大困难,进一步阐明其机制有利于OBI的预防和治疗。本文综述了近年来对OBI发生机制的研究进展、OBI对血液安全的影响以及核酸检测工作对血液安全的促进作用。

隐匿性乙型肝炎病毒感染发生机制的研究进展及临床意义

隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)不仅可以促进慢性肝病肝纤维化的发生,还可导致肝癌的发生、发展,应当引起重视。HBV-S区域基因突变、HBV整合、内质网应激诱导、免疫逃避等机制可能导致乙型肝炎病毒感染患者的HBs Ag阴性、血清HBV-DNA低水平或者肝脏组织HBs Ag的隐匿性。本文就OBI发生机制的研究进展及临床意义作一综述。

数字PCR在隐匿性乙肝病毒感染检测中的研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球范围内一项重大的公共卫生问题。隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)是HBV感染的一种特殊类型,病毒载量极低,对输血安全构成潜在威胁,同时也为临床诊断带来巨大挑战。目前,检测肝脏和/或血液中的HBV DNA是诊断OBI的有效方法。在HBV DNA检测中,与荧光定量PCR(qPCR)相比,数字PCR(dPCR)提供了一个更加高效的检测平台,是一种用于定量极低水平核酸的可靠方法,在OBI检测中展示出十分良好的应用前景。本文主要综述了OBI的常用检测方法以及dPCR的原理和优势,概述了dPCR在OBI检测中的应用现状。以期dPCR在OBI检测中可以充分发挥其优势,未来能够更好地服务于献血者检测和临床诊断。

隐匿性乙肝病毒感染发生机制和临床意义研究进展

隐匿性乙肝病毒感染（Occult hepatitis B infection，OBI）患者中病毒DNA水平极低，血清中难以检测到常规衄清学标志物，即乙肝表面抗原（HBsAg），对临床诊治和输血安全带来了挑战。其相关机制和临床意义越来越受到关注。0BI发生机制复杂，可能涉及宿主因素、病毒本身的因素以及其他病毒或非病毒因素。OBI存在传播HBV的风险，可被重新激活并会导致肝脏疾病加重。

2015-2019年云南省献血者血清阳性隐匿性乙肝病毒感染流行病学特征

目的统计分析2015-2019年云南省献血者血清阳性隐匿性乙肝病毒感染(OBI)的流行病学特征,为招募献血对象的选择和乙肝防治提供更多依据。方法以酶联免疫吸附法(ELISA)及核酸扩增技术(NAT)对2015-2019年云南省的85384例献血者进行乙型肝炎病毒(HBV)感染标志物检测,再结合一般流行病学统计资料(献血者年龄、性别、学历、献血次数)分析血清阳性OBI的检出情况。结果85384例献血标本进行HBV核酸检测,共有111例HBV DNA阳性,进一步检测乙肝两对半显示,共有100例为抗-HBc(+)和/或抗HBe(+)、抗HBs(+),诊断为血清阳性OBI,血清阳性OBI感染率为0.12%(100/85384)。高学历组阳性率为0.07%,明显低于低学历组0.14%,差异有统计学意义(P<0.05);3650岁年龄组阳性率为0.14%,较1835岁年龄组献血者0.10%明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。男性献血者血清阳性OBI阳性率为0.15%,较女性0.07%明显升高(P<0.05)。不同献血次数组间差异无统计学意义(P>0.05)。不同职业组间阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。以年龄、性别、职业学历为自变量,多因素Logistic回归分析显示,>36岁、大专以下学历、男性、农民工及工人为血清阳性OBI的独立危险因素(P<0.05)。结论核酸检测有利于提高OBI感染检出率,其中男性、低学历、高年龄、农民工及工人是血清阳性OBI的独立危险因素。

张家口地区献血者隐匿性乙肝病毒感染研究

目的:对张家口地区无偿献血者中隐匿性乙肝病毒感染情况进行流行病学调查,为当地血液安全筛查提供指导意义。方法:应用HBsAg ELISA检测试剂盒对回库无偿献血者标本进行检测;对血浆标本采用nested-PCR技术进行HBV核酸检测;对阳性标本进行HBV DNA序列分析。结果:在总计5498例次标本的检测中,共有5417例为HBsAg阴性;HBsAg阴性标本中nested-PCR方法检出13例HBV DNA阳性(0.24%,13/5417);测序结果显示隐匿性HBV感染者中C基因型所占的比例为61.5%(10/16),明显高于HBsAg阳性的HBV感染者(28.2%,11/39,P<0.01)。结论:张家口地区无偿献血者中存在较高比例的隐匿性乙肝病毒感染。

献血者隐匿性乙肝病毒感染的研究进展

隐匿性乙肝病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)是乙肝病毒(HBV)感染的特殊类型,即乙肝表面抗原(HBsAg)检测阴性,但HBV核酸检测为阳性。本文主要综述了OBI在献血者中的流行情况、传播可能性和检测建议。世界部分国家和国内具有代表性地区献血者OBI的流行率各不相同,分析表明非洲地区献血者OBI流行率远远高于世界其他地区,我国南方地区献血者OBI流行率高于北方地区。献血者OBI存在传播乙肝病毒的可能性,核酸检测和乙肝核心抗体对献血者OBI筛查具有重要意义,应根据当地HBV流行状况和经济情况选择合适的检测方式,以期最大限度降低OBI对输血安全的影响。