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磺酸化磁性氮化碳固相萃取-超高液相色谱-串联质谱筛检淡水鱼中孔雀石绿和隐色孔雀石绿 被引量:4
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作者 孟二琼 念琪循 +3 位作者 李峰 张秋萍 许茜 王春民 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期673-682,共10页
孔雀石绿(MG)及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)在水产品中禁止检出,但违规使用行为屡禁不止,淡水鱼为抽检不合格率最高的水产品,因此,淡水鱼中MG和LMG的灵敏筛检对水产品食用安全非常重要。该工作研制了磺酸化磁性氮化碳(S-MGCN)材料,在... 孔雀石绿(MG)及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)在水产品中禁止检出,但违规使用行为屡禁不止,淡水鱼为抽检不合格率最高的水产品,因此,淡水鱼中MG和LMG的灵敏筛检对水产品食用安全非常重要。该工作研制了磺酸化磁性氮化碳(S-MGCN)材料,在考察其作为优良的磁性固相萃取(MSPE)吸附剂的基础上,以空白样品的加标回收率为指标,对S-MGCN用量、吸附时间、溶液pH、离子强度、洗脱溶液种类和体积等影响因素进行了优化,建立了基于S-MGCN的MSPE方法以提取淡水鱼中的MG及LMG,结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS),进行目标物的灵敏筛检。研究表明,S-MGCN对MG和LMG具有良好的吸附效率(94.2%以上),且净化样品基质效果好。该方法样品前处理简便,有机试剂的使用量少(5 mL),萃取时间短(2 min)。对两种目标物的检出限和定量限分别为0.075μg/kg和0.25μg/kg,灵敏度高于国标法(0.5μg/kg);在0.25~20.0μg/kg内线性关系良好(r>0.998),方法的回收率为88.8%~105.9%,日内和日间的相对标准偏差(RSD)均小于14%,准确度和精密度与国标法相当。最后,通过实际样品的检测验证了该方法的实际应用可行性。该文建立的基于S-MGCN的MSPE方法是一种高效环保的方法,为实际样品孔雀石绿和隐色孔雀石绿的灵敏筛检提供了新的方法学参考。 展开更多
关键词 磁性固相萃取 磺酸化磁性氮化碳 超高效液相色谱-串联质谱 孔雀石绿 孔雀石绿 淡水鱼
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孔雀石绿和隐色孔雀石绿溶液稳定性探讨
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作者 马瑞欣 《河北渔业》 2023年第3期17-20,共4页
探讨了孔雀石绿溶液和隐色孔雀石绿溶液的稳定性与温度、介质的关系。实验结果表明:乙酸铵对孔雀石绿溶液和隐色孔雀石绿溶液的稳定性起关键作用;隐色孔雀石绿溶液较孔雀石绿溶液稳定。隐色孔雀石绿在乙腈中不论室温还是4℃均可稳定存在... 探讨了孔雀石绿溶液和隐色孔雀石绿溶液的稳定性与温度、介质的关系。实验结果表明:乙酸铵对孔雀石绿溶液和隐色孔雀石绿溶液的稳定性起关键作用;隐色孔雀石绿溶液较孔雀石绿溶液稳定。隐色孔雀石绿在乙腈中不论室温还是4℃均可稳定存在;孔雀石绿在乙腈中不稳定,4℃在其溶液中可检测到隐色孔雀石绿,且浓度越低,转化成隐色孔雀石绿的速度越快。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 稳定性
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基于混合抗体的酶联免疫分析方法同时检测孔雀石绿和隐孔雀石绿 被引量:10
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作者 谢焕龙 王宇 +6 位作者 徐振林 杨金易 肖治理 王弘 雷红涛 孙远明 沈玉栋 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第12期325-330,共6页
孔雀石绿是'三致'物质,常被非法使用于渔业生产。水产品和环境中常以孔雀石绿和隐孔雀石绿两种形式同时存在,均具有强致癌性。但由于二者结构差异较大,现有的单克隆抗体只能分别检测样品中单一药物的残留量,难以客观地反映出孔... 孔雀石绿是'三致'物质,常被非法使用于渔业生产。水产品和环境中常以孔雀石绿和隐孔雀石绿两种形式同时存在,均具有强致癌性。但由于二者结构差异较大,现有的单克隆抗体只能分别检测样品中单一药物的残留量,难以客观地反映出孔雀石绿和隐孔雀石绿的总残留量。目前同时检测两种结构的免疫分析方法鲜有报道,本文分别制备了针对孔雀石绿和隐孔雀石绿的高特异性单克隆抗体,通过研究混合抗体模式建立了可以同时检测两种物质的酶联免疫分析方法,该方法对孔雀石绿和隐孔雀石绿混合物的半抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50)为3.27 ng/m L,检测线LOD(IC10)为0.24 ng/m L,线性范围为0.62~17.25 ng/m L。本方法的建立对保障水产品安全具有重要意义,也为混合抗体法同时检测两种或多种残留药物提供了方法借鉴。 展开更多
关键词 孔雀石绿 隐孔雀石绿 单克隆抗体 混合抗体
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超高效液相色谱串联质谱法测定水体与底泥中孔雀石绿及隐色孔雀石绿残留 被引量:18
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作者 孙言春 李池陶 +5 位作者 杜宁宁 曹顶臣 牟振波 吴松 王海涛 陈中祥 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期205-210,共6页
建立了水体和底泥沉积物中孔雀石绿(MG)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。水样直接利用MCX固相萃取柱富集和净化,底泥采用乙腈和二氯甲烷混合提取液超声提取。采用BEH C18(1.7μm,50 mm×... 建立了水体和底泥沉积物中孔雀石绿(MG)及其代谢物隐色孔雀石绿(LMG)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。水样直接利用MCX固相萃取柱富集和净化,底泥采用乙腈和二氯甲烷混合提取液超声提取。采用BEH C18(1.7μm,50 mm×2.1 mm)色谱柱对待测物进行分离,以0.1%甲酸/乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,电喷雾-多反应正离子监测模式检测,内标法定量。方法的线性范围为0.2~100μg/L,r2≥0.995。空白水体在1.0、10.0、100 ng/L 3个加标水平下的平均回收率为77%~90%,相对标准偏差(RSD)为7.2%~11.4%,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.2ng/L和0.4 ng/L。空白底泥样品在0.20、2.00、20.0μg/kg 3个加标水平下,平均回收率为82%~91%,RSD为6.3%~11.6%,检出限(LOD)和定量下限(LOQ)分别为0.02μg/kg和0.04μg/kg。该方法灵敏度高、选择性好,适用于实际水产养殖环境水体和底泥中MG和LMG的残留测定。 展开更多
关键词 UPLC—MS MS 检测 水体 底泥 孔雀石绿 孔雀石绿
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超高效液相色谱-串联质谱法测定水产苗种中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿 被引量:21
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作者 田秀慧 于召强 +3 位作者 陈玮 任传博 邹荣婕 张华威 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期171-177,共7页
建立水产苗种中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿的超高效液相色谱-串联质谱检测方法,内标法定量。样品用乙腈提取后,以乙腈定容至25.0mL,取5.0mL上述样品溶液经中性氧化铝柱净化,收集全部流出液,45℃氮吹至将尽干,准确加入2.00mL乙腈-5m... 建立水产苗种中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿的超高效液相色谱-串联质谱检测方法,内标法定量。样品用乙腈提取后,以乙腈定容至25.0mL,取5.0mL上述样品溶液经中性氧化铝柱净化,收集全部流出液,45℃氮吹至将尽干,准确加入2.00mL乙腈-5mmol/L的乙酸铵溶液(1:1,V/V)定容,超声振荡1min,样液经0.22μm滤膜,在ACQUITYTMUPLC BEH C18(1.7μm,2.1mm i.d.×100mm)色谱柱上进行梯度洗脱分离;流动相为乙腈和含有0.1%甲酸的5mmol/L的乙酸铵溶液;多反应监测模式下用超高效液相色谱-串联质谱测定其中孔雀石绿及其代谢物残留量。本方法孔雀石绿和隐色孔雀石绿的线性范围为0.5~20.0ng/mL,相关系数为0.9991和0.9999;孔雀石绿和隐色孔雀石绿的检出限为0.03μg/kg,定量限为0.10μg/kg,在0.10、1.0μg/kg和2.0μg/kg三个水平加标平均回收率为84.3%~100.7%,相对标准偏差(RSD)为4.12%~9.18%。该方法灵敏度高,准确性好,相比较前人研究,在实验条件方面做出了一定的改进,适用于水产苗种中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留的测定。 展开更多
关键词 水产 苗种 孔雀石绿 孔雀石绿 超高效液相色谱 串联质谱法 代谢物
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改进的QuEChERS方法用于鱼肉中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫的快速检测(英文) 被引量:21
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作者 朱程云 魏杰 +3 位作者 董雪芳 郭志谋 刘名扬 梁鑫淼 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期419-425,共7页
孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)具有抗菌等活性,常被违法用于水产养殖业。但 MG、CV 及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)、隐色结晶紫(LCV)具有致癌性。所以水产品中染料的残留检测是食品安全分析的重要问题。由于水产品基质复杂,样品... 孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)具有抗菌等活性,常被违法用于水产养殖业。但 MG、CV 及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)、隐色结晶紫(LCV)具有致癌性。所以水产品中染料的残留检测是食品安全分析的重要问题。由于水产品基质复杂,样品前处理尤为重要。本文发展了一种基于 QuEChERS 技术与高效液相色谱联用的方法,用于鱼肉中4种染料的同时检测。对 QuEChERS 方法中提取剂体积、提取次数以及分散固相萃取材料进行了优化。结果表明反相/强阴离子交换材料(C18SAX)能有效提高回收率。在最优条件下,4种染料在0.5-100 mg / L 范围内线性良好,相关系数均大于0.998。该方法在鱼肉中的回收率为73%-91%,RSD 为0.66%-5.41%。结果表明该方法简单、高效,适合于鱼肉中染料的快速检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱 孔雀石绿 孔雀石绿 结晶紫 色结晶紫 鱼肉组织
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浸泡条件下孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在斑点叉尾组织中分布及消除规律研究 被引量:20
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作者 刘永涛 艾晓辉 +1 位作者 索纹纹 杨秋红 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期269-280,共12页
以7 mg/L的孔雀石绿浸泡斑点叉尾苗种5min后将其饲养于池塘的网箱中,研究了在养殖模式下孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在斑点叉尾苗种各组织中的分布及消除规律。采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)分析孔雀石绿及其代谢物... 以7 mg/L的孔雀石绿浸泡斑点叉尾苗种5min后将其饲养于池塘的网箱中,研究了在养殖模式下孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在斑点叉尾苗种各组织中的分布及消除规律。采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)分析孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在斑点叉尾血液、肌肉、皮肤、肝脏、肾脏组织中的浓度水平。采用药代动力学分析软件3p97对血药浓度时间数据进行分析。结果表明,孔雀石绿和隐色孔雀石绿血药浓度时间曲线符合有吸收二室模型,动力学方程分别为:C孔雀石绿=683.063 e 0.248 t+11.176e 0.006 t 694.239e 0.333 t,C隐色孔雀石绿=757.240 e 0.222 t+14.474 e 0.007 t–771.714 e 0.382 t。血液中孔雀石绿和隐色孔雀石绿达峰时间Tpeak分别为3.480和3.623h,峰浓度值Cmax分别为81.560和159.619 ng/mL,表观分布容积Vd/F分别为37.689和21.125 L/kg,分布相的一级速率常数α分别为0.248和0.222/h,消除相的一级速率常数β分别为0.006和0.007/h,吸收半衰期T(1/2)α分别为2.794和3.124h,消除半衰期T(1/2)β分别为113.068和105.841h,中央室向周边室转运的一级速率常数K12分别为0.020和0.015/h,周边室向中央室转运的一级速率常数K21分别为0.159和0.121/h,药-时曲线下面积AUC分别为2493.944和3601.863 ng.h/mL。肌肉、皮肤、肝脏和肾脏组织中孔雀石绿和隐色孔雀石绿浓度水平的结果表明,孔雀石绿在斑点叉尾4种组织中浓度由高到低的顺序是皮肤>肌肉>肾脏>肝脏,其中斑点叉尾皮肤组织易蓄积孔雀石绿,其残留时间最长,肝脏组织由于对孔雀石绿有极强的代谢转化功能而浓度较低。孔雀石绿在肌肉、皮肤、肝脏和肾脏组织中的消除方程分别为C=5.570 e 0.009t、C=6.302 e 0.007t、C=4.791 e 0.006t和C=4.591 e 0.002t,相关系数r2≥0.773,消除半衰期T1/2肌肉、皮肤、肝脏和肾脏分别为3.2、4.1、4.8和14.4d。肌肉、皮肤、肝脏和肾脏组织中孔雀石绿分别在45、60、30和60d才未被检测到;隐色孔雀石绿在斑点叉尾4种组织中浓度由高到低的顺序是肝脏>皮肤>肌肉>肾脏,残留时间最长的组织也是皮肤组织。隐色孔雀石绿在肌肉、皮肤、肝脏和肾脏组织中的消除方程分别为C=6.491 e 0.004t、C=6.958 e 0.003t、C=6.722 e 0.007t和C=6.162 e 0.002t,相关系数r2≥0.673,消除半衰期T1/2肌肉、皮肤、肝脏和肾脏分别为7.2、9.6、4.1和14.4d。肌肉、皮肤、肝脏和肾脏组织中隐色孔雀石绿分别在90、90、60和90d才未被检出。试验期间(2011年5月17日至7月15日)平均水温为26.4℃,孔雀石绿和隐色孔雀石绿90d后在各组织中才未检测到,因此,使用7 mg/L孔雀石绿浸泡2龄斑点叉尾苗种孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿至少应经过2376℃.d后才能消除。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 斑点叉尾鮰 组织分布 消除
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孔雀石绿及隐色孔雀石绿在花鲈组织中的分布与消除规律 被引量:5
8
作者 丁军伟 邓建朝 +5 位作者 杨贤庆 李来好 赵庆志 吴燕燕 陈胜军 李春生 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期132-136,共5页
本实验用浓度为0.15 mg/m L的孔雀石绿药浴花鲈1 h后转移至水泥池中用淡水养殖,研究孔雀石绿(MG)及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)在花鲈各组织中的分布与消除规律。采用超高效液相色谱串联质谱法快速检测MG、LMG在花鲈的背肌、鱼皮、肝... 本实验用浓度为0.15 mg/m L的孔雀石绿药浴花鲈1 h后转移至水泥池中用淡水养殖,研究孔雀石绿(MG)及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)在花鲈各组织中的分布与消除规律。采用超高效液相色谱串联质谱法快速检测MG、LMG在花鲈的背肌、鱼皮、肝脏的含量,并用内标法来进行定量。结果表明,在消除期间,LMG的浓度始终高于MG的。MG、LMG在肝脏中的浓度最高。MG在花鲈3种组织中的最大浓度由高到低的顺序为:肝脏(94.86±8.12)μg/kg>鱼皮(19.35±1.88)μg/kg>背肌(7.47±0.45)μg/kg。MG在背肌、鱼皮、肝脏中分别于168、960、2160 h时检测不到。MG在3种组织中的半衰期长短的先后顺序为:肝脏(7.22 d)=鱼皮(7.22 d)>背肌(1.44 d)。LMG在花鲈3种组织中的最大浓度由高到低的顺序为:肝脏(3607.13±189.56)μg/kg>背肌(103.65±14.97)μg/kg>鱼皮(82.10±7.64)μg/kg。LMG在3种组织中的半衰期长短的先后顺序为:背肌(28.88 d)=鱼皮(28.88 d)>肝脏(14.44 d)。消除2544 h后,背肌、鱼皮、肝脏中的LMG含量仍然高于检测限。 展开更多
关键词 残留 孔雀石绿 孔雀石绿 花鲈 组织分布
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高效液相色谱法与酶免疫法快速测定鲫鱼中残留显/隐色孔雀石绿的比较 被引量:5
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作者 陈其勇 葛宝坤 +3 位作者 宓捷波 刘煊 王云凤 周荣 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期68-70,共3页
采用高效液相色谱(HPLC)法与酶免疫法(EIA)两种方法检测鲫鱼中残留显/隐色孔雀石绿的含量,对这两种分析方法所得的回收率进行了比较,当添加浓度在5.0~50.0μg·kg^-1时,其中HPLC法所测得的回收率为68.2%-90.0%,相... 采用高效液相色谱(HPLC)法与酶免疫法(EIA)两种方法检测鲫鱼中残留显/隐色孔雀石绿的含量,对这两种分析方法所得的回收率进行了比较,当添加浓度在5.0~50.0μg·kg^-1时,其中HPLC法所测得的回收率为68.2%-90.0%,相对标准偏差小于7.0%,检出限为2μg·kg^-1;EIA法所测得的回收率为72.4%~92.3%,相对标准偏差小于6.8%,检出限为1μg·kg^-1;两种方法均具有高效、快速、稳定的特点,能满足日常检验工作的需要。 展开更多
关键词 高效液相色谱 酶免疫法 鲫鱼 显/孔雀石绿 鲫鱼
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UPLC-MS/MS法测定新疆冷水鱼中孔雀石绿与隐色孔雀石绿 被引量:2
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作者 李晓岩 武运 +3 位作者 王犁烨 苏敏 沈慧慧 巴哈提古丽·马那提拜 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1328-1334,共7页
【目的】建立新疆冷水鱼中孔雀石绿(MG)和隐色孔雀石绿(LMG)残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)更为简便、高效的检测方法。【方法】样品经1%冰乙酸-乙腈溶液提取,氨基及SCX(强阳离子交换)固相小柱净化,C18色谱柱分离,电喷雾... 【目的】建立新疆冷水鱼中孔雀石绿(MG)和隐色孔雀石绿(LMG)残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)更为简便、高效的检测方法。【方法】样品经1%冰乙酸-乙腈溶液提取,氨基及SCX(强阳离子交换)固相小柱净化,C18色谱柱分离,电喷雾串联四极杆质谱的多反应监测扫描模式(MRM)进行检测,并采用内标法定量。【结果】MG和LMG在5.0~100.0μg/L线性范围内具有良好的线性关系,相关系数分别为:0.999 7(MG)和0.999 2(LMG)。测定低限(LOQ)为2.0μg/kg。以空白样品为基体做加标回收,测得MG的回收率在88%~105%,LMG的回收率在85%~110%,相对标准偏差(n=6)均为2.2%~15.3%。【结论】该方法样品前处理简便,回收率高,稳定性好。适用于新疆冷水鱼中MG和LMG残留量的日常检测。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-串联质谱 新疆冷水鱼 孔雀石绿 孔雀石绿
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高效液相色谱-串联质谱法测定水中孔雀石绿和隐色孔雀石绿 被引量:7
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作者 刘桂华 刘红河 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期731-733,共3页
目的用同位素内标稀释技术测定水中孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿的高效液相色谱-串联质谱法。方法水样中加入氘代同位素内标,经SCX提取和净化后,MRM定量。结果方法的线性范围为0.2~5μg/L,孔雀石绿和隐色孔雀石绿的线性相关系数分别... 目的用同位素内标稀释技术测定水中孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿的高效液相色谱-串联质谱法。方法水样中加入氘代同位素内标,经SCX提取和净化后,MRM定量。结果方法的线性范围为0.2~5μg/L,孔雀石绿和隐色孔雀石绿的线性相关系数分别为0.9993和0.9991,检出限均为0.001ng/L。在0.2、5、10ng/100ml三个浓度水平加标回收率为93.6%~107.5%,RSD为3.7%~9.3%。结论该方法高效、灵敏、特异性强,准确度、精密度好,满足水样准确定性、定量要求。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 同位素内标稀释 液相色谱-串联质谱法
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水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留量测定的液相色谱法 被引量:5
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作者 张健玲 张勇清 +1 位作者 胡子谦 闫剑勇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第2期209-209,236,共2页
目的:建立了水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留量的液相色谱法。方法:用乙腈-乙酸盐缓冲混合液提取,乙腈再次提取后,液液分配到二氯甲烷层,最后过中性氧化铝小柱和超高速离心净化,滤液直接上液相色谱进行测定。结果:采用外标... 目的:建立了水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留量的液相色谱法。方法:用乙腈-乙酸盐缓冲混合液提取,乙腈再次提取后,液液分配到二氯甲烷层,最后过中性氧化铝小柱和超高速离心净化,滤液直接上液相色谱进行测定。结果:采用外标法定量,样品中孔雀石绿的浓度在2-50μg/L范围内呈良好的线性关系,孔雀石绿r为0.99993,隐色孔雀石绿r为0.99942。用该方法检验超过600多份水产品,孔雀石绿和隐色孔雀石绿的回收率范围在82.5%-105%。本方法和实验室条件下,检测低限可低于1μg/kg。结论:本方法操作简单、方便、快速、效果好,大大缩短该项目的检验时间,提高工作效率,降低检验成本。 展开更多
关键词 水产品 孔雀石绿 孔雀石绿 残留量测定 液相色谱法
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水产品中孔雀石绿与隐色孔雀石绿检测方法研究进展 被引量:6
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作者 赵俊 吕志林 +1 位作者 曲克明 张旭志 《中国渔业质量与标准》 2012年第3期62-67,共6页
水产品质量事关国计民生,对其严格控制势在必行。在短期利益驱使下,水产行业中违规使用孔雀石绿(MG)事件时有发生,目前已成为影响食品质量安全和国际市场竞争力的重要因素。因此,对水产品中MG及其代谢产物—隐色孔雀石绿(LMG)残留的检... 水产品质量事关国计民生,对其严格控制势在必行。在短期利益驱使下,水产行业中违规使用孔雀石绿(MG)事件时有发生,目前已成为影响食品质量安全和国际市场竞争力的重要因素。因此,对水产品中MG及其代谢产物—隐色孔雀石绿(LMG)残留的检测日益重要。本文针对现有主要检测方法及发展趋势进行概要综述。介绍了液相色谱法(LC)和高效液相色谱法(HPLC)等色谱学联用技术在MG和LMG检测中的应用,指出电化学传感器、电化学生物传感器和拉曼光谱法等在MG残留量的检测方面,具有很好的研究价值和应用前景。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 检测方法 高效液相色谱法 免疫学法 前处理
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液相色谱串联质谱法测定鲤科鱼受精卵、卵巢及精巢中孔雀石绿及隐色孔雀石绿残留 被引量:7
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作者 孙言春 吴松 牟振波 《中国渔业质量与标准》 2012年第1期80-86,共7页
建立了3种鲤科鱼(鲤、鲫和草鱼)的受精卵、卵巢及精巢中孔雀石绿(Malachite green,MG)及其在生物体内的主要代谢物隐色孔雀石绿(Leucomalachite green,LMG)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。受精卵和卵巢用甲醇混合的Mcll... 建立了3种鲤科鱼(鲤、鲫和草鱼)的受精卵、卵巢及精巢中孔雀石绿(Malachite green,MG)及其在生物体内的主要代谢物隐色孔雀石绿(Leucomalachite green,LMG)的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。受精卵和卵巢用甲醇混合的Mcllvaines溶液提取,MCX固相萃取柱富集净化;精巢采用乙腈超声提取后正己烷除脂净化。色谱分离柱选用BEHC18(1.7μm,50mm×2.1mm)色谱柱,流动相选用酸化乙腈/水溶液,0.3mL/min梯度洗脱,电喷雾-多反应正离子监测模式。结果表明,浓度在0.2~100ng/mL之间,线性良好,r2≥0.995。MG和LMG在受精卵、卵巢及精巢中的最低检测限(LOD)分别为0.05、0.05和0.10μg/kg,定量限(LOQ)分别为0.20、0.20和0.30μg/kg。以空白基质加入法计算回收率和相对标准偏差,受精卵、卵巢在0.3、3.0和30.0μg/kg3个添加水平下,精巢在0.5、5.0和50.0μg/kg3个添加水平下,平均回收率是73.1%~92.5%,相对标准偏差为5.3%~12.4%。该方法灵敏度高,准确性好,适用于鲤鱼受精卵、卵巢及精巢中MG和LMG残留的测定。 展开更多
关键词 LC—MS/MS 检测 鲤科鱼 受精卵 卵巢及精巢 孔雀石绿 孔雀石绿
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隐色孔雀石绿在水产品基质中的稳定性研究 被引量:4
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作者 邢丽红 郑关超 +6 位作者 彭吉星 孙伟红 孙晓杰 郭萌萌 吴海燕 李兆新 翟毓秀 《中国渔业质量与标准》 2019年第4期22-29,共8页
孔雀石绿(malachite Green,MG)是影响水产品质量安全的重要风险隐患,其进入水生动物体内后,会代谢为隐色孔雀石绿(leucomalachite green,LMG),MG及其代谢物LMG在水产品中的稳定性又受到诸多因素影响。为探究基质品种和保存条件对LMG稳... 孔雀石绿(malachite Green,MG)是影响水产品质量安全的重要风险隐患,其进入水生动物体内后,会代谢为隐色孔雀石绿(leucomalachite green,LMG),MG及其代谢物LMG在水产品中的稳定性又受到诸多因素影响。为探究基质品种和保存条件对LMG稳定性的影响,本研究以鲢(Hypophthalmichthys molitrix)和鲤(Cyprinus carpio)为研究对象,采用液相色谱-串联质谱法测定LMG回收率,考察LMG回收率在不同基质品种(鲢和鲤)中随贮存时间(1~5个月)的变化,探究加标基质的LMG回收率在不同贮存温度(22~23℃室温、2~6℃冷藏、-12℃和-20℃冷冻)下随贮存时间的变化,同时考察了基质称样和加标时间间隔对LMG回收率的影响。结果表明:1)基质品种是影响LMG测定结果的重要因素。在相同的冷冻贮存条件下,贮存1~5个月的鲤基质中,LMG的回收率基本稳定在90%~110%之间,而冷冻贮存3个月的鲢基质,LMG添加回收率仅为30.7%。2)空白基质贮存时间和基质加标后的贮存温度和时间是影响LMG测定结果的另外两个重要因素。新鲜的鲢和鲤基质对LMG测定结果影响较小,空白基质贮存时间越长和加标后基质样品的保存温度越高、保存时间越长,LMG的添加回收率越低。3)称样与加标间隔时间对LMG的回收率无显著影响。上述结果说明,在开展水产品中MG残留量检测的能力验证或实验室进行质量控制时,应尽可能选择新鲜的鲤基质样品,并尽快进行检测;如果样品不能及时检测,则需冷冻保存,并尽早安排检测。本研究可为实验室内部质量控制及以添加方式开展能力验证和数据比对提供参考。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 水产品 稳定性 基质 回收率 贮存 质量控制样品
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MCR-ALS结合分子对接研究隐色孔雀石绿与BSA的作用过程 被引量:1
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作者 张秋兰 谢立昕 +2 位作者 杨林慧 庹浔 倪永年 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期851-856,共6页
孔雀石绿(LMG)在治理鱼卵中霉菌和杀灭鱼体寄生虫等方面的效果显著,广泛应用于水产运输和养殖。孔雀石绿进入动物机体后,通过生物转化代谢为脂溶性的隐色孔雀石绿(LMG), LMG的毒性超过MG; LMG能快速在组织中蓄积,具有致癌、致畸、致突... 孔雀石绿(LMG)在治理鱼卵中霉菌和杀灭鱼体寄生虫等方面的效果显著,广泛应用于水产运输和养殖。孔雀石绿进入动物机体后,通过生物转化代谢为脂溶性的隐色孔雀石绿(LMG), LMG的毒性超过MG; LMG能快速在组织中蓄积,具有致癌、致畸、致突变等毒副作用。白蛋白可与多种内源和外源化合物结合,是血浆中含量最丰富的载体蛋白,也是药物发挥作用的重要载体和靶标。模拟pH 7.4的生理条件,通过荧光光谱和圆二色谱法(CD)采集两种不同滴加方式的LMG与牛血清白蛋白(BSA)动态作用过程中的多维数据,并应用化学计量学多元曲线分辨-交替最小二乘法(MCR-ALS)对多维波谱数据进行解析和描述,从重叠严重的光谱数据中同时得到作用体系的定量和定性信息。从解析得到的浓度趋势图中,说明体系在LMG∶BSA=2∶1时达到动态平衡,并可确认复合物LMG_2-BSA的生成;解析得到的与所测量的BSA荧光和CD图符合,印证由MCR-ALS获得的浓度趋势图的可靠性和正确性;通常由重叠光谱中无法辨别的LMG_2-BSA复合物荧光光谱和CD谱图也可由数学解析获得,进一步印证了复合物的存在。原子力显微镜(AFM)测量结果表明BSA与LMG结合后, BSA的形貌发生改变,表面粗糙度(RMS)由(1.24±0.28) nm增至(13.47±0.53) nm;同时由CD实验结果可知LMG与BSA作用达到平衡时,α-螺旋结构的含量从46.5%降低到42.3%,推测是BSA所处微环境和构象发生变化所致。荧光探针实验发现经典siteⅠ标记物华法林加入后, LMG-BSA的猝灭常数由2.65×10~6 L·mol^(-1)降低为1.88×10~6 L·mol^(-1),但加入siteⅡ标记物布洛芬后, LMG-BSA的猝灭常数变化不明显,由此推断LMG可能结合在蛋白质的亚域ⅡA,即siteⅠ位。分子对接证实BSA的Ⅰ位有足够的空间容纳LMG,且LMG与BSA之间的主要作用是疏水作用力。该研究从分子水平了解LMG与生物大分子的作用机制,并为LMG的毒副作用研究提供重要的信息。 展开更多
关键词 光谱法 多元曲线分辨-交替最小二乘法 分子对接 孔雀石绿 牛血清白蛋白 作用过程
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增强型脂质快速净化法测定小龙虾中的孔雀石绿及隐色孔雀石绿 被引量:2
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作者 孙文芳 黄薇 +1 位作者 许珊珊 刘祥萍 《江苏预防医学》 CAS 2017年第6期708-710,共3页
目的建立一种以增强型脂质快速净化(EMR-Lipid)进行前处理,以高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定龙虾虾肉及虾黄中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的方法。方法样品经混匀后加入乙腈提取,提取液经EMR-Lipid净化浓缩后,以HPLC-MS/MS进行分... 目的建立一种以增强型脂质快速净化(EMR-Lipid)进行前处理,以高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定龙虾虾肉及虾黄中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的方法。方法样品经混匀后加入乙腈提取,提取液经EMR-Lipid净化浓缩后,以HPLC-MS/MS进行分析。结果在质量浓度0.1~2.0ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r>0.999,回收率为86.6%~107.6%,相对标准偏差(RSD)2.0%~10.0%。结论建立的方法可适用于龙虾肉及黄中的孔雀石绿和隐色孔雀石绿测定。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 EMR-Lipid 液相色谱质谱联用 小龙虾
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高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿和隐色孔雀石绿残留量 被引量:8
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作者 金雁 刘宁 +2 位作者 姚家彪 赵颖 孟祥勇 《现代仪器》 2006年第3期52-54,共3页
建立高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿残留量的检测方法。样品用乙腈-乙酸盐缓冲混合溶液提取,溶液分配到二氯甲烷层,后过中性氧化铝柱净化,采用高效液相色谱分离,二极管阵列检测器检测,外标法定量。本法简便... 建立高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿残留量的检测方法。样品用乙腈-乙酸盐缓冲混合溶液提取,溶液分配到二氯甲烷层,后过中性氧化铝柱净化,采用高效液相色谱分离,二极管阵列检测器检测,外标法定量。本法简便、快速、定量准确、精密度高,适用于水产品中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿残留量的检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 孔雀石绿 孔雀石绿 水产品 残留检测
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孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在鳜鱼体内组织的分布及消除规律 被引量:7
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作者 万译文 黄向荣 +2 位作者 李小玲 索纹纹 黄华伟 《水产科技情报》 2015年第6期309-314,318,共7页
为研究在养殖模式下孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在鳜鱼体内各组织的分布及消除规律,将鳜鱼以5 mg/L的孔雀石绿溶液浸泡2 h后饲养于池塘中,采用高效液相色谱-串联质谱法分析鳜鱼背肌、腹肌、内脏、腮、皮肤等5种组织中孔雀石绿及其... 为研究在养殖模式下孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在鳜鱼体内各组织的分布及消除规律,将鳜鱼以5 mg/L的孔雀石绿溶液浸泡2 h后饲养于池塘中,采用高效液相色谱-串联质谱法分析鳜鱼背肌、腹肌、内脏、腮、皮肤等5种组织中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿的浓度水平。结果表明,孔雀石绿在鳜鱼5种组织中的浓度由高到低的顺序为:皮肤>内脏>鳃>腹肌>背肌,在皮肤组织中残留时间最长,在背肌、腹肌、内脏、腮、皮肤中分别于58、90、20、58 d和120 d时未被检出;隐色孔雀石绿在鳜鱼5种组织中浓度由高到低的顺序为:内脏>皮肤>背肌>腹肌>鳃,在皮肤组织中残留时间最长,在背肌、腹肌、内脏、腮、皮肤中分别于270、290、230、230 d和300 d时未被检出。试验期间平均水温为25.6℃,在此养殖条件下,孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿在鳜鱼各组织中消除至少需要7680℃·d。 展开更多
关键词 鳜鱼 孔雀石绿 孔雀石绿 组织分布 消除
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不同储藏条件下鳜鱼样品中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的降解规律研究 被引量:5
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作者 黄向荣 万译文 +2 位作者 李小玲 肖维 黄华伟 《湖南农业科学》 2014年第5期69-74,共6页
鳜鱼稀少、名贵、难养,是孔雀石绿(MG)及其主要代谢物隐色孔雀石绿(LMG)残留重灾区。为确定鳜鱼样品中用于开展能力验证药物的适宜储存条件和运输温度条件,最大限度消除外因对MG及LMG检测结果的影响,保证结果的可靠性,以鳜鱼肌... 鳜鱼稀少、名贵、难养,是孔雀石绿(MG)及其主要代谢物隐色孔雀石绿(LMG)残留重灾区。为确定鳜鱼样品中用于开展能力验证药物的适宜储存条件和运输温度条件,最大限度消除外因对MG及LMG检测结果的影响,保证结果的可靠性,以鳜鱼肌肉为研究对象,开展了MG及LMG残留降解规律研究。实验分析了MG和LMG在3种浓度(5.0、10.0、50.0μg/kg)和3种贮藏条件(室温20~25℃,冷藏0~4℃和冷冻-18℃)下随时间的降解规律。实验结果表明,不同浓度的MG和LMG均有不同程度的降解,但因贮藏条件的不同,降解速率各不相同。在各种贮藏条件和不同浓度加标情况下,鳜鱼样品中LMG代谢消除速率均显著慢于MG;且因LMG的毒性远大于MG,建议将LMG作为残留检测的主要标志物。受酶活性高低的影响,贮藏条件对MG和LMG代谢的影响较大,降解速率为常温>冷藏>冷冻。如果样品能尽快进行检测,即可在常温条件下进行短期保存;如样品不能尽快安排检测,则须冷冻保存,尽量保持样品的原有属性。 展开更多
关键词 孔雀石绿 孔雀石绿 残留 降解 鳜鱼
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