人隔蛋白7的真核表达载体的构建及表达

目的构建人隔蛋白7（SEPT7，hCDC10／SEPT7）的表达载体并对U251人脑恶性胶质瘤细胞系进行转染且检测其表达。方法RT-PCR方法扩增SEPT7cDNA片段，并将扩增的片段插入pCDNA3真核表达载体，构建成含SEPTTcDNA的重组载体pCDNA3／SEPT7，以脂质体介导该质粒转染人脑恶性胶质瘤细胞系U250，应用RT-PCR和免疫荧光染色鉴定转染细胞中hCDC10／SEPT7的表达。用流式细胞术对转染前后的U251细胞进行细胞周期分析。结果成功构建含SEPT7cDNA的重组载体pCDNA3／SEPT7，并使其稳定转染U251细胞，在转染的细胞中，证实有SEPT7mRNA表达上调。细胞周期检测结果G0／G1期细胞增多，SPF降低。结论成功构建SEPT7表达载体，并在人脑恶性胶质瘤细胞系获得表达，延迟细胞周期进展。

隔蛋白7对胶质瘤细胞系U251细胞周期的影响

目的检测SEPT7对胶质瘤细胞系U251的细胞周期、增殖、侵袭以及凋亡的影响。方法流式细胞术分析转染SEPT7对细胞周期的影响，Western blot检测细胞周期因子表达变化，MTT法和Annexin V法评价SEPT7对U251细胞的增殖活性和凋亡的影响，Martrigel三维立体培养分析转染SEPT7后U251细胞侵袭能力的变化。结果SEPT7使U25I细胞G0／G1期阻滞，S期细胞比例（SPF）降低，增殖活性和侵袭能力明显受到抑制，并可诱发细胞凋亡。结论SEPT7抑制U251细胞侵袭、增殖，促进凋亡。结果提示，SEPT7是对胶质瘤具有抑制作用的基因。

人隔蛋白7的真核表达载体的构建及表达

目的构建人隔蛋白7(SEPT7,hCDC10/SEPT7)的表达载体并对U251人脑恶性胶质瘤细胞系进行转染且检测其表达。方法RT-PCR方法扩增SEPT7cDNA片段,并将扩增的片段插入pCDNA3真核表达载体,构建成含SEPT7cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,以脂质体介导该质粒转染人脑恶性胶质瘤细胞系U251,应用RT-PCR和免疫荧光染色鉴定转染细胞中hCDC10/SEPT7的表达。用流式细胞术对转染前后的U251细胞进行细胞周期分析。结果成功构建含SEPT7cDNA的重组载体pCDNA3/SEPT7,并使其稳定转染U251细胞,在转染的细胞中,证实有SEPT7mRNA表达上调。细胞周期检测结果G0/G1期细胞增多,SPF降低。结论成功构建SEPT7表达载体,并在人脑恶性胶质瘤细胞系获得表达,延迟细胞周期进展。

弱精子症患者精子中SEPT7基因表达情况研究

目的:研究人隔蛋白7(SEPT7)基因表达与弱精子症的相关性。方法:留取2013年4月至2014年12月我院门诊就诊的弱精子症40例患者的精液标本,分析SEPT7基因表达与弱精子症的相关性。结果:患者的正常精子的浓度及p H与弱精子无关,不具有统计学意义(P>0.05),患者正常精子的平均光密度值高于弱精子,在前向运动精子率上,正常精子高于弱精子,而且正常精子与弱精子在SEPT7 mRNA基因表达上具有显著差异,正常精子与弱精子比较差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论:在弱精子中患者的精液中,SEPT7基因及其蛋白产物表达具有相关性,通过检测判断基因表达是否正常,为诊断和治疗提供科学依据。

SEPT7对胶质瘤细胞系TJ905生物学特性的影响

目的研究 SEPT7对胶质瘤细胞系 TJ905的生物学特性的影响。方法 SEF17表达缺失的人脑胶质瘤细胞系 TJ905转染 SEFF7构建体,pcDNA3载体转染组为空载对照,应用蛋白印迹鉴定转染是否成功。采用 MTF 法检测转染 SEPT7构建体的细胞增殖活性,流式细胞术分析细胞周期分布变化,Annexin V 法评价细胞的凋亡,Martrigel 三维立体培养法分析侵袭能力。结果转染SEPT7后,胶质瘤细胞增殖活性降低,细胞周期分析结果为 S 期细胞比例(SPF)降低、G0/G1期阻滞;蛋白印迹检测细胞周期因子显示正向调节因子 cyclin D1、cyclin E、CDk2、CDk4表达下降,负向调节因子 p21、p16表达升高,肿瘤细胞侵袭能力明显受到抑制,并可诱发细胞凋亡。结论 SEPT7转染人胶质瘤细胞系 TJ905,可使细胞 SPF 降低、G0/G1期出现阻滞、抑制细胞侵袭和增殖、促进凋亡。

miR-19a和miR-19b对抑癌基因SEPT7的调控

目的确定抑癌基因隔蛋白7（SEPT7）是微小RNA（miR）-19a和miR．19b的靶基因之一。方法脂质体介导转染miR-19a／19b寡聚核苷酸抑制物（miR-19aI和miR-19bI）于人脑胶质瘤细胞株SNB19细胞。采用荧光素酶实验检测miR-19a／19b对SEPT7的直接调控关系；实时荧光定量聚合酶链反应鉴定转染寡聚核苷酸抑制物抑制miR-19a／19b表达的效果；蛋白免疫印迹（Westernblot）检测转染miR-19aI／19bI后SEFF7的表达变化；逆转录聚合酶链反应检测转染miR-19aI／19bI后SEPT7mRNA的表达变化。结果转染miR-19aI／19bI后肿瘤细胞miR-19a／19b表达明显下降；SEPT7表达上调；但SEPT7mRNA表达无明显变化；共转染miR-19aI和miR-19bI和带有miR-19a／b在SEFT／mRNA3’非翻译区（3’UTR）的重组荧光素酶报告质粒pGL3后荧光强度增高。结论SEPT7为miR-19a和miR-19b的靶基因之一。

SEPT7与神经肿瘤的关系

人隔蛋白7(SEPT7)是隔蛋白家族成员,参与调控细胞内许多重要的生物学行为,现已初步发现SEPT7在神经肿瘤中表达下调,提示SEPT7与神经肿瘤具有相关性,文章对SEPT7与神经肿瘤的关系以及在酵母分裂过程中表达的与SEPT7高度同源的CDC10的资料进行了总结。