雄激素抵抗引起的男子不育(附2例报告)

1974年Wilson等在分析一个Reifenstein综合征大家族时,发现2例具有正常男性表型的家庭成员中血浆黄体生成激素(LH)和睾酮(T)水平相对增高,精液分析为严重少精子症或无精子症.这些患者和罹患典型Reifenstein(雷凡斯坦)综合征的家庭成员一样,生殖器皮肤纤维母细胞雄激素受体的结合能力显著减低.雄激素抵抗可以是男子不育的一种致病原因已勿庸置疑.但国内尚无这方面的病例报告,我们最近诊断2例,特报告如下.

前列腺癌转移及雄激素抵抗的基础与临床研究

前列腺癌(PCa)是老年男性较常见的恶性肿瘤.临床上PCa是否发生转移是选择治疗手段的重要依据,因此早期预测PCa的转移,对临床选择治疗手段、改善病人预后及减少死亡率具有重要意义.

纯中药治疗雄激素抵抗的复发难治性前列腺癌1例

前列腺癌发生远处转移的概率可高达70%,骨转移是最常见的。目前,转移性前列腺癌的治疗主要是内分泌治疗,但几乎所有患者都会出现激素抵抗,使疾病复发且治疗难度大幅提升。本文通过单纯中药治疗一例复发难治性前列腺癌,旨在为雄激素抵抗的复发难治性前列腺癌的治疗提供了新的治疗思路和转机。

足叶乙甙联合环磷酰胺治疗雄激素抵抗性前列腺癌

目的 观察足叶乙甙(VP16)联合环磷酰胺治疗雄激素抵抗性前列腺癌的疗效。 方法 9例经全雄激素阻断治疗失败,且排除Flutamide撤药综合征的雄激素抵抗性前列腺癌患者采用VP16加环磷酰胺联合化疗,VP16 50mg/d,环磷酰胺100mg/d,连续服用21d, 28d为1周期。直至病情进展或毒副反应患者无法耐受。 结果 9例平均随访7. 5个月,PSA有效4例,PSA治疗前(90. 5±43. 6)ng/ml,治疗后(24. 8±22. 2 )ng/ml,平均有效时间6. 8个月, 5例可测量软组织转移灶有效2例,CR1例,PR1例。毒副反应轻微。 结论 Vp16加环磷酰胺治疗雄激素抵抗性前列腺癌有一定疗效,毒副反应可以耐受。

应用基因芯片技术筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关的基因

目的利用基因芯片技术高通量筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关的基因,为研究雄激素去势抵抗进展及前列腺癌的分子机制奠定基础。方法提取并纯化LNCaP及C4-2细胞的总mRNA,反转录合成荧光分子标记的cDNA,与基因芯片杂交;采用Genepix Pro6.0图像分析软件分析,筛选表达差异的基因;KEGG富集分析每个pathway中差异基因富集的显著性。结果在表达谱芯片中筛选出417个差异表达的基因,包括301个C4-2细胞中表达上调的基因,116个表达下调的基因;KEGG富集分析显示与前列腺癌相关表达差异的基因有GF、EGFR、HSP、BAD、P21、E2F、Raf、CyclinE、PSA、PI3K等,其中EGFR、Raf、PSA表达差异最明显。结论 EGFR、Raf、PSA基因的表达异常可能在雄激素去势抵抗型前列腺癌的形成过程中发挥着重要的作用,本研究为前列腺癌去势抵抗进展的分子机制的探索提供了理论依据。

基因芯片技术筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关基因

目的利用基因芯片技术高通量筛选前列腺癌雄激素去势抵抗相关基因，为研究雄激素去势抵抗进展前列腺癌的分子机制奠定基础。方法提取并纯化LNCaP及C4～2细胞的总mRNA，反转录合成荧光分子标记的cDNA，与基因芯片杂交；采用Genepix Pr06．0图像分析软件分析，筛选表达差异的基因；KEGG富集分析每个pathway中差异基因富集的显著性。结果在表达谱芯片中筛选出417个差异表达基因，包括301个C4～2细胞中表达上调基因，116个表达下调基因；KEGG富集分析显示，与前列腺癌相关的表达差异的基因有GF、EGFR、HSP、BAD、P21、E2F、Raf、CyclinE、PSA和Pj3K等，其中EGFR、Raf表达差异最明显。结论EGFR、Raf基因表达异常可能在雄激素去势抵抗型前列腺癌的形成过程中发挥着重要作用，本研究为前列腺癌去势抵抗进展分子机制的探索提供了理论依据。

人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型重组慢病毒载体的构建及其在人雄激素抵抗型前列腺癌PC3细胞中的表达

目的构建人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(inositol polyphosphate 4-phosphatase typeⅡ,INPP4B)重组慢病毒表达载体,并检测其在人雄激素抵抗型前列腺癌细胞株PC3中的表达。方法以人工合成的人INPP4B基因为模板,PCR扩增目的基因片段,克隆入pGC-FU载体构建重组质粒pGC-FU-INPP4B,将其与辅助包装原件PHelper 1.0和PHelper 2.0载体经Lipofectamine TM 2000介导共转染293T细胞,包装获得携带人INPP4B基因的重组慢病毒LentiINPP4B,免疫荧光法测定病毒滴度。用Lenti-INPP4B感染PC3细胞(Lenti-INPP4B组),以慢病毒Lenti-GFP(携带GFP基因)感染的PC3细胞为阴性对照,RT-PCR及Western blot检测PC3细胞中INPP4B m RNA水平和蛋白的表达,CCK8法检测PC3细胞增殖;Western blot检测PC3细胞中p-AKT水平。结果经PCR及测序鉴定,重组质粒p GC-FU-INPP4B构建正确;Lenti-INPP4B病毒滴度达2×10-8 TU/mL。与阴性对照组比较,Lenti-INPP4B组PC3细胞中INPP4B m RNA水平显著提高(P<0.05),细胞活力抑制显著(P<0.05),细胞内p-AKT水平降低;INPP4B蛋白在Lenti-INPP4B组细胞中表达,在阴性对照组中未表达。结论成功构建了INPP4B慢病毒表达载体,其在PC3细胞中的表达能显著抑制细胞增殖,可能是通过下调p-AKT水平发挥作用。本文为靶向治疗雄激素抵抗型前列腺癌提供了新思路。

多西他赛联合泼尼松或米托蒽醌联合泼尼松治疗激素抵抗性前列腺癌

背景与目的:以多西他赛为核心的化疗方案已经成为激素抵抗性前列腺癌治疗的一线方案。本文初步比较多西他赛联合泼尼松或米托蒽醌联合泼尼松在雄激素抵抗性前列腺癌中的疗效差异,进一步探讨这两种方案的毒副反应。方法:入选雄激素抵抗性前列腺癌患者共83例,其中44例给予多西他赛75mg/m2d1静脉滴注联合泼尼松,5mg,每天2次,d1～21口服方案治疗(简称多西他赛组),39例给予米托蒽醌12mg/m2d1静脉滴注联合泼尼松,5mg,每天2次,d1～21口服方案治疗(简称米托蒽醌组)。两方案均以21天为1周期,平均治疗5周期。结果:多西他赛组中13.6%(6/44)完全缓解(治疗后PSA下降至4.0ng/ml以下),29.5%(13/44)部分缓解,29.5%(13/44)稳定,27.3%(12/44)进展。缓解和稳定患者的PSA进展中位时间是37.8周(12～101周)。进展的12例患者接受了后续的米托蒽醌组挽救治疗,结果部分缓解16.7%(2/12),稳定25.0%(3/12),2例患者死于疾病进展。米托蒽醌组中7.7%(3/39)完全缓解,25.6%(10/39)部分缓解,25.6%(10/39)稳定,41.0%(16/39)进展。缓解和稳定患者的PSA进展中位时间是25.3周(8～61周)。进展的14例患者接受了后续的多西他赛组方案的挽救治疗,结果完全缓解7.1%(1/14),部分缓解35.7%(5/14),稳定21.4%(3/14),4例患者死于疾病进展。毒性评估:接受多西他赛组治疗者44例,Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制9例(2例因不能耐受化疗退出),Ⅱ度骨髓抑制14例;接受米托蒽醌组治疗者39例,Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制4例,Ⅱ度骨髓抑制12例。结论:多西他赛组或米托蒽醌组均是治疗雄激素抵抗性前列腺癌的有效化疗方案。两种方案对中国的前列腺癌患者的治疗效果比较接近,但米托蒽醌联合泼尼松的治疗方案的副作用略轻。两种方案交替使用仍可产生部分的反应率,两种方案可以互为挽救方案,且多西他赛联合泼尼松作为挽救方案疗效好于米托蒽醌联合泼尼松。

PlncRNA-1在雄激素非依赖去势抵抗型前列腺癌细胞中的作用

目的:探讨长链非编码RNA PlncRNA-1在雄激素非依赖的前列腺癌细胞中的作用。方法:选取雄激素依赖的前列腺癌细胞系LNCaP及雄激素非依赖的前列腺癌细胞系C4-2,应用实时定量PCR技术检测两种细胞系中PlncRNA-1的表达差异。RNA干涉技术沉默PRNCR1的表达,检测AR表达变化。流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化。MTT实验检测对细胞增殖的影响。细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化。结果:PlncRNA-1在雄激素非依赖的细胞系C4-2中高表达。沉默其表达可以明显降低前列腺癌细胞中AR的表达,抑制前列腺癌细胞的细胞周期、增殖及细胞的侵袭能力,并促进细胞的凋亡。结论:PlncRNA-1在前列腺癌细胞中通过调节AR,影响细胞的增殖、凋亡及细胞的侵袭能力,PlncRNA-1可能在前列腺癌CRPC进展中发挥着重要作用。

干扰CD326可抑制VCaP细胞雄激素受体表达并降低细胞的增殖、侵袭及迁移能力

目的干涉前列腺癌细胞系VCaP细胞的CD326的表达,观察其对雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原(PSA)的表达以及前列腺癌细胞表型的影响,明确CD326与雄激素抵抗性前列腺癌发生之间的相关性。方法构建CD326短发夹RNA(CD326shRNA)稳定感染的VCaP细胞株。Western blot法检测稳定感染细胞株中AR及PSA的水平变化,ELISA检测VCaP细胞培养上清中的PSA分泌水平。MTT法检测细胞增殖、末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记法(TUNEL)和Alexa Fluor488标记的膜联素Ⅴ/碘化丙锭(annexinⅤ-Alexa Fluor488/PI)双染法检测细胞凋亡、细胞划痕实验检测细胞迁移、TranswellTM实验检测细胞侵袭能力。结果下调VCaP前列腺癌细胞株中CD326表达后,VCaP细胞中AR及PSA的表达水平显著降低,细胞上清中PSA的分泌水平也显著降低,同时伴随细胞增殖、抗凋亡、侵袭以及迁移能力的显著降低。结论下调VCaP细胞CD326水平可降低AR的表达,使前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力降低。

多西紫杉醇治疗前列腺癌的分子机制研究

目的:探讨多西紫杉醇治疗男性雄激素抵抗前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)的分子机制。方法:前列腺癌细胞株LNCaP、PC-3和CW22-rv1体外培养后,通过蛋白质印迹、细胞转染、荧光素酶分析、细胞存活率分析等试验分析多西紫杉醇(Docetaxel,Doc)处理后细胞株的存活、AR及p-c-jun的表达情况及其与细胞生存的关系,同时实时定量PCR检测相应mRNA的表达情况。结果:多西紫杉醇对不同前列腺癌细胞株的敏感性不同,其中PC-3细胞最敏感,CW22-rv1和LNCaP细胞中度敏感,其敏感性与p-c-jun表达呈负相关。转染c-jun基因可降低细胞对多烯紫杉醇的敏感性,而PC-3细胞转染c-jun和AR基因后则可以使细胞恢复到中等程度敏感性,细胞存活率为30%。长期暴露于Bicalutmide(比卡鲁胺)后的LNCaP细胞经Doc处理后PSA蛋白表达增加,AR蛋白表达水平降低,AR的mRNA却增加。结论:p-c-jun降低前列腺癌细胞株对多西紫杉醇的敏感性,而AR可以增加前列腺癌细胞株对多西紫杉醇的反应,AR的上调降低c-jun/p-c-jun的转录活性,从而增加前列腺癌细胞株对Doc的反应,可能是Doc治疗前列腺癌的机制之一。

彭培初分段论治晚期前列腺癌经验撷英

介绍彭培初教授分段论治晚期前列腺癌的临床经验。认为针对本病雄激素依赖阶段"金水不足"及雄激素抵抗阶段"阴损及阳"的主要病机,须相应予以"金水相生,虚则补其母"及"温补肾阳,通调三焦"治法,并附相应基本方与加减用药。另举验案2则。

人源性前列腺癌动物模型的初步建立

目的 建立中国人同一起源肿瘤不同恶性潜能前列腺癌动物模型,为研究前列腺癌转移进展机制及激素抵抗的发生机制提供理想的动物模型.方法 采用组织块外科原位移植法将人前列腺癌组织分别移植到虚拟去势组及去势组雄性裸小鼠前列腺部,成瘤后进行鼠间传代移植,选取虚拟去势组原位移植瘤、移植淋巴结转移瘤、去势组第4代淋巴结转移瘤体外培养建立细胞系,应用Boyden Chamber细胞运动实验检测细胞迁徙转移能力,描绘细胞生长曲线分析细胞增殖及激素依赖性,裸小鼠皮下异种移植瘤模型检测成瘤率、肿瘤湿重及浸润范围验证不同代移植瘤细胞在裸小鼠异种移植的生长状态.结果 第1代虚拟去势组成瘤率30％,无淋巴结转移,取移植瘤反复原位传代移植第3代成瘤率50％,盆腔淋巴结转移率40％.去势组原代移植以及来自虚拟去势组的原位移植瘤反复原位移植均未见移植瘤,源自虚拟去势组淋巴结转移瘤组织反复原位传代移植至第4代,成瘤率33％,其中一只可见盆腔淋巴结转移.三种细胞系细胞生长、迁徙以及体外裸小鼠成瘤率均有显著差别（P＜0.05）.结论 裸小鼠前列腺癌原位移植反复传代可增强肿瘤成瘤率、转移力等恶性指标.以裸小鼠淋巴结转移瘤接种去势裸小鼠可筛选出激素非依赖性异种移植瘤及转移瘤.

睾丸女性化综合征6例报告

目的 总结6例睾丸女性化综合征的诊断及治疗体会。方法 回顾性分析6例睾丸女性化综合征的诊断方法、治疗措施及结果。6例均行睾丸切除术,5例行阴蒂矫形术。术后均长期服用雌激素治疗。结果 6例术后均恢复顺利。1例失访。余5例术后外生殖器外观满意,感觉良好。其中1例已婚,性生活满意。结论 本病一般作女性处理,双侧睾丸应切除,术后长期服用雌激素。

前列腺癌组织中间层上皮细胞比例差异的研究

目的:探讨前列腺癌组织中间层上皮细胞构成比例差异及其临床意义。方法:对60例前列腺癌标本分别进行CK5、CK8免疫组化染色将前列腺癌分为两类:即以中间层上皮细胞为主的前列腺癌(CaP-INT)共计32例和以腔面层上皮细胞为主的前列腺癌(CaP-LUM)共计28例。比较两类前列腺癌雄激素受体(AR)阳性率、患者年龄、血清t-PSA、前列腺体积、G leason评分、临床分期、雄激素抵抗率的差异。结果:两类前列腺癌相比较,CaP-LUM的AR阳性率为(77.21±10.22)%,而CaP-INT其阳性率为(24.42±11.41)%,CaP-INT的AR阳性率明显低于CaP-LUM(P<0.05)。远处转移的病例数,CaP-INT为14例,CaP-LUM为4例,CaP-INT转移率明显高于CaP-LUM(P<0.05)。在行内分泌治疗的患者中,CaP-INT组共26例,有6例进展为雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC);CaP-LUM共23例,有1例进展为AIPC,两者亦有显著差异(P<0.05)。CaP-INT在局部临床分期上也显著高于CaP-LUM(P<0.05)。而两类前列腺癌在年龄、血清t-PSA、前列腺体积及G leason评分上无显著差异(P>0.05)。结论:中间层上皮细胞增多和前列腺癌侵袭性增加、肿瘤转移性增强及产生雄激素抵抗相关。

二十二碳六烯酸诱导前列腺癌细胞凋亡的信号通路研究

目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）改变凋亡信号通路，引起前列腺癌细胞凋亡的机制。方法利用RT2 Profiler Array-Apoptosis方法，寻找DHA诱导前列腺癌细胞凋亡的作用靶点，可见10个上调和5个下调基因，然后利用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）方法，验证和筛选结果。结果与对照组比较，DHA处理24 h后，DU145细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）家族中的Caspase-1、Caspase-3和Caspase-9转录水平，分别上调了2.06、4.88和12.10倍；促细胞凋亡的B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）基因上调了2.93倍，并且bax与B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）比值增加；细胞死亡诱导相关基因CIDEA和DFFA，分别上调了2.34和3.21倍；肿瘤坏死因子相关基因LTA和肿瘤坏死因子（TNF），分别上调了2.04和2.24倍；基因警察TP53的mRNA表达上调了2.97倍。另外，DU145细胞线粒体相关凋亡诱导基因（AIFM1）、蛋白激酶（Akt1）、BH3位点死亡诱导基因BID和BIRC6、X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）转录水平的表达，均发生下调。不同浓度DHA刺激24 h后，在前列腺癌DU145细胞Caspase家族中，Caspase-1、Caspase-3、Caspase-9和Caspase-12表达均明显增加，其中Caspase-3、Caspase-9和Caspase-12的表达，与DHA刺激浓度有剂量依赖性关系；前列腺癌DU145细胞bax、CIDEA、DFFA、TNF和肿瘤蛋白P53（TP53）基因表达均明显增加；其中bax、CIDEA和TNF的表达与DHA刺激浓度有剂量依赖性关系；前列腺癌DU145细胞AIFM1、Akt1、BID、BIRC6和XIAP基因表达均明显下降；其中AIFM1、BID和XIAP的表达与DHA刺激浓度有剂量依赖性关系。 结论DHA通过改变Caspase家族等凋亡信号通路相关基因的表达，诱导前列腺癌细胞发生凋亡。