畅枢汤对痤疮模型大鼠雄激素受体的影响

目的:探讨畅枢汤对痤疮模型大鼠雄激素受体(androgen receptor,AR)的影响。方法:取36只Sparague Dawley大鼠,6只组成正常组;其余大鼠皮下注射痤疮丙酸杆菌菌液建立大鼠痤疮模型,造模成功后,随机分为模型组、异维A酸组、畅枢汤组、畅枢汤+异维A酸组,每组6只。异维A酸组以31μL异维A酸软胶囊混悬液加2 mL蒸馏水灌胃,畅枢汤组以畅枢汤颗粒1.542 g加2 mL蒸馏水灌胃,畅枢汤+异维A酸组将1.542 g畅枢汤颗粒及31μL异维A酸软胶囊混悬液加入2 mL蒸馏水灌胃,正常组和模型组给予2 mL蒸馏水灌胃。1 mL/次,2次/d,连续干预4周。分别在造模前后、干预2周和4周末从大鼠尾静脉采血,检测各组大鼠血清AR水平。结果:建模后,与正常组对比,模型组和3个药物组AR水平均升高(P<0.01)。药物干预2周和4周末,与同期模型组对比,3个药物组的AR水平均下降,且干预4周AR水平低于干预2周(P<0.01或P<0.05);畅枢汤+异维A酸组下降程度最明显,其次为异维A酸组和畅枢汤组(P<0.01或P<0.05)。结论:畅枢汤可下调痤疮模型大鼠AR表达,联合异维A酸软胶囊可增强其下调作用,且与干预时间成正相关。

补肾活血化痰方改善雄激素致不孕大鼠高雄激素血症的机制探讨

目的观察补肾活血化痰方(BHHR)对雄激素致不孕大鼠(ASR)高雄激素血症的治疗作用及治疗前后ASR卵巢内雄激素合成酶和代谢酶的表达量的变化,并探讨其可能的作用机制。方法 SD雌性大鼠于9日龄在颈背部皮下一次性注射丙酸睾丸酮(1.25 mg)制备ASR模型。将造模成功的ASR随机分为3组,分别为模型组(蒸馏水10 mL/kg灌胃)、二甲双胍治疗组(0.1 g/kg灌胃)和BHHR治疗组(10 mL/kg灌胃),每组各13只。另设正常对照组(n=10)。疗程(28 d)结束后观察大鼠的性周期恢复情况、体质量及卵巢质量/体质量比值。采用放射免疫分析法测定血清睾酮(T)水平;免疫组织化学定量方法检测卵巢3β-羟甾脱氢酶、细胞色素P450 17α-羟化酶/17,20-裂解酶和P450芳香化酶的表达量。结果 (1)性周期恢复:BHHR治疗组及二甲双胍治疗组中恢复性周期的大鼠数量多于模型组(P<0.01)。(2)体质量:模型组大鼠体质量高于正常对照组(P<0.01);BHHR治疗组与二甲双胍治疗组大鼠体质量均较模型组降低(P<0.01)。(3)卵巢质量/体质量比值:模型组大鼠卵巢质量/体质量比值高于正常对照组、BHHR治疗组及二甲双胍治疗组(P<0.01)。(4)血清T水平:模型组大鼠血清T值高于正常对照组、BHHR治疗组及二甲双胍治疗组(P<0.01)。(5)免疫组织化学结果:与模型组和正常对照组相比,BHHR治疗组大鼠P450arom表达升高(P<0.01);BHHR治疗组3β-羟甾脱氢酶、细胞色素P450 1 7α-羟化酶/17,20-裂解酶的表达与模型组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BHHR可以降低ASR模型大鼠血清T水平,其机制可能是通过上调雄激素代谢酶P450arom的表达而实现的。

雄激素致不孕大鼠胰腺、下丘脑及卵巢雄激素受体mRNA表达

目的:研究雄激素致不孕大鼠(ASR)胰腺、下丘脑及卵巢组织中雄激素受体(AR)mRNA的含量变化。方法:9日龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮制备ASR模型,于106日龄左右(动情前期)处死,取血放免法测定△4-雄烯二酮(△4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),提取胰腺、下丘脑及卵巢总RNA,以单碱基突变模板为内对照的RT-PCR方法对ARmRNA进行定量分析。结果:ASR模型血△4-A、TT、FT、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、下丘脑及卵巢的AR mRNA表达水平明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、下丘脑及卵巢AR mRNA的表达,引起该模型的高胰岛素血症和无排卵。

补肾活络中药对雄激素致不孕大鼠卵泡数、子宫内膜面积和内分泌的影响

目的观察补肾活络中药用药前后雄激素致不孕大鼠(ASR)卵巢卵泡数、子宫内膜面积和内分泌的变化。方法建立雄激素致高胰岛素、高雄激素不孕大鼠模型,通过阴道涂片筛选各组大鼠;卵巢、子宫重量采用电子天平称重法,血清促卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH)的测定采用放免法,卵泡数的测定采用免疫组化法。结果卵巢、子宫重量分析:正常组>中药组>阳性组>模型组;卵泡数、子宫内膜面积免疫组化定量分析:正常组>中药组>阳性组>模型组;血清FSH和LH水平:阳性组>正常组>中药组>模型组。结论中药补肾活络方能增加ASR卵巢重量,增加卵巢各级卵泡总数,使卵巢激素的靶器官子宫明显增重,内膜明显增厚,能增强垂体的内分泌功能,促进促性腺激素的合成和释放,提高垂体促性腺激素水平,以促进卵泡的发育和卵巢的排卵。

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠促性腺激素释放激素的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及雄激素受体(AR)mRNA 的影响。方法新生9日龄 SD 雌性大鼠一次性皮下注射丙酸睾丸酮,建立 ASR 模型,免疫组织化学法检测下丘脑视前区 GnRH 含量,RT-PCR 法测定下丘脑 AR mRNA 表达水平,并观察中药治疗前后上述两种物质的变化。结果 ASR 模型下丘脑视前区 GnRH 含量显著低于对照组(P<0.01),下丘脑 ARmRNA 表达水平显著升高(P<0.05),中药天癸方治疗后,下丘脑视前区 GnRH 含量上升至正常大鼠水平(P>0.05),AR mRNA 表达水平显著下降(P<0.001)。结论 ASR 模型下丘脑 AR mRNA 过度表达,视前区GnRH 含量降低,是引起该模型低促性腺激素和无排卵的原因之一,中药天癸方可使 AR mRNA 表达下降,改善低促性腺激素状态而产生促排卵作用。

饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠排卵及能量状态、血脂的影响

目的探讨饮食和养阴药对雄激素致不孕大鼠(ASR)排卵及能量状态、血脂的影响及其相互关系。方法给出生9日龄SD雌性大鼠丙酸睾酮1.25mg皮下注射,建立ASR模型,将其随机分为①模型组;②中药组(80日龄起灌服滋肾阴药“天癸方”);③节食组(80日龄开始饲料减为自由进食时的70%);④中药+节食组;⑤设立对照组。每组14只。各组于110日龄称重,断头处死,测定各组血总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、血糖的变化;同时对能量状态指标(每日摄食量、腹膜后脂肪垫、体重)进行评估;卵巢苏木精伊红染色作形态学观察。结果雄激素致不孕大鼠呈高代谢、能量失衡肥胖状态,其低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖较对照组增加(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、三酰甘油无明显改变(P>0.05),镜下见卵巢卵泡囊性扩张;分别予滋肾阴中药、节食、滋肾阴+节食治疗后,能量失衡肥胖状态改善,低密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖恢复正常,卵巢排卵功能不同程度地恢复,以中药+节食组治疗效果最佳(排卵率达71.43%),而中药组、节食组排卵率分别为42.86%,28.57%。结论雄激素致不孕大鼠有肥胖、脂质代谢紊乱及不排卵特点。养阴药+节食能改善能量代谢紊乱,促进排卵,且两者有协同作用。

补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠的促排卵及卵巢IGF-1表达的影响

目的探讨补肾助孕汤对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制。方法选择9日龄SD龄雌性大鼠随机分为4组,正常对照组:皮下注射中性茶油;ASR模型组:皮下注射丙酸睾丸酮;中药组及西药组:ASR模型自81 d龄起,每天灌胃给药;连续28 d。采用阴道涂片测定大鼠动情周期及排卵率,采用ELISA法测定促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)及孕酮(P)水平;采用免疫组织化学sp检测卵巢细胞胰岛素样生长因子(IGF-1)表达。结果补肾助孕汤可明显增加大鼠卵巢组织各级卵泡及黄体数目,恢复排卵功能;提高血清中FSH、LH及P水平,并且降低卵巢细胞中IGF-1的表达。结论补肾助孕汤可通过调节卵巢局部因子IGF-1及相应激素,促进卵泡生长发育及排出。

重组人促卵泡激素对雄激素致不孕大鼠局灶性脑缺血脑皮质RAS相关基因表达的影响

目的:探讨体内性激素的改变对局灶性脑缺血脑皮质肾素-血管紧张素(RAS)相关基因表达的影响。方法:建立雄激素致不孕大鼠(ASR)模型,给予果纳芬(rhFSH)后应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。大鼠随机分为ASR+假手术(sham)组、ASR+rhFSH+sham组、ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组,每组12只。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测大脑的缺血面积;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑皮质血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素受体1(AT1)和血管紧张素受体2(AT2)的mRNA表达。结果:TTC染色显示,ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组大鼠大脑均可见苍白色的缺血区域。ASR+MCAO组及ASR+rhFSH+MCAO组脑梗死面积均明显大于ASR+sham组及ASR+rhFSH+sham组(P<0.05),但ASR+rhFSH+MCAO组脑组织梗死面积明显小于ASR+MCAO组(P<0.05)。与ASR+sham组比较,ASR+rhFSH+sham组的AGT、ACE、AT1及AT2mRNA表达均无明显改变(P>0.05);而ASR+MCAO组大脑皮质缺血侧ACE、AT1及AT2mRNA的表达均明显增高(P<0.05),但AGT未见明显改变。与ASR+rhFSH+sham组比较,ASR+rhFSH+MCAO组缺血侧大脑皮质AGT、ACE、AT1及AT2mRNA的表达均无明显改变(P>0.05)。结论:雄激素的增高通过激活RAS系统参与了缺血性神经细胞的损伤,而rhFSH通过下调RAS系统减轻脑缺血损伤。

雄激素致不孕大鼠胰岛素样生长因子-1及其受体的变化

目的 观察雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠胰岛素样生长因子 1/胰岛素样生长因子 1受体(IGF 1/IGF 1R)的变化。方法 建立雄激素致高胰岛素高雄激素不孕大鼠模型 ,通过阴道涂片筛选各组大鼠 ;血清IGF 1测定采用放免法 ,IGF 1R的检测采用免疫组化法。结果 (1)血清IGF 1水平 :两组间无统计学差异 ;(2 )胰腺、肝脏、卵巢和肾上腺IGF 1R免疫组化定量分析 :模型组 <正常组。结论 雄激素致不孕大鼠存在着主要靶器官低水平IGF 1R。

环磷酰胺复制中老年男性雄激素部分缺乏综合征大鼠模型的研究

目的应用环磷酰胺复制中老年男性雄激素部分缺乏综合征的大鼠模型建立。方法取20只大鼠随机分为2组:正常组,模型组。分别于造模前、造模后1 d、造模后30 d观察大鼠一般情况、体质量、悬尾实验和强迫游泳实验时间以及睾丸指数,放射免疫法测定各组造模前后血清TT、FT水平,免疫组化法测定各组大鼠睾丸间质细胞stAR蛋白平均灰度值,并进行统计分析。结果与正常组比较,模型组大鼠悬尾实验时间延长,差异具有统计学意义(P<0.01),强迫游泳实验时间缩短,差异具有统计学意义(P<0.01),血清TT、FT水平、stAR蛋白平均灰度值均显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论环磷酰胺造成的大鼠血清TT、FT水平下降,行为学改变的反睾丸组织退行性变,基本类似PADAM模型。

rhFSH对雄激素致不孕大鼠局灶性脑缺血大脑皮质AKT及PDGF-B基因表达的影响

目的探讨重组人促卵泡激素(rhFSH)对雄激素致不孕大鼠局灶性脑缺血大脑皮质AKT及PDGF-B基因表达的影响。方法建立雄激素致不孕大鼠(ASR)模型,给予rhFSH后应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。48只大鼠随机分为ASR+假手术(sham)组、ASR+rhFSH+sham组、ASR+M CAO组及ASR+rhFSH+MCAO组,每组12只。采用Longa法进行神经行为评分。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑皮质AKT及PDGF BmRNA的表达。结果 ASR+MCAO组大鼠出现明显的神经运动功能障碍体征,缺血侧大脑皮质AKT mRNA的表达降低,PDGF-B mRNA表达上调,而ASR+rhFSH+MCAO组大鼠神经运动功能障碍体征明显减轻,AKT及PDGF-B的表达均明显上调。结论 rhFSH可能通过对AKT及PDGF的调节,促进血管增生以及重塑,导致细胞存活增多,从而减轻脑损伤。

补肾中药对雄激素致不孕大鼠垂体促性腺激素的影响

有报道雄激素致不孕大鼠(Androgen-SterilizedRat-ASR)垂体组织匀浆黄体生成素(LH)含量明显低于正常雌性大鼠,灌服补肾中药能使降低的 LH 水平升高。本研究采用黄体生成素释放激素(LHRH)垂体兴奋试验(LRT),观察 ASR 及其用补肾中药前后,垂体 LH 分泌的反应性,以助于补肾中药治疗月经失调机理的探讨。

雄激素致不孕大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及相关酶caspase-3的研究

目的探讨ASR卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡相关酶caspase-3的表达。方法9日龄sD雌性大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮制造无排卵模型，3—4月龄时191道脱落细胞涂片选取动情前期处死大鼠，免疫组化法检测ASR卵巢颗粒细胞凋亡及相关酶caspase-3的表达。结果在ASR和正常大鼠均检测到颗粒细胞的凋亡及凋亡相关酶easpase-3的表达，模型组颗粒细胞凋亡及凋亡相关酶caspase-3的表达较强。结论卵巢颗粒细胞凋亡及凋亡相关酶caspase-3的表达增强导致了排卵障碍性不孕症的发生。

补肾中药对雄激素致不孕大鼠基质金属蛋白酶-9的影响

目的 :观察补肾中药治疗前后雄激素致不孕大鼠模型 (ASR)基质金属蛋白酶 9(MMP 9)的变化。方法 :建立雄激素致不孕大鼠模型 ,通过阴道涂片筛选各组大鼠。进行MMP 9原位杂交 ,显微镜检并电脑摄像 ,图像分析卵巢MMP 9RNA信号表达强度。结果 :MMP 9mRNA的表达面积和表达强度 :模型组 <正常组 <阳性组 <中药组 (P <0 0 1)。结论 :卵巢基质金属蛋白酶 9mRNA在雄激素致不孕大鼠表达水平较其它组为低 。

雄激素致不孕大鼠卵巢血红素加氧酶蛋白的表达

目的：研究血红素加氧酶蛋白在雄激素致不孕模型大鼠卵巢的表达。方法：9日龄SD雌性大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮制造无排卵不孕模型,3-4月龄时选取动情前期断头处死,采用免疫组化法,观察并比较血红素加氧酶蛋白在ASR和正常大鼠卵巢的表达。结果：与正常组相比,HO-1和HO-2在ASR卵巢颗粒细胞表达减弱,在ASR泡膜细胞表达增强。结论：ASR无排卵的发生可能与血红素加氧酶两个亚型的表达异常有关。

通脉大生片对肾虚排卵障碍不孕模型大鼠卵巢基质金属蛋白酶-9的影响

目的:探讨通脉大生片治疗对雄激素致不孕大鼠模型(ASR)卵巢基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:采用雄激素致不孕大鼠模型(ASR模型),以原位杂交方法观察分析卵巢MMP-9 mRNA信号表达的情况。结果:由于药物的干预,各个用药组MMP-9阳性细胞的表达浓度和表达总量均高于模型组,以通脉大生片高剂量组卵巢MMP-9 mRNA表达尤其明显,与正常组水平接近,差异无统计学意义(P>0.05)。通脉大生片高剂量组卵巢MMP-9 mRNA表达亦明显优于氯米芬组,差异(P<0.05)。结论:通脉大生片可能通过促进肾虚排卵障碍不孕大鼠卵巢基质金属蛋白酶-9的表达,发挥其对不孕症的治疗作用,这可能是其促进卵泡发育和卵巢排卵的机制之一。

【特刊综述】利用雄激素受体敲除（ARKO）小鼠模型认识人类雄激素缺乏

雄激素的作用机理很复杂。最近，使用转基因修饰小鼠模型进行的雄激素受体研究使我们对雄激素作用机理有了更进一步的理解。Cre-loxP系统能够完成组织和／或细胞特异性的敲除。通过使用Cre—loxP系统已经获得了大量整体性或组织特异性雄激素受体（ARK0）敲除模型。这些ARKO模型的多个雄激素作用位点，包括心血管系统、免疫和造血系统、骨骼、肌肉、脂肪组织、前列腺和脑，均已被检测。本篇综述着重阐述了通过针对这些雄激素作用位点的ARKO小鼠模型而取得的人类雄激素缺乏的研究成果，并且指出充分理解Cre-loxPdx鼠模型的优缺点才能正确认识其表型。

逍遥丸对雄激素致无排卵大鼠卵巢功能的影响

目的:探讨逍遥丸对雄激素致无排卵大鼠(ASR)卵巢功能的影响,研究其治疗无排卵性疾病的作用机制。方法:出生9日龄SD雌性大鼠随机分为ASR模型组及对照组。模型组大鼠1次性皮下注射丙酸睾丸酮(T)1.25mg,建立ASR模型,模型组给予逍遥丸治疗7周。选择动情前期处死,观察比较各组大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)水平的变化,卵巢和子宫指数、卵巢形态学的变化,研究逍遥丸治疗ASR的作用机制。结果:无排卵大鼠血清E2、T水平明显高于正常组(P<0.01),卵巢、子宫重量指数明显降低。卵巢形态学观察:卵巢多囊变、黄体罕见,卵母细胞消失。逍遥丸治疗后,血清T、E2激素水平降低(P<0.01)。卵巢、子宫重量指数明显增加,改善了卵巢形态结构。结论:逍遥丸可能通过调节性激素水平,进而改善卵巢形态结构,改善卵巢功能来达到治疗无排卵的作用。