雅致小克银汉霉AS3.2028对香紫苏醇的初次及二次羟基化修饰

目的应用生物转化的方式对香紫苏醇的反式十氢萘环进行羟基化修饰。方法选择经典的药物代谢模型真菌雅致小克银汉霉AS3.2028对香紫苏醇进行一次和二次转化,转化产物经过硅胶柱层析及葡聚糖凝胶Sephadex LH20分离纯化,进而采用MS、1D/2D NMR技术鉴定转化产物结构。结果与结论雅致小克银汉霉AS3.2028对香紫苏醇初级转化,得到4个转化产物,分别为2α-OH香紫苏醇、3β-OH香紫苏醇、18-OH香紫苏醇和19-OH香紫苏醇。继而首次以3β-OH香紫苏醇为底物再次进行羟基化,得到3β,6α-OH香紫苏醇及3-羰基香紫苏醇,其中3β,6α-OH香紫苏醇为未见报道的新化合物。

华根霉和雅致小克银汉霉对青蒿素的生物转化研究(英文)

目的 探讨微生物对青蒿素 ( )的转化作用。方法 通过华根霉和雅致小克银汉霉在土豆培养基中发酵产酶 ,对青蒿素进行转化。结果 两株菌对底物均有转化作用 ,分离出去氧青蒿素 deoxyartem isinin ( ) ,3α-羟基去氧青蒿素 3α- hydroxydeoxyartemisinin( )和 9β-羟基青蒿素 9β- hydroxyartemisinin( )共 3个产物 ,其中 为一新化合物 ,同时振荡条件下底物在无菌培养基中也能发生微量转化得到产物 。结论 青蒿素易被实验两株真菌转化 ,同时过氧桥也易断裂而失去一个氧原子成为去氧青蒿素 ,丧失抗疟活性 。

雅致小克银汉霉对16α,17α-环氧黄体酮C_(11)α-羟基化的工艺研究

目的研究雅致小克银汉霉对16α,17α-环氧黄体酮的C11α-羟基化的工艺条件。方法通过单因素试验和正交设计,以C11α-羟基化转化率为指标,确定最佳发酵工艺条件。结果该菌株最佳发酵工艺条件为:葡萄糖3%,玉米浆2.8%,(NH4)2SO40.3%,MnSO40.01%,BaCl20.02%,ZnSO40.005%,LiCl 0.01%,初始pH4.5,接种量3%,装液量100 mL/500 mL,摇床选用往复式摇床。结论采用优化后的培养条件,C11α-羟基化转化率达65.16%。作为1株高羟化能力的新菌株,具有良好的应用前景。

雅致小克银汉霉发酵生产γ-亚麻酸

研究了用雅致小克银汉霉菌生产γ 亚麻酸的种子和发酵培养条件。研究结果表明 ,最佳种子培养条件为 :培养基自然pH下 ,1.0 %孢子菌悬液接种 ,添加 0 .2 %Tween 80 ,用 8层纱布封口 ,30℃下 180r/min的摇床上培养 48h。最佳发酵培养条件为 :接种量 10 % ,添加 0 .1%Tween 80 ,pH4.8～ 5 .4,碳氮比为 33∶1,2 5℃下 180r/min的摇床上培养 16 8h。

雅致小克银汉霉菌ATCC36112对除草剂莎稗磷的降解测定

为利用生物降解修复莎稗磷残留污染,以雅致小克银汉霉菌ATCC36112为微生物对象,通过建立莎稗磷的高效液相色谱方法,探究其对莎稗磷的降解效果。结果表明：莎稗磷为0.1-50.0mg/L时线性关系良好,相关系数（R2）为0.999 1,检出限为0.1mg/L;当添加农药为5和25mg/L时,回收率分别为93.30%和104.64%,相对标准偏差〈3.86%,符合农药残留的检测要求;采用此方法测定莎稗残留浓度,第10天时,莎稗磷残留为0.19mg/L,降解率在98%以上,符合一级动力学模型,方程为Ct=13.69×e-0.43t,半衰期为1.61d。雅致小克银汉霉菌可以为莎稗磷残留污染的生物修复提供适宜的菌种资源。

雅致小克银汉霉对(+)-诺卡酮的生物转化研究

目的探究在雅致小克银汉霉(ATCC 9245)的催化下,(+)-诺卡酮的生物转化反应的效率、产率及产物类型。方法利用雅致小克银汉霉建立生物转化体系,以(+)-诺卡酮为底物进行生物转化,高效液相色谱(HPLC)监测生物转化过程,通过萃取及柱层析的方法分离纯化发酵产物,运用^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、HRMS、IR等数据对化合物进行结构确证。结果发酵获得2个主要产物11,12-二羟基诺卡酮(化合物1)和11,12-环氧诺卡酮(化合物2),化合物1含量在发酵第4天达到95.14%的峰值。结论雅致小克银汉霉可以快速、高效催化(+)-诺卡酮转化为其环氧化和羟基化衍生物,并可以高选择性地获得11,12-二羟基诺卡酮。

雅致小克银汉霉与芽孢杆菌联合降解义马煤产腐植酸

微生物降解是煤炭清洁高效利用的重要方式之一,但真菌细菌联合培养对煤的降解效果尚无定论。以雅致小克银汉霉(Cunninghamella elegans)和芽孢杆菌(Bacillus sp.)为降解菌,以硝酸氧化的义马煤为底物进行了煤的联合降解实验。利用紫外-可见分光光度计、p H计、电感耦合等离子体质谱仪对降解液的吸光度A450、p H、金属元素(Cr、As、Mn、Pb、Co、Ni、Cu、Zn、Mo)质量浓度进行测定。利用元素分析仪、红外光谱仪、气质联用仪对产物腐植酸进行分析。研究结果显示雅致小克银汉霉(Cunninghamella elegans)、芽孢杆菌(Bacillus sp.)、混合菌的腐植酸产率分别为58.17%、61.00%、67.17%,混合菌降解液的pH与细菌接近,混合菌降解的腐植酸样品中检出细菌的特征性产物而真菌的特征性产物则未检出,说明两株菌联合强化了碱性环境,提高了硝酸氧化煤的降解率,降解过程中细菌起主导作用。金属元素(Cr、As、Mn、Pb、Co、Ni、Cu、Zn、Mo)在降解过程中从煤迁移到了降解液,其中Cr、As、Pb、Ni、Cu、Mo的质量浓度与A450拟合的判定系数(R2)大于0.6,说明降解液中这6种金属元素的质量浓度可表征降解率的相对大小。化学提取腐植酸与生物提取腐植酸均富含羧基、羟基、羰基等活性官能团、长链脂肪酸(C16、C18)和4种吡咯衍生物,生物提取腐植酸还含有分子量较小的脂肪酸(C3、C4、C5、C13、C14、C15)、2种吡咯衍生物和呋喃等含氮化合物,生物提取腐植酸的C、H元素质量分数高于化学提取腐植酸。

雅致小克银汉霉对莫诺苷生物转化工艺的研究

目的建立UPLC-MS/MS法测定莫诺苷含量,并优选出雅致小克银汉霉对莫诺苷的生物转化工艺条件。方法采用UPLC-MS/MS法测定莫诺苷的含量,以莫诺苷的生物转化率为指标,进行培养基初始pH、底物浓度、转化时间、振摇频率等条件的考察,选出最佳生物转化条件。结果莫诺苷在76.544~19136 ng·mL^-1与峰面积线性关系良好,回归方程为y=0.0003x-0.0286(r=0.9996),方法符合生物样品分析方法的要求。雅致小克银汉霉对莫诺苷最佳的生物转化条件为底物浓度11.48μg·mL^-1、转化时间8 d、摇床振摇频率160 r·min^-1,放置于28℃摇床培养,转化率约90%。结论雅致小克银汉霉的微生物代谢模型对莫诺苷有较高的生物转化率,所建立的莫诺苷UPLC-MS/MS含量测定方法准确有效,能够为莫诺苷的体内体外生物转化研究提供依据。

刺孢小克银汉霉菌株利用马铃薯淀粉废水生产GLA油脂的研究

以马铃薯淀粉废水为发酵基质,用刺孢小克银汉霉(Cunninghamella echinulata)发酵生产含γ-亚麻酸(GLA)的油脂。研究表明,刺孢小克银汉霉菌株能有效利用马铃薯淀粉废水合成GLA,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为(NH4)2SO4,最佳C/N为1001∶。在最佳条件下发酵培养7 d,废水的COD去除率达到19.21%,生物量达到20.53g/L,菌丝体中粗油量为3.91g/L,产油率为19.03%,GLA产量为680.10 mg/L。初步说明通过微生物发酵可以达到处理废水和生产生物活性物质的双重目的。

绮丽小克银汉霉对南方根结线虫卵的寄生性

利用水琼脂平板法测定分离于南方根结线虫卵囊的绮丽小克银汉霉对南方根结线虫游离卵及卵囊中的卵寄生性.结果发现,绮丽小克银汉霉对平板上游离卵的寄生性低,寄生率为21.1%;完整卵囊接种菌后,菌丝可定殖于卵囊表面,但卵囊内的卵未见被寄生.本试验对绮丽小克银汉霉作为生防菌的应用可能性进行了探讨.

刺孢小克银汉霉9980生物酶法制备D苯丙氨酸

筛选到一株产氨基酰化酶的真菌刺孢小克银汉霉9980,直接利用其菌体细胞拆分N乙酰DL苯丙氨酸,最终制得D苯丙氨酸。最适反应条件为:0.2mol/LN乙酰DL苯丙氨酸(含Co2+5×10-4mol/L),0.04g/mL菌体,在pH值为7.0、50℃条件下反应24h,拆分率达90%以上。产物经JK008阳离子交换树脂分离。N乙酰D苯丙氨酸经6mol/LHCl加热回流4h脱乙酰得D苯丙氨酸。DPhe[α]20D=+34.4°(水溶)。

寄生于根结线虫卵囊的绮丽小克银汉霉

从发生根结线虫病害的丝瓜、柑桔、水蜜桃等作物的根上的根结线虫卵囊上分离获得6株绮丽小克银汉霉(Cunning-hamella elegansLendner)。接种试验证实这些分离物可寄生南方根结线虫的卵。

刺孢小克银汉霉氨基酰化酶拆分DL-丙氨酸的研究

选育了刺孢小克银汉霉(Cunninghamellaechinulata)9980菌株,并对其进行液体培养,比较了3种不同培养基中菌体细胞氨基酰化酶活性,考察了几种因素对菌体细胞拆分反应的影响,并对DL-丙氨酸进行了光学拆分。结果表明:蛋白胨培养基菌体细胞酶活最高,达680u/g。菌体细胞拆分反应最适温度55℃,最适pH7.0,最佳底物浓度为0.2mol·L-1,缓冲体系中的无机离子对拆分反应有抑制作用,10-3～10-4mol·L-1的Co2+对拆分反应有激活作用。用菌体细胞对DL-丙氨酸拆分反应中,D-丙氨酸得率平均达87.1%。

刺孢小克银汉霉产γ-亚麻酸代谢规律的研究

采用液体发酵的方法 ,通过研究发酵过程中生物量、油量和GLA合成之间的关系以及MgSO4 、MnSO4 和 (NH4 ) 2 SO4 对三者的影响 ,明确一株刺孢小克银汉霉 (Cunninghamellaechinulata)产γ -亚麻酸的代谢规律和不同因子对代谢规律的影响和因子添加的可能性。结果显示 ,生物量和油量的积累先于GLA到达高峰 ;在生长中期生物量积累处于稳定 ,GLA的合成速率高于油脂产生的速率 ,使得油脂中整体GLA含量开始上升 ;后期由于营养消耗 ,菌体利用自身合成的油脂作为能量供给减饱和酶系 ,GLA含量呈快速增长过程并且持续 ;Mg2 + 、Mn2 + 和NH+4离子对GLA合成有一定的促进 ,但作用机制各不相同 ,可通过在不同的时期的添加使GLA的积累增加。

小克银汉霉菌菌体形态对γ-亚麻酸发酵产量影响研究

对小克银汉霉菌发酵生产γ–亚麻酸条件进行初步研究,确定接种适合条件,实验结果表明,种瓶菌体形态为0.5mm小球,发酵瓶菌体形态为1～2mm粘稠小球时,菌体干重达40.20g/L,油脂量为27.25g/L,GLA量为1.88g/L。

刺孢小克银汉霉开放式固态发酵产油脂条件研究

以高产油脂菌株刺孢小克银汉霉B5为试验对象,研究了影响B5开放式固态发酵的多个因素并对其发酵过程做动力学曲线分析,刺孢小克银汉霉B5开放式固态发酵产油脂的最佳条件是:以5 g玉米秸秆为基本固体培养基,添加3.50 g的葡萄糖和0.15 g的硝酸铵,再加入0.025 g柠檬酸、0.02 g硫酸锌和8 mL水,接种量为10 mL。在此基础上,自然pH值,25℃,发酵8 d,固态发酵干基质油脂百分含量可以达到13%左右。

刺孢小克银汉霉发酵产γ-亚麻酸时补料工艺研究

研究刺孢小克银汉霉(Cunninghamellaechinulata)发酵生产γ-亚麻酸(GLA)的补料工艺。结果表明,该菌株在含有0.25%黄豆饼粉的发酵培养基中,以分批补料方式,即培养2.5d后补入20g/L食用糖与10g/L麦芽糖混合液,培养第3d时补入1.0g/L(NH4)2SO4,在培养第4d补入2.0g/LMgSO4,在培养第5d补入2.0g/LMnSO4。培养10d,菌体生物量达17.065g/L,油脂产量达6.530g/L,GLA%达23.5157%,GLA含量达1535.58mg/L,与补料前相比,生物量、油脂量、GLA%、GLA含量分别提高79.67%、217.30%、14.85%和264.43%。

刺孢小克银汉霉菌体氨基酰化酶的性质研究

首次选育出有较高氨基酰化酶活性的菌株刺孢小克银汉霉(Cunninghamella echinulata)9980,并进行液体培养,比较了3种不同培养基中菌体细胞氨基酰化酶活性,考察了几种因素对菌体细胞酶活的影响.结果表明:蛋白胨培养基中菌体细胞酶活最高,达680u/g.菌体细胞酶活最适温度55℃,最适pH7.0,最佳底物浓度为0.2mol/L,缓冲液中的无机离子对酶活有抑制作用,10-3～10-4mol/L的Co2+对酶活有激活作用.

刺孢小克银汉霉产油脂的提取方法研究

以刺孢小克银汉霉为载体,在分离有机溶剂的方法、不同溶媒、溶媒配比、酸热时间和次数方面对提取油脂的传统酸热法进行了改进研究,获得了新的酸热法,并将其与索氏提取法进行了含油率和气相色谱后成分的比较分析.新的酸热法,采用抽滤分液和正己烷、乙醇按2∶1混合萃取,两次热冷破壁.与传统的酸热法相比较,更为安全,简便,省去了离心的过程,油脂得率提高了20.71%;与索氏提取法进行比较:新酸热法单位时间处理能力是索氏提取法的96倍,设备要求低.它的油脂得率能达到索氏提取法的95%以上,GLA的含量较索氏提取法高出了17.45%,是一种真正高效、快速的能运用于工业化的提取方法.

红豆杉愈伤组织中紫杉烷类成分sinenxan A的微生物转化研究

目的 研究紫杉烷类化合物sinenxanA的微生物转化情况。方法 分别利用两株真菌 (刺囊毛霉AS3 345 0、刺孢小克银汉霉AS 3 340 0 )和一株细菌 (普通变形菌AS 1 12 0 8)对sinenxanA进行生物转化。结果 得到 3个转化产物 ,分别为 10 去乙酰 sinenxanA1,6α 羟基 10 去乙酰sinenxanA2 ,9α 羟基 10 去乙酰sinenxanA3。 结论SinenxanA易被微生物转化 ,10位乙酰基化学性质比较活泼。