不同浓度人参皂苷RG3对高转移卵巢癌细胞集落形成及细胞形态的影响

目的:观察人参皂苷( Rg3)对高转移人卵巢癌细胞系H0-8910PM的细胞集落形成和细胞形态的影响。方法:采用本院自建的高转移人卵巢癌细胞系H0-8910PM进行实验,随机分成5组:①空白对照组:只加新鲜的全培养液;②低浓度 Rg3组:10μg/mL Rg3培养液;③中浓度 Rg3组:20μg/mL Rg3培养液;④中高浓度 Rg3组:30μg/mL Rg3培养液;⑤高浓度 Rg3组:40μg/mL Rg3培养液。观察不同浓度 Rg3分别对细胞集落形成率和细胞形态的影响。结果:经单因素分析发现5组细胞随着 Rg3浓度的升高,细胞集落形成率逐渐而下降,差异有统计学意义(F=176.362,P=0.000)。多组变量随机区组分析示:空白对照组与任何浓度 Rg3组比较差异均有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000,0.000)。低浓度组与中高浓度 Rg3两组细胞集落形成率结果相近(8.3%vs6.9%),差异无统计学意义(P=0.133)。中高浓度组与高浓度 Rg3两组细胞集落形成率均很低(2.5%Vs0.78%),差异无统计学意义(P=0.057)。低浓度组、中高浓度组分别与中高浓度组、高浓度组比较,差异均有统计学意义(P=0.000,0.000,0.000,0.000)。中浓度以上 Rg3可引起H0-8910PM的细胞形态结构损伤。中高浓度及高浓度 Rg3在微观结构上能造成更严重的细胞形态结构损伤。结论: Rg3对高转移人卵巢癌H0-8910PM细胞能有效减少细胞集落的形成。中高、高浓度的 Rg3(30μg/mL以上)尤其可以产生较好的抑制肿瘤细胞生长作用,并呈一定的剂量依赖性,且对细胞形态结构破坏上产生更重的损伤。

兔动员外周血间充质干细胞集落形成能力与神经元诱导分化研究

目的研究动员后兔外周血间充质干细胞(PBMSCs)的存在频率,并对PBMSCs进行神经元诱导分化鉴定。方法采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员,结合密度梯度离心和贴壁培养法分离、培养兔外周血样品中的PBMSCs,利用集落形成率分析动员兔PBMSCs的存在频率,并对PBMSCs的神经元分化能力进行体外诱导鉴定。结果动员后的PBMSCs原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3～4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSCs形态均一、呈长梭形漩涡状生长;未动员的外周血样品中的贴壁细胞少,集落形成少,且易老化,无法传代。集落形成率实验显示,动员后的PBMSCs在每百万外周血单个核细胞中有2.8～10.8个;而未动员组PBMSCs仅有0～3个。免疫细胞化学染色显示,PBMSCs经神经诱导7d后其神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元特性核蛋白(NeuN)染色阳性。结论动员剂可提高兔外周血中的PBMSCs含量,所获取的PBMSCs具备神经元分化能力。

人参皂苷Rg3联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系H0-8910PM增殖的抑制作用

背景与目的:人参皂苷(Rg3)有抑制肿瘤细胞生长的作用,顺铂为诱导肿瘤凋亡的化疗药物,中西医结合治疗肿瘤日益受到重视。本研究探讨Rg3联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系H0-8910PM增殖的抑制作用。方法:采用我院自建的高转移人卵巢癌细胞系H0-8910PM进行实验研究。实验分成6组:①空白对照组:只加新鲜的全培养液;②Rg3低浓度组:10μg/mlRg3培养液;③Rg3中浓度组:20μg/mlRg3培养液;④Rg3高浓度组:40μg/mlRg3培养液;⑤顺铂单药对照组:含10μg/ml顺铂的培养液;⑥顺铂+Rg3(中浓度)联合用药组:含10μg/ml顺铂+20μg/mlRg3培养液。分别观察各组对细胞核分裂指数、细胞集落形成率的影响。结果:随着Rg3浓度增高及Rg3和DDP的联合应用细胞核分裂指数下降,以联合用药组下降最明显(F=5.498,P=0.011)。空白对照组和Rg3高浓度组,顺铂单药组及顺铂+Rg3(中浓度)联合用药组相比,差异有非常显著性(P=0.011,0.007和0.001);Rg3低、中浓度组分别与顺铂+Rg3(中浓度)联合用药组相比,差异有显著性(P=0.010和0.015)。细胞集落形成率随着Rg3浓度增高而下降(F=100.69,P=0.000),高浓度的Rg3、DDP和联合用药组三者结果相近(P=0.887)。Rg3高浓度组、顺铂单药组合顺铂+Rg3(中浓度)组与空白对照组、Rg3低浓度组和Rg3中浓度组相比,及Rg3高浓度组与其他各组相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论:Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的杀伤作用,能有效抑制细胞核分裂、细胞集落形成,但未发现Rg3和顺铂联合用药会相加或协同作用。

海南粗榧新碱衍生物HH07A对体外L1210细胞的杀伤作用

体外培养的小鼠Ｌ１２１０细胞被ＨＨ０７Ａ２μｇ·ｍｌ－１作用２４ｈ后，与对照组细胞相比，其细胞数不再增长，有丝分裂数及集落形成率下降，细胞形态及细胞周期动力学均发生一定的变化。且ＨＨ０７Ａ大剂量短期作用抑制Ｌｌ２１０细胞集落形成的效率高于低剂量持续作用。

试管内肿瘤细胞集落形成法的建立及其用于药物抗肿瘤活性研究

本文建立了试管内软琼脂小鼠L_(1210)、P_(388)细胞集落形成法,并与平皿和24孔板软琼脂集落形成法进行了比较,肯定了试管法具有用肉眼计集落数、简便、快速、经济、污染率低,用药量少等优点.本法的集落形成率(PE)平均为0.67±0.17.用本法评价了阿霉素等5种临床抗癌药对抗L_(1210)、P_(388)细胞的作用,其剂量-反应曲线呈指数性直线.用IC_(50)(μg/ml)表示抗肿瘤效应,以阿霉素和氮芥作用最强,其次顺铂、卡氮芥和三尖杉酯碱作用最弱.试管法与平皿法的结果一致.

人重组核苷二磷酸激酶α亚基对MCF-7/S的影响

软琼脂集落形成实验检测rhNDPK -α对乳腺癌细胞株MCF - 7 S集落形成率的影响 ,结果表明 ,MCF - 7 S集落形成率随rhNDPK -α浓度增高下降 ,提示rhNDPK -α可能具有抑制乳腺癌细胞株MCF - 7 S转移作用 ;MTT法检测rhNDPK -α分别联用丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱对MCF - 7 S的增殖影响 ,结果显示 ,rhNDPK -α分别联用三种化疗物与这三种化疗药物单独作用于MCF - 7 S无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示rhNDPK -α对丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱没有增敏作用。

鳖甲浸出液对人肠癌细胞(HR-8348)的作用及机理初步研究

鳖甲具有抑制肿瘤生长作用,我们已在荷人肠癌裸鼠体内进行了实验性治疗并得到了证实。本研究用自建的人肠癌(HR—8348)细胞系分别从活细胞计数、核分裂指数、细胞上清液中 LDH 活性的测定、细胞集落形成率及光、电镜观察进行了实验,同时用氟脲嘧啶(5-Fu)作了比较。初步研究取得了令人满意的结果。

二氧化钍及稀土铁矿粉尘体外诱发金黄地鼠胚胎细胞恶性转化的进一步研究

在用不同浓度二氧化钍的稀土混合矿尘体外诱发了金黄地鼠胚胎细胞（SGHE）恶性转化后,作者进一步用包头白云鄂博稀土铁矿粉尘（MP,含Fe2O3及FeO,占46.0％,还有CaO,SiO2,MgO,MnO,CO2,SO3等）、天然钍（ThO2,含等量的（228）Th及（232）Th）、矿粉加天然钍（MP+ThO2,比例41:9）诱发细胞转化。

人表皮细胞培养方法的改进

表皮细胞体外培养技术的建立和发展,为烧伤治疗和皮肤病学研究等方面开拓了新的途径。目前国内外对表皮细胞培养技术仍处在不断探索和研究阶段。为进一步寻求更佳的表皮细胞培养方法,笔者在前人工作的基础上对表皮细胞的分离和培养过程进行了改进并获得成功。

丁酸钠诱导BEL7402人肝癌细胞恶性表型逆转的研究

丁酸钠诱导ＢＥＬ７４０２人肝癌细胞恶性表型逆转的研究梁若斯胡梅香黄炜＊（广州医学院组胚教研室＊广州医学院肿瘤研究所）癌细胞能在某些因子的诱导作用下，恶性表型发生逆转。本研究旨在证明天然物质丁酸钠能诱导ＢＥＬ７４０２人肝癌细胞恶性表型逆转。我们使用四种...

脑多头蚴细胞系生长特性的研究

本课题组对培育的绵羊脑多头蚴细胞系的第22代细胞测定其生长特性和集落形成率。结果：细胞生长曲线峰值期在第6d，集落形成率为3％。

人盲肠未分化腺癌细胞系Hce-8693的建立及其生物学特性

人类大肠癌细胞体外培养建系自Moore于1963年建成第一个细胞系后,Tompkins于1974年建立了人回盲部腺癌细胞系HCT-8。作者等于1986年自外科手术切下之盲肠肿瘤标本取材。

生长因子对气管上皮细胞及肺癌细胞生长影响

绝大多数人类的肿瘤起源于上皮细胞。上皮细胞的培养对癌变机理及遗传毒理学的研究均具有重要的意义。我们采用MCDB151培养基加多种生长因子。

胎牛血清和新生牛血清体外培养动物细胞的效果比较

为了比较进口胎牛血清、国产胎牛血清和国产新生牛血清的细胞培养效果,以2批进口胎牛血清、3批国产胎牛血清和2批国产新生牛血清为试验材料,采用细胞贴壁传代培养、最大增殖浓度和倍增时间以及集落形成率3种方法,比较了7批供试血清对VERO、CHO-K1、MDCK和Hela 4种细胞的培养效果。结果表明:连续传代培养时所有牛血清均有较好的促细胞生长的效果;进口胎牛血清、国产胎牛血清和国产新牛血清对4种细胞的平均最大增殖密度为67.8×104、62.1×104和64.8×104 cfu·mL-1,平均倍增时间为22.2、22.5和22.7h;对VERO、CHO-K1和Hela细胞的平均集落形成率为59.2%、57.6%和50.9%。3种牛血清对群体性细胞培养时效果差别不明显,对单细胞克隆培养时胎牛血清优于新生牛血清。

E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响

目的 研究抗放药物E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响。方法 用不同剂量的13 7Csγ射线照射培养的CHO和CHL细胞 ,比较在有或没有E838的情况下 ,其对细胞集落形成率以及转化率的影响。结果 在 3Gy照射剂量下 ,CHO细胞加药 1μg/ml处理组集落形成率显著高于不加药组 (P <0 0 5 ) ,而转化率加药组比不加药组低且有统计学意义 (P <0 0 1)。CHL细胞在此范围内变化亦有同样的趋势 ,但结果无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 E838在一定浓度范围内对辐射诱导哺乳动物细胞转化有一定的抑制作用。

食蟹猴精原干细胞体外培养体系的初步建立

为了掌握食蟹猴(Macaca fascicularis)精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)体外培养生长特性,并建立其培养体系。手术法获得幼年期食蟹猴单侧睾丸,改良的两步酶消化法获得其细胞悬液,添加特定培养液进行体外培养,以碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定培养细胞,并评价不同饲养层细胞和不同接种密度对SSCs体外培养的增殖效果。结果表明,含10%FCS等补充物的DMEM液可支持食蟹猴SSCs的体外存活与增殖,培养3～5 d可观察到SSCs集落,AKP染色呈阳性;以支持细胞为饲养层体外培养SSCs 3 d和7 d,SSCs集落形成率均显著高于皮肤成纤维细胞饲养层(P<0.05),且以1×105个/mlSSCs接种密度是较好的原代培养开始。该培养体系的初步建立可为体外研究非人灵长类精子发生机制和SSCs基因修饰提供便利。

Wortmannin抑制PI3K途径对bcr/abl基因介导的白血病细胞增殖和凋亡抗性影响的研究

目的探讨磷酰肌醇-3激酶(PI3K)途径在K562、NB4和HL60细胞增殖和凋亡抗性中的不同作用。方法用磷酰肌醇-3激酶(PI3K)特异抑制剂Wortmannin(WT)抑制PI3K活性,经细胞生长曲线测定、半固体集落形成实验、流式细胞膜联蛋白V(Annexin-V-Flous)标记技术检测细胞凋亡百分比和凋亡指数。观察K562、NB4和HL60细胞增殖能力及凋亡抗性的变化。结果K562、NB4和HL60细胞在24、48、72h的增殖抑制率分别为41.33%、57.46%、65.85%和26.29%、5.51%、2.10%及32.14%、17.14%、13.14%。生长曲线显示WT抑制PI3K途径可显著抑制K562细胞的增殖,对NB4和HL60细胞增殖无明显影响。K562、NB4和HL60细胞加和不加WT,培养14d后的集落形成率分别为16.15%和7.60%,5.90%和6.10%,6.60%和6.40%。集落形成抑制率为52.94%、3.39%和3.03%。K562、NB4和HL60细胞加WT、AraC、WT+AraC作用24h后的凋亡细胞百分比分别为(17.27±1.94)%、(23.25±14.12)%、(17.60±1.27)%;(17.00±3.36)%、(20.55±8.57)%、(22.07±5.62)%;(27.60±4.36)%、(17.56±9.28)%、(20.50±7.97)%。凋亡指数分别为(6.88±2.66)、(7.79±2.75)、(3.03±0.56);(8.91±3.86)、(9.35±4.19)、(3.79±0.93);(13.39±4.49)、(7.61±6.35)、(5.27±2.69)。结论WT可以通过抑制PI3K通?

照射后人食管鳞癌EC109细胞周期再分布的研究

照射敏感性与细胞周期运动中所处时相有关,放射后细胞周期将重新分布,这是分割照射杀灭肿瘤的两大有利条件之一。然而人体各种肿瘤照射后的细胞周期再分布的具体规律尚不清楚。