人脐带间充质干细胞对小鼠衰老进程中骨髓细胞集落生成的影响

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对小鼠衰老进程中骨髓造血干祖细胞增殖能力的影响。方法:由足月新生儿脐带分离间充质细胞(MSC)作供体,6月龄Balb/c小鼠为受体,将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组输注MSC(5×105/只),每月1次,共4次;对照组输注生理盐水。干预开始后第3个月和第6个月分别比较两组的单侧股骨骨髓有核细胞计数(BMNC)、造血祖细胞集落培养(CFU-GM、CFU-E、CFU-MK)和外源性脾集落形成单位计数(CFU-S)。结果:干预后第3个月时,实验组BMNC、CFU-GM和CFU-MK高于对照组,而CFU-E和CFU-S无明显差别;干预后第6个月时,实验组的上述指标均明显高于对照组,且随着衰老出现下降的速度明显慢于对照组,差异有显著性(P<0.05)。结论:定期输注hUC-MSC可以相对增加宿主自身造血干祖细胞的生物学活性,从而延缓小鼠造血组织的自然衰老进程。

半叶马尾藻多糖对辐射损伤小鼠骨髓细胞集落生成的影响

探讨半叶马尾藻多糖[Sargassumhemiphyllum (Turner)C .Ag .polysaccharides ,SHP]对辐射损伤小鼠骨髓细胞集落生成的影响。检测辐射损伤小鼠脾集落生成单位、红细胞集落生成单位、爆裂型红细胞集落生成单位、粒细胞 巨噬细胞集落生成单位、巨核细胞集落生成单位、混合集落生成单位的变化。5Gyγ射线照射后小鼠CFU S ,CFU E ,BFU E和CFU Mix明显减少,而SHP(2 0mg/kg～40mg/kg)可以抑制CFU S ,CFU E ,BFU E和CFU Mix下降。辐射损伤也可以引起小鼠CFU GM显著降低,但是,SHP(10mg/kg～40mg/kg)具有拮抗辐射损伤的作用,使CFU GM增加。单纯照射组小鼠CFU Meg显著低于正常对照组,SHP(4 0mg/kg)加照射组小鼠CFU Meg却显著高于单纯照射组。SHP对辐射损伤小鼠多能干细胞和造血祖细胞具有保护作用。

几种细胞因子对骨髓基质成纤维细胞集落形成的影响及意义

目的 :观察细胞因子粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、干细胞因子 (SCF)、白细胞介素 3(IL 3)、肿瘤坏死因子 (TNF)及其联合应用对骨髓基质成纤维细胞集落生成单位 (CFU F)形成的作用。方法 :应用体外骨髓基质细胞贴壁培养的方法 ,分别加入不同的细胞因子 ,进行培养 2周时的CFU F计数和培养 4周时贴壁细胞的增殖状态观察。结果 :GM CSF、SCF及TNF对骨髓基质细胞的增殖有明显的促进作用。结论 :体外加入某些细胞生长因子对骨髓基质细胞具有明显的扩增作用 ,提示基质细胞在体外适当细胞因子作用下扩增后进行回输 。

蝎毒多肽对小鼠骨髓造血集落形成的影响

目的：研究蝎毒多肽（scorpion venom peptide,SVP）组分Ⅳ,对正常小鼠骨髓造血集落形成的影响.方法：实验分为6组：空白对照组.细胞因子组,SVPIV低剂量组,SVPⅣ高剂量组,SVPⅣ低剂量＋细胞因子组、SVPⅣ高剂量＋细胞因子组.采用甲基纤维素半固体培养基培养骨髓造血细胞,在第7,11,14 d检测骨髓集落生成单位（CFU）数.采用瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态.结果：在第7 d,SVPⅣ低剂量组CFU数高于SVPⅣ高剂量组,在第11,14 d,SVPⅣ高剂量组CFU数高于细胞因子组和SVPⅣ低剂量组,与空白对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.各时间点SVPⅣ＋细胞因子组CFU数均高于其它组,其中在第7 d,SVPⅣ低剂量＋细胞因子组达到组间最高值,在第11,14 d时,SVPⅣ高剂量＋细胞因子组达到组间最高值,与空白对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.细胞形态观察结果显示：除了空白对照组,其余各组细胞类型均以粒-单核细胞为主.结论：SVPⅣ具有促进正常小鼠骨髓造血集落形成的作用.

重组人白介素11对豚鼠血小板减少的治疗作用

应用抗血小板血清造成豚鼠血小板减少症动物模型 ,观察人重组白细胞介素 11(rHuIL 11)对豚鼠血小板减少症的治疗作用 ,结果显示rHuIL 112 0 0 ,10 0 ,5 0 μg·kg-1均可明显升高豚鼠的血小板计数 ,增加骨髓巨核细胞集落生成单位 (CFU Meg)细胞集落数 ,与生理盐水对照组比较有明显差异。说明rHuIL

脯氨酸羟化酶抑制剂对小鼠间充质干细胞的动员作用

[目的]探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对小鼠间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)的动员作用。[方法]ICR小鼠随机分为对照组及3个DMOG动员剂量组(20、40、80mg·kg-1)。不同剂量的DMOG每天一次在固定的时间段腹腔内注射入ICR小鼠,对照组给予相同体积的生理盐水。采用流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测不同浓度DMOG处理后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量,Western blotting法检测骨髓细胞中HIF-1α、SDF-1α及VEGF蛋白的表达,ELISA法检测骨髓上清及外周血清中SDF-1α及VEGF蛋白的浓度。[结果]流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测发现不同剂量的DMOG处理7d后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量较对照组显著增加(P<0.05),且CD45-CD90+细胞群比例升高(P<0.05)。同时Western blotting法及ELISA法检测发现小鼠骨髓HIF-1α、SDF-1α表达上调,VEGF浓度升高(P<0.05)。[结论]DMOG对小鼠间充质干细胞具有动员作用,可能与通过上调HIF-1α,从而调控其下游相关通路有关。

培美曲塞敏感与耐药胰腺癌细胞株生物学行为观察及机制探讨

目的观察胰腺癌培美曲塞敏感株Patu8988和耐药株Patu8988/P生物学行为的差异,并探讨其可能的机制。方法取对数生长期的Patu8988、Patu8988/P细胞,分别采用双层软琼脂实验检测细胞集落生成能力、流式细胞仪检测细胞周期分布、Transwell小室检测细胞侵袭及转移能力,采用RT-RCR法、流式细胞仪检测胰腺癌细胞中的CD44mRNA及其蛋白。结果与Patu8988细胞比较,Patu8988/P细胞的克隆形成能力增强,G1期的细胞比例增加,S期减少,而侵袭转移能力减弱,CD44mRNA及其蛋白均表达增高,P均<0.05。结论 Patu8988/P、Patu8988细胞的生物学行为有不同程度的差异,主要表现在前者集落生成能力增强,侵袭、转移能力减弱等;CD44表达升高可能是造成这种差异的原因之一。

黄鼬干粉胶囊对再生障碍性贫血模型小鼠造血功能的影响

目的:观察黄鼬干粉胶囊对再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血功能的影响及作用机制。方法:采用X射线+环磷酰胺+氯霉素复合方法复制小鼠AA模型,观察黄鼬干粉胶囊对小鼠外周血象、骨髓有核细胞数(BMNC)、骨髓粒细胞-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)、血清中可溶性细胞间黏附因子1(s ICAM-1)和骨髓组织病理学的影响。结果:黄鼬干粉胶囊能明显增加模型小鼠外周血中HGB、RBC、WBC和PLT数量,能增加骨髓BMNC数量,还能升高骨髓CFU-GM和降低血清s ICAM-1。与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。骨髓组织病理学结果表明,黄鼬干粉能明显改善模型小鼠骨髓增生低下和造血灶减少,促进骨髓造血。结论:黄鼬干粉胶囊能改善AA模型小鼠造血功能,其作用机制可能与调节骨髓CFU-GM和血清s ICAM-1的平衡有关。

蝎毒多肽对辐射损伤小鼠骨髓造血干细胞及祖细胞的作用

目的探讨不同蝎毒多肽（scorpion venom peptide，SVP）组分对辐射后机体造血干细胞及祖细胞恢复的作用。方法6．0GyX射线一次性全身照射，制作辐射损伤小鼠模型。内源性脾结节法观察照射后第10天脾集落形成单位（CFU—s）的变化。用甲基纤维素半固体培养基培养骨髓混合集落生成单位（CFU-Mix），观察体内外给药方法及照射后不同时间对CFU-Mix生成的影响。结果（1）体内实验：SVPIV组分处理后的CFU-S数明显高于照射对照组（P〈0．05）；SVPV组分CFU-S数量与照射对照组差异无统计学意义。照射后各SVP组CFU—Mix的数量均高于照射对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）体外实验：与照射对照组相比，体外分别单独加入SVPIV、V组分以及细胞因子（IL-6和SCF）均能够促进CFU-Mix的增殖；而SVPⅣ、Ⅴ组分分别与细胞因子联合应用对CFU—Mix生成的促进作用更为明显，其中Ⅳ组分效果更强，与照射对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论SVP具有保护辐射损伤小鼠造血干细胞及祖细胞，加速其增殖能力恢复的作用。

自体脂肪移植的基质血管细胞群诱导体内健康乳腺组织和癌旁乳腺组织中内皮祖细胞的增殖

背景自体脂肪移植已被广泛应用于乳腺再造中。脂肪组织中含有大量的多功能间充质干细胞和血管祖细胞（统称为脂肪来源干细胞或ASCs）。分离脂肪组织，得到含有ASCs的脂肪组织细胞群称为基质血管细胞群（SVF）。尽管其在临床上得到广泛的应用，但SVF与乳腺组织之间的相互作用尚不明确。我们研究的目的是探讨SVF对健康乳腺组织和癌旁乳腺组织的乳腺上皮祖细胞的影响。方法健康的乳腺组织来源于接受缩乳术的患者，腹部脂肪提取物来源于接受吸脂术的患者。癌旁乳腺组织来源于接受皮瓣重建的患者。使用细胞消化设备将SVF样本（来源于脂肪提取物）和乳腺组织细胞分离。SVF中的ASCs通过分化、成纤维细胞集落生成单位和表面标记物试验进行测定。最后，将SVF细胞分别与健康的乳腺组织细胞和癌旁乳腺组织细胞共同在三维培养基中培养（Mareigel）。将健康的乳腺细胞和癌旁组织乳腺细胞单独培养，作为对照组。14d后，用集落形成细胞试验对每组的全部细胞数量和乳腺上皮祖细胞数量进行定量。结果分化、CFU—f和表面标记物试验表明，在SVF样本中存在ASCs。CFC试验结果表明，SVF与癌旁乳腺组织细胞共同培养，乳腺上皮祖细胞扩增9倍（对照组扩增3倍），SVF与健康的乳腺细胞培养扩增5．5倍（对照组2倍）。结论SVF无论是在健康的组织中，还是在乳腺附近的组织中，都能促进乳腺上皮祖细胞的增殖。本研究表明，自体脂肪移植中的SVF和乳腺组织中的祖细胞会相互作用。