鱼类雌性特异蛋白的分离与生化检验及其促进鱼类繁殖能力的研究

Aida(1973)首先报道了雌性香鱼的血清中含有雌性特异蛋白。Nath等(1981)也报道了雌性鲇鱼的雌性特异蛋白的分离和鉴定。Wallace(1974)论述了卵黄蛋白原(即雌性特异蛋白)在肝脏合成及在激素的作用下通过血流进入性腺的过程。作者自1980年以来先后报道过10种海水及淡水雌性鱼类血清中含有雌性特异蛋白,对雌性特异蛋白各种氨基酸的含量和组成以及物理化学的特性也进行了分析测定,并开展了应用雌性特异蛋白的科学实验。

雌性特异蛋白在鱼类人工繁殖中的应用

本实验通过对几种鱼及对虾注射雌性特异蛋白(FS蛋白),证明雌性特异蛋白有促进产卵及提高受精率和孵化率的作用。

雌性特异蛋白复合物促鱼类性腺发育及提高孵化率机制的研究

本实验系用生物化学方法从鲤鱼性腺中提取出一种雌性特异蛋白复合物,氨基酸分析发现该复合物含有全部必需氨基酸;将该蛋白复合物注射到雌性大阪鲫鱼体内,发现鱼的血清中蛋白质含量增加,同时对大阪鲫鱼肝脏分析发现核糖核酸(RNA)含量也增加。

雌性特异蛋白生物活性的研究

本实验采用蟾蜍离体跌卵法和鱼类腹腔注射法证明雌性特异蛋白有促进鱼类性腺发育的作用。

小体鲟卵黄雌性蛋白分离纯化及抗血清的研制

采用凝胶柱层析法,对小体鲟(Acipenser ruthenusLinnaeus)卵黄蛋白粗提液进行分离纯化。小体鲟卵黄蛋白粗提液的质量浓度为25.04 mg/mL,经Sephadex G-200层析后出现3个蛋白峰。用聚丙烯凝胶电泳、免疫印迹(Western-blotting)和免疫扩散等方法研究表明,小体鲟卵黄蛋白由分子量分别为132.1 kD、97.4 kD、85.9 kD、67.0 kD、59.2 kD、47.6 kD、30 kD、14.3 kD和12.8 kD的9个亚基组成;层析后峰B蛋白为卵黄雌性特异蛋白(yolk female specific protein,YFSP),是一种糖脂磷蛋白,具有雌性特异性和组织特异性,抗体具有种属特异性。Western-blotting结果表明,卵黄雌性特异蛋白(YFSP)与血清雌性蛋白(FSSP)免疫印迹图谱上都显示分子量为97.4 kD和30 kD的2条杂交带,可见两种蛋白在免疫原性上具有相似性。