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哲罗鲑雌性蛋白的研究 被引量:2
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作者 王金燕 张颖 +2 位作者 王凤 霍堂斌 尹家胜 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期422-427,共6页
采用柱层析、蛋白质免疫印迹和电泳等方法,对哲罗鲑Hucho taimen的雌性蛋白进行了系统研究。结果表明:哲罗鲑血清和卵黄中均存在雌性蛋白,其雌性蛋白的性质相同,均为糖脂磷蛋白;与血清雌性特异蛋白一样,卵黄雌性特异蛋白的相对分子质量... 采用柱层析、蛋白质免疫印迹和电泳等方法,对哲罗鲑Hucho taimen的雌性蛋白进行了系统研究。结果表明:哲罗鲑血清和卵黄中均存在雌性蛋白,其雌性蛋白的性质相同,均为糖脂磷蛋白;与血清雌性特异蛋白一样,卵黄雌性特异蛋白的相对分子质量也为460 000,由相对分子质量分别为137 800、84 200和10 800的3个亚基组成,等电点为5.60;卵黄雌性蛋白的兔抗血清均与哲罗鲑雌性血清发生免疫反应,不与雄性血清发生免疫反应,表明这两种蛋白均具有雌性特异性;两种蛋白的抗血清可以相互检测,表明哲罗鲑雌鱼血清中雌性蛋白与卵黄中的雌性蛋白在免疫原性上和结构上具有较高的同源性。 展开更多
关键词 哲罗鲑 血清 卵黄 雌性蛋白
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小体鲟卵黄雌性蛋白分离纯化及抗血清的研制 被引量:10
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作者 霍堂斌 张颖 +1 位作者 孙大江 曲秋芝 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期532-539,共8页
采用凝胶柱层析法,对小体鲟(Acipenser ruthenusLinnaeus)卵黄蛋白粗提液进行分离纯化。小体鲟卵黄蛋白粗提液的质量浓度为25.04 mg/mL,经Sephadex G-200层析后出现3个蛋白峰。用聚丙烯凝胶电泳、免疫印迹(Western-blotting)和免疫扩散... 采用凝胶柱层析法,对小体鲟(Acipenser ruthenusLinnaeus)卵黄蛋白粗提液进行分离纯化。小体鲟卵黄蛋白粗提液的质量浓度为25.04 mg/mL,经Sephadex G-200层析后出现3个蛋白峰。用聚丙烯凝胶电泳、免疫印迹(Western-blotting)和免疫扩散等方法研究表明,小体鲟卵黄蛋白由分子量分别为132.1 kD、97.4 kD、85.9 kD、67.0 kD、59.2 kD、47.6 kD、30 kD、14.3 kD和12.8 kD的9个亚基组成;层析后峰B蛋白为卵黄雌性特异蛋白(yolk female specific protein,YFSP),是一种糖脂磷蛋白,具有雌性特异性和组织特异性,抗体具有种属特异性。Western-blotting结果表明,卵黄雌性特异蛋白(YFSP)与血清雌性蛋白(FSSP)免疫印迹图谱上都显示分子量为97.4 kD和30 kD的2条杂交带,可见两种蛋白在免疫原性上具有相似性。 展开更多
关键词 小体鲟 卵黄蛋白 卵黄雌性特异蛋白
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雌性特异蛋白质复合物促黄鳝性腺发育、提高黄鳝孵化率 被引量:8
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作者 王浩 刘荣臻 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第4期353-355,359,共4页
自Aida(1973)在香鱼的血清研究中报导了鱼的血清含有雌性特异蛋白以来,已有许多学者对鱼的雌性蛋白的生化特性、分子量以及生化提纯进行了一些工作,还用同位素示踪追踪C<sup>14</sup>在雌性特异蛋白合成的过程。但应用雌... 自Aida(1973)在香鱼的血清研究中报导了鱼的血清含有雌性特异蛋白以来,已有许多学者对鱼的雌性蛋白的生化特性、分子量以及生化提纯进行了一些工作,还用同位素示踪追踪C<sup>14</sup>在雌性特异蛋白合成的过程。但应用雌性特异蛋白和雌性鱼类性腺蛋白质复合物在黄鳝人工繁殖时期促进性腺发育和提高黄鳝苗的孵化率工作,直到目前为止,国内外还没有发现有人报导过。我们这项科研目的就是要提高黄鳝人工孵化的效果。 展开更多
关键词 黄鳝 雌性蛋白 性腺发育 孵化率
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鱼类雌性特异蛋白的分离与生化检验及其促进鱼类繁殖能力的研究 被引量:3
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作者 刘荣臻 王浩 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第4期372-375,共4页
Aida(1973)首先报道了雌性香鱼的血清中含有雌性特异蛋白。Nath等(1981)也报道了雌性鲇鱼的雌性特异蛋白的分离和鉴定。Wallace(1974)论述了卵黄蛋白原(即雌性特异蛋白)在肝脏合成及在激素的作用下通过血流进入性腺的过程。作者自1980... Aida(1973)首先报道了雌性香鱼的血清中含有雌性特异蛋白。Nath等(1981)也报道了雌性鲇鱼的雌性特异蛋白的分离和鉴定。Wallace(1974)论述了卵黄蛋白原(即雌性特异蛋白)在肝脏合成及在激素的作用下通过血流进入性腺的过程。作者自1980年以来先后报道过10种海水及淡水雌性鱼类血清中含有雌性特异蛋白,对雌性特异蛋白各种氨基酸的含量和组成以及物理化学的特性也进行了分析测定,并开展了应用雌性特异蛋白的科学实验。 展开更多
关键词 雌性特异蛋白 人工繁殖 鱼类繁殖
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雌性特异蛋白在鱼类人工繁殖中的应用 被引量:1
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作者 刘荣臻 王浩 王立新 《水产养殖》 CAS 1990年第4期12-12,共1页
本实验通过对几种鱼及对虾注射雌性特异蛋白(FS蛋白),证明雌性特异蛋白有促进产卵及提高受精率和孵化率的作用。
关键词 雌性特异蛋白 受精率 孵化率 鱼类
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鲫鱼雌性有关蛋白的研究 被引量:1
6
作者 刘澎涛 蒋耀青 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1990年第4期276-281,共6页
本文利用聚丙烯酰胺、SDS、超薄平板等电聚焦等多种电泳方法,对不同性别鲫鱼的血清分析后,发现了两种与雌性有关的特异血清蛋白,FSSP-Ⅰ及FSSP-Ⅱ。分离提纯了含量较多的FSSP-Ⅱ,其分子量、等电点、氨基酸组成分析的结果证明,它是一类... 本文利用聚丙烯酰胺、SDS、超薄平板等电聚焦等多种电泳方法,对不同性别鲫鱼的血清分析后,发现了两种与雌性有关的特异血清蛋白,FSSP-Ⅰ及FSSP-Ⅱ。分离提纯了含量较多的FSSP-Ⅱ,其分子量、等电点、氨基酸组成分析的结果证明,它是一类与已报道过的鱼类雌性蛋白极不相同的、与性别有关的蛋白。为性别问题的研究提供了有意义的资料。 展开更多
关键词 鲫鱼 雌性蛋白 性别
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雌性特异蛋白复合物促鱼类性腺发育及提高孵化率机制的研究 被引量:1
7
作者 刘荣臻 王浩 李炎 《水产养殖》 CAS 1993年第1期22-23,共2页
本实验系用生物化学方法从鲤鱼性腺中提取出一种雌性特异蛋白复合物,氨基酸分析发现该复合物含有全部必需氨基酸;将该蛋白复合物注射到雌性大阪鲫鱼体内,发现鱼的血清中蛋白质含量增加,同时对大阪鲫鱼肝脏分析发现核糖核酸(RNA)含量也... 本实验系用生物化学方法从鲤鱼性腺中提取出一种雌性特异蛋白复合物,氨基酸分析发现该复合物含有全部必需氨基酸;将该蛋白复合物注射到雌性大阪鲫鱼体内,发现鱼的血清中蛋白质含量增加,同时对大阪鲫鱼肝脏分析发现核糖核酸(RNA)含量也增加。 展开更多
关键词 雌性特异蛋白 孵化率 鱼类
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广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1基因的克隆表达及免疫学效应分析
8
作者 李素丽 詹希美 李海飞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期563-567,共5页
目的对广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp-1)基因的开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫学效应分析,评价其重组蛋白在免疫学诊断中的应用前景。方法逆转录聚合酶链反应扩增目的基因,克隆至原核表达载体pET-30a-c(+),重组质粒... 目的对广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp-1)基因的开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫学效应分析,评价其重组蛋白在免疫学诊断中的应用前景。方法逆转录聚合酶链反应扩增目的基因,克隆至原核表达载体pET-30a-c(+),重组质粒转化至大肠埃希菌E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍离子亲和层析(Ni-IDA)纯化分离表达产物。免疫印记(Western-blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析重组蛋白的免疫性。结果广州管圆线虫Ac-fmp-1基因的编码区有1 251个碱基,编码417个氨基酸。原核表达载体pET-Ac-fmp-1构建成功,IPTG诱导表达获得了体外高效表达的重组融合蛋白,经亲和层析得到纯化蛋白。融合蛋白可被感染广州管圆线虫的SD大鼠血清及病人血清所识别;作为包被抗原用于ELISA检测大鼠血清其敏感性与特异性均为100%,与粗抗原无差别;检测广州管圆线虫病人血清敏感性为100%,与粗抗原有差别;检测其他寄生虫病人血清与正常病人血清其特异性为100%和98%,与粗抗原相比特异性较高。结论广州管圆线虫Ac-fmp-1基因在原核表达系统获得高效表达,编码蛋白可能是虫体的重要抗原成分,在免疫学诊断方面有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 雌性成虫肌蛋白一1 基因克隆 原核表达 免疫诊断
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雌性特异蛋白生物活性的研究
9
作者 王浩 刘荣臻 +1 位作者 解焱 王立新 《水产养殖》 CAS 1989年第4期16-17,共2页
本实验采用蟾蜍离体跌卵法和鱼类腹腔注射法证明雌性特异蛋白有促进鱼类性腺发育的作用。
关键词 蟾蜍 雌性特异蛋白 鱼类 生物活性
全文增补中
广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:2
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作者 李素丽 詹希美 谢建生 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第10期907-911,共5页
目的对广州管同线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp1)基因的开放渎码框进行克隆,分析序列结构、功能特征及编码蛋白的理化性质,并构建体外表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应和,TA克隆方法克隆Ac—fmp—l基因的开放读码框全长;运用N... 目的对广州管同线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp1)基因的开放渎码框进行克隆,分析序列结构、功能特征及编码蛋白的理化性质,并构建体外表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应和,TA克隆方法克隆Ac—fmp—l基因的开放读码框全长;运用NCBI网站和ExPaSy等七物信息学在线工具分析Ac—fmp-1基因编码序列及其编码氨基酸的理化性质、结构及功能;采用基因克隆技术定向克隆至原核表达载体pET一30ac(+),构建Acfmp一1基因重组表达质粒。结果扩增和克隆了广州管网线虫Acfmp1基因开放读码框序列,此序列大小为1251bp,勺GenBank数据库中AcImp-1基因的编码序列同源性为99.6%,编码417个氨基酸。ProtParam预测陔基因编码蛋白在溶液中不稳定、保守性差,未发现跨膜区域。PHD法二级结构预测该蛋白质分子为a螺旋型,于氨基酸残基346~404位点处含有一个锌指结构,SignalP软件预测该蛋白分子无信号肽序列,具有较强的亲水性。该基因编码蛋白的氨基酸序列中,含有16个潜在的B细胞抗原表位。构建的原核表达载体pET—Acfmp1成功定向插入了Acfmp-1基因。结论成功扩增和克隆了广州管圆线虫Ac—fmp-1基因,编码蛋白可能是广州管圆线虫的重要抗原成分,可作为广州管网线虫病的疫苗候选分子和药物靶标。构建了用于体外表达的原核表达载体,为进行Acfmp-1功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 广州管圆线虫 雌性成虫肌蛋白-1 克隆 生物信息学 原核表达
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Dietary zinc and metallothionein on small intestinal disaccharidases activity in mice 被引量:2
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作者 Cuong D Tran Johanna Cool Cory J Xian 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第3期354-360,共7页
AIM: To examine the effect of increasing dietary zinc (Zn) intake and the lack of metallothionein (MT) expression on activity of small intestinal disaccharidases. METHODS: MT-Ⅰ and Ⅱ knockout (MT-/-) and wild-type (... AIM: To examine the effect of increasing dietary zinc (Zn) intake and the lack of metallothionein (MT) expression on activity of small intestinal disaccharidases. METHODS: MT-Ⅰ and Ⅱ knockout (MT-/-) and wild-type (MT+/+) female mice at 3.5 wk of age were randomly fed with a diet containing 2 (2 Zn), 15 (15 Zn) or 50 (50 Zn) mg Zn/kg (n = 8/group/genotype) for 5 wk. Small intestinal segments (duodenum, jejunum and ileum) were collected and either fixed in 10% formalin for histological analysis or snap frozen in liquid nitrogen for sucrase, lactase and maltase activity analyses.RESULTS: Plasma Zn was significantly (P < 0.05) lower (33%) in MT-/- compared with MT+/+ mice fed the 2 Zn diet. Villus height and crypt depth were increased by approximately 15% in MT+/+ mice compared with MT-/- mice. Duodenal disaccharidase activities were significantly higher in MT+/+ compared with MT-/- mice particularly in those fed the 2 Zn diet. For the 50 Zn diet, jejunal sucrase and lactase activities were significantly higher in MT-/- (13 313 ± 2314; 4107 ± 364 μmol glucose/well/min/g tissue, respectively) compared with MT+/+ mice (7054 ± 608; 1818 ± 174). Similarly, ileal lactase activities were higher in MT-/- (1480 ± 192) compared with MT+/+ (629 ± 353) mice particularly those fed the 2 Zn diet. CONCLUSION: Increasing dietary Zn has little effect on disaccharidases activity in MT wild-type mice. The presence of MT may enhance morphological and functional development of the gut. 展开更多
关键词 LACTASE MALTASE SUCRASE METALLOTHIONEIN DIET ZINC
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Studies on Physiological and Biochemical Properties of Female Specific Serum Protein and Its Immunocytochemical Localization in Carassius auratus cuvieri(Temminck & Schlegel)
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作者 刘荣臻 郑允文 王浩 《Developmental and Reproductive Biology》 1993年第1期54-65,T001-T003,共15页
Female-specific serum protein(FSSP)is normally present in the sera of female fish,but it is notfound in males.However,estradiol benzoate(EB)was found to induce the appearance of FSSP inmale fish and immature female fi... Female-specific serum protein(FSSP)is normally present in the sera of female fish,but it is notfound in males.However,estradiol benzoate(EB)was found to induce the appearance of FSSP inmale fish and immature female fish.Massive doses of FSSP caused a rapid increase in FSSP.Ultrastructural examination of the liver indicated an extensive proliferation of the rough endoplasmicreticulum and a decrease in glycogen and lipid droplets after EB injection.A preparative PAGE for isolating highly purified FSSP from the serum of EB-treated fish,Carassiusauratus cuvieri(Temminck & Schlegel),is described.Purified FSSP obtained from EB-induced O-crucian fish has a molecular weight of 466,000±4,000(n=10),while that in mature female serumis 480,000±40,000(n=2).FSSP appears to be a dimer,with the size of the possible monomerbeing 240,000±8,000(n=6).SDS-PAGE on gradient gels indicated that sera from males given multiple(12)injections of EBcontain a main band with a molecular weight of 147,000±6,000(n=6).However,the same serumsamples provided three bands of protein on the PAGE gels.Antiserum was raised against the electrophoretically purified FSSP.The resulting antibody formeda single,continuous precipitation line with sera from EB-treated males and vitellogenic females,butnot with that from normal males.lmmunocytochemistry(PAP method)was used to locate FSSP in the liver and ovary of maturefemales and the liver of EB-treated males.Strongly positive particles were found clustered in groupsaround liver cell nuclei under light microscopy,and the yolk granules in the oocytes were also filledwith positive particles. 展开更多
关键词 Carassius auratus cuvieri Female Specific Serum Protein(FSSP) Estradiol benzoate(EB) Peroxidase-Anti-Peroxidase(PAP)
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Stimulation of Brain Tubulin Synthesis by Estrogen in Ovariectomized Mice and Intact Female Mice
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作者 GUO Shou-xiang ZHANG Mo-ling +1 位作者 TIAN De-run LI Yun-sheng SUN Yu-ling and RENXue-jun(Department of Biochemistry. Tianjin. Medical University. Tianjin300070 PRC) 《Developmental and Reproductive Biology》 1995年第2期13-16,共4页
The effect of sex hormones on the biogenesis of brain tubulin has been studied in the ovariectomized middle-aged and ovary-intact old-aged female mouse.The results show the much stronger role estrogen plays in stimula... The effect of sex hormones on the biogenesis of brain tubulin has been studied in the ovariectomized middle-aged and ovary-intact old-aged female mouse.The results show the much stronger role estrogen plays in stimulating tubulin synthesis than testosterone. Estradiol increased the contents of brain tubulin by 15%-41%. Estradiol and progesterone together can produce a 23%-49% increase. Maybe this experiment revealed a kind of new action of estrogen, i.e., stimulates brain tubulin syntheses in adult mouse.It is important that the effect of estrogen on stimulating tubulin synthesis takes place after the critical period of brain development. All of these mean that estrogen still plays its role in stimulating tubulin synthesis wile thyroid hormones can't play this kind of role during this time. 展开更多
关键词 TUBULIN ESTRADIOL PROGESTERONE ESTROGEN Mouse.
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